梅花鹿慢性心内炎病因分析与防制对策

本论文采用2000年与2001年两年的病例分析,结果表明,锯茸是感染本病的主要途径.     

基于3种抗原的融合表达蛋白建立牛分枝杆菌抗体ELISA检测方法

为建立一种诊断牛结核病的间接ELISA方法,以牛分枝杆菌Rv3403c、CFP10和ESAT6蛋白为靶标抗原,通过酶切连接和重叠延伸PCR方法,将3个抗原基因串联在pET-28a载体上,基因之间用Linker序列连接,构建出pET-28a-Rv3403c-CFP10-ESAT6并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,纯化目的蛋白并分析其反应原性。以纯化后的融合蛋白作为包被抗原建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示：通过SDS-PAGE和Western blot鉴定分析,成功表达并纯化出包涵体蛋白Rv3403c-CFP10-ESAT6,目的蛋白具有良好的反应原性;以融合蛋白为包被抗原建立的间接ELISA抗体检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,与其他牛病原体阳性血清不发生交叉反应。临床结果显示,本方法与商品化试剂盒阳性符合率为66.7%,阴性符合率99.3%,总符合率为99.3%。研究表明,成功串联表达了具有良好反应原性的融合蛋白Rv3403c-CFP10-ESAT6,并以此为包被抗原建立了一种牛分枝杆菌间接ELISA抗体检测方法,为检测和净化牛结核病提供了诊断工具。     

新生仔猪腹泻病的诊断及防控

近几年来,新生仔猪腹泻在东南亚多个养猪国家呈现高发病率、高死亡率的流行态势,波及我国南方10余个养猪大省,死亡仔猪超过100万头,给我国养猪行业造成了巨大的经济损失。目前对其病因的研究与探索还在持续,尚未达成统一看法,如：“新病毒说”（博卡病毒、Kobu病毒、杯状病毒等）,“病毒变异学说”（PED的新毒株、变异性轮状病毒等）。近3年来我市及周边地区大部分养猪场都不同程度的发生以初生至7日龄哺乳仔猪为主的猪腹泻病,发病之普遍,病死率之高,实属罕见,给养猪业带来了很大损失,现将该病的发病情况、治疗方法及临床效果进行总结,同时,结合实验室检测结果,提出有关防控技术建议,与同行交流、参考。     

梅花鹿慢性心内炎病因分析与防制对策

本论文采用2000年与2001年两年的病例分析，结果表明，锯茸是感染本病的主要途径。     

连云港规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟血清学调查

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病。猪瘟是由猪瘟病毒（CSFV）引起的一种高度接触性传染病。这两种病自发现以来给我国养猪业造成了巨大的经济损失,近几年来我国大部分地区夏秋季出现猪的高热病,     

中药"金丝桃素"治疗仔猪传染性胃肠炎的体会

猪传染性胃肠炎是一种以呕吐、严重腹泻、失水和对新生仔猪有高病死率为特征的高度接触性胃肠疾病.笔者采用中药"金丝桃素"结合其它抗菌素治疗68例1028头仔猪,治愈率96.7%,疗效满意.     

猪源益生菌EP株突变株EP△asd的构建和初步应用

为研制更加安全的大肠杆菌疫苗株,并将其开发为新型活疫苗载体,本研究采用电转化将氯霉素抗性基因片段转化至益生菌EP株。采用同源重组技术使氯霉素抗性基因的PCR产物通过其两侧asd基因序列与益生菌EP基因组中的asd基因发生同源重组。通过氯霉素抗性平板筛选得到阳性克隆,对筛选得到的阳性克隆再导入编码Flp重组酶的质粒p CP20以去除抗性基因,从而构建成EP△asd突变株。该缺失突变株可以与表达链球菌asd基因的质粒形成功能性互补,转化有上述质粒的EP△asd突变株可长时间定居于仔猪肠道。本研究为进一步开发以益生菌EP△asd为染色体—质粒平衡致死系统宿主菌的用于预防仔猪肠道性传染病的细菌活载体疫苗研究奠定基础。     

非洲猪瘟病毒p30二聚体鉴定及胶体金免疫层析方法建立

为建立一种制备简单、灵敏度高的非洲猪瘟病毒(ASFV)抗原快速检测方法,利用双表达载体pIRES在293A细胞上表达带有His标签和Flag标签的p30重组蛋白,裂解细胞后,通过免疫共沉淀发现p30重组蛋白以聚合体形式存在,进一步用质谱方法对原核系统表达纯化的p30重组蛋白进行分子量测定,结果证实,ASFV p30能自发形成二聚体。在此基础上,用抗p30的单克隆抗体6H9A10建立了单一单克隆抗体夹心检测p30二聚体的胶体金免疫层析方法,该方法对p30重组抗原最低检测浓度为2.1 ng·mL^-1,对PRV、CSFV、PRRSV、PCV-2、PEDV、PPV、SVA等抗原检测结果均为阴性;用该胶体金免疫层析方法检测已知的100份临床样品,其中包含20份ASFV阴性血清、20份ASFV阴性组织、10份ASFV阴性血浆、21份ASFV阳性血清、21份ASFV阳性组织、8份ASFV阳性血浆,结果显示,检测出的48份阴性样品和49份阳性样品与已知结果一致。综上,建立的单个单克隆抗体夹心检测p30的胶体金免疫层析方法具有良好的特异性和敏感性,有望用于ASFV抗原的临床快速检测...     

中西医结合治疗猪水肿病

猪水肿病是一种引起仔猪急性、致死性的肠毒血症,其特征是胃壁和其他某些部位发生水肿,发病不高,但病死率较高,可达90%.笔者根据多年临床经验,采用中西医结合治疗,疗效满意.