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应用原核表达的猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白建立一种间接ELISA诊断方法 总被引：7，自引：2，他引：7
本试验在最佳诱导条件下获得猪圆环痛毒Ⅱ型重组Cap蛋白的基础上，利用HisBind蛋白质纯化试剂盒对表达产物进行纯化，通过Westernblot检测证明表达产物具有良好的抗原性。以纯化后的重组融合蛋白作为诊断抗原，对ELISA反应条件进行优化，初步建立了检测PCV2抗体的间接ELISA方法。用该法对广东、广西一些地区收集到的380份血清样品进行检测，检测结果阳性率为86．1％，从中随机取90份猪血清样品与国产商品化试剂盒检测结果对比，符合率为95．6％，表明本实验建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性，适于大规模检测PCV2血清抗体的流行病学调查。 相似文献
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从广东番禺某猪场病死仔猪中分离到一株疑为猪伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）毒株,通过对其理化特性的鉴定,中和试验,实验动物回归试验,电镜观察,ＰＣＲ扩增及感染力测定,发现其对氯仿、乙醚均敏感,能中和Ｐｒ不标准阳性血清,实验兔接种该病毒后,发生瘙痒并麻痹致死,电中见病毒粒子呈示规则圆形并带有囊和纤窝。ＰＣＲ体外扩增可见其不Ａ株在同一水平位置上有相同的电泳带,用Ｍａｒｃ１４５测定其毒为１０＾７．５ＴＣＩＤ５０／ 相似文献
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O型口蹄疫病毒VP1基因的克隆与表达 总被引：8，自引：0，他引：8
以O型口蹄疫病毒(FMDV)流行毒株为研究对象,通过RT-PCR扩增出VP1基因,克隆至表达载体pET-32a中,分析比较不同地区O型口蹄疫病毒VP1基因序列,为构建VP1重组基因工程苗奠定基础．经测序表明,目的基因VP1已以正确的阅读框架整合至表达质粒中,应用大肠杆菌BL21(DE3)为宿主菌,通过IPTG诱导方法,表达包含VP1基因产物的融合蛋白,经SDS-PAGE和Western—blotting分析,表明表达蛋白表达量高,反应原性良好． 相似文献
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参考GenBank中发表的猪源O型口蹄疫病毒(FMDV)3ABC的基因序列,设计一对特异引物,分别以5株猪源O型FMDV流行毒株基因组RNA为模板,通过RT-PCR的方法获得3ABC基因,并克隆到pMD18-T载体中.测序结果显示:5株O型FMDV流行毒株的3ABC基因cDNA均为1 281bp,编码由427个氨基酸残基组成的多肽.同源性比较和系统发育树分析表明:5株O型FMDV流行毒株亲缘关系密切,属同一基因型. 相似文献
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伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseurdorabies virus，PRV)引起的多种家畜、野生动物、伴侣动物和实验动物的一种急性传染病。PRV在自然条件下能感染猪、牛、羊、犬、猫、兔、鼠、野猪、貂、熊、狐等动物。除猪以外，其它动物感染PRV后，出现发热、奇痒和急性脑脊髓炎等典型症状。目前，这种高度传染性的病 相似文献
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鸡胚的接种常用于鸡病毒性疾病、霉形体病以及某些细菌性疾病的病原分离培养,同时也常用于禽类一些病毒性疫苗的制造。要进行鸡胚接种,首先必须了解鸡胚的基本结构。10—11天龄鸡胚,其基本结构大致如图一。常用的鸡胚接种方法有三种。无论采用哪一种接种法,都必须选择合适的胚龄,照蛋后用蜡笔划出气室和胎位,然后用约40℃的1% 相似文献
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参照genbank已发表的猪圆环病毒2型的基因序列，设计l对2型特异的引物，对广东省20个猪场送检的患病断奶仔猪的病料进行PCR扩增，并将PCR产物连接到pMDl8-T载体上，对重组质粒进行PCR、酶切鉴定及测序，最后发现PCR检测均为阳性。 相似文献
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鸡新城疫的调查及诊断 总被引：1，自引：0，他引：1
新城疫是一种由副粘病毒引起的急性、高度接触性传染病，是目前严重危害养鸡业的一种传染病。本病任何季节都可发生，但以春、冬两季较多见。由于该病分布广、传播快，同时还常继发其他病毒性及细菌性疾病，对养鸡生产威胁很大。 近年来广州郊区、南海、顺德、番禺、东莞、新会等地区鸡群连续发病，以呼吸道症状为主，且死亡率高，给养鸡业带来重大的经济损失。为进一步弄清疾病的情况，笔者对番禹、东莞、新会等地的一些发病鸡群进行了调查及实验室诊断，现报道如下。 一、发病情况调查 （一）调查方法 近年来。我们分别在东莞（Ｄ）、新会… 相似文献