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狮头鹅α-干扰素基因的克隆与遗传分析 总被引:3,自引:1,他引:2
从狮头鹅外周血细胞中提取基因组DNA,采用巢式PCR方法扩增α-干扰素基因片段(d-Go-IFN-α);同时从新城疫病毒(NDV)刺激培养外周血淋巴细胞提取总RNA,用RT-PCR方法扩增α-干扰素基因片段(m-Go-IFN-α),将上述扩增片段分别克隆到pGEM-T载体并进行序列测定。结果表明,α-干扰素基因全长均为576 bp,编码192个氨基酸,比较d-Go-IFN-α和m-Go-IFN-α的核苷酸序列,可见155位核苷酸由A突变为G,相应地52位氨基酸由M突变为R,提示狮头鹅α-干扰素基因存在单链核苷酸多态性;狮头鹅与其它家禽品种α-干扰素基因的核苷酸序列同源性介于41.2%~98.3%之间,其推导的氨基酸序列同源性为13.0%~96.4%,不同鹅品种的α-干扰素具有极为相似的二级结构。 相似文献
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目的 探讨胰岛素抵抗素基因是否存在单核苷酸多态性,及其与肥胖、脂肪沉积的相关性。方法 本试验选择纯种蓝塘猪、陆川猪、临高猪、长白猪、大白猪、杜洛克,采用PCR-SSCP方法,结合相关测定指标做进一步基因分析。结果 在供试的6种纯种猪中抵抗素基因启动子检测到CC、TT、CT 3种基因型,内含子-1有EE、FF、GG、EF、EG、FG 6种基因型,内含子-2有LL、MM、NN、LM、LN、MN 6种基因型,外显子-2有CC、GG 2种基因型,基因频率与脂肪沉积量分析表明两者存在相关。结论 抵抗素基因存在单核苷酸多态性,且与脂肪沉积调控有关。 相似文献
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新城疫病毒广东分离株HN基因的克隆与序列分析 总被引:3,自引:0,他引:3
用RT-PCR方法从6个新城疫病毒(NDV)广东分离株中扩增HN基因cDNA片段。并将其克隆至pGEM-T Easy载体进行核苷酸序列测定。结果表明,6个NDV分离株HN基因片段长度均为1704bp,编码568个氨基酸;彼此间核苷酸和氨基酸同源性分别为96.0%~99.8%和98.6%~100%,与其他基因Ⅶ型毒株的氨基酸序列同源性为96.8%~98.4%;但与其他基因型毒株如D26、Ulster/67、B1、LaSota以及GB Texas的氨基酸同源性较低,为88.2%~91.0%。 相似文献
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为研究JAK/STAT和PI3K/AKT信号通路在小反刍兽疫病毒(PPRV)宿主细胞天然免疫中的作用,在PPRV感染山羊肾细胞24、48和72 h后,分别用MTT试验和间接免疫荧光试验(IFA)检测病毒感染细胞活力及其在细胞中的分布;用qRT-PCR和Western-blot分别检测病毒蛋白、Nectin-4受体、 JAK/STAT和PI3K/AKT信号通路及其下游信号分子表达水平的变化。结果表明,PPRV感染24、48和72 h后的细胞存活率分别为99.53%、77.12%和66.87%,病毒H和N蛋白表达水平显著增加(P<0.05);但Nectin-4表达无显著变化(P>0.05);p-STAT1/STAT1比值极显著升高(P<0.01);ISG20、ISG15、IRF9、IRF3、IFNβ和IFNα表达水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01);p-AKT表达水平极显著升高(P<0.01);p-AKT/AKT、p-NFκB/NFκB、p-GSK/GSK和p-CREB/CREB比值均显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01... 相似文献
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本文通过研究环磷酰胺(CY)免疫抑制的机制,来进一步探讨谷氨酰胺(Gln)在促进机体免疫功能及其对环磷酰胺免疫抑制的干预作用和机制。本试验选择1日龄艾维菌肉仔鸡320只,分4个处理组,环磷酰胺的注射剂量分别为0、2、4、8mg/kg,免疫抑制于试验第3周进行。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,其余分别在基础日粮上添加质量分数为0.1%、0.2%、0.4%的Gln进行饲喂,建立谷氨酰胺对环磷酰胺免疫抑制的调节作用的动物模型。研究结果表明,日粮中添加Gln可以改善试验组肉仔鸡的生长性能,使肉仔鸡外周血中T淋巴细胞的转化率、相关组织器官免疫指数、白细胞数和血清中IL-2的含量显著升高;同时,外周血中淋巴细胞凋亡率和血清sIL-2R、丙二醛(MDA)含量显著降低。因此,在此模型中,补充Gln可以有效地调节和提高肉仔鸡的免疫功能,提高试验组肉仔鸡的生长性能。预防免疫抑制的发生。 相似文献
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新城疫病毒HN蛋白球状头部在T4噬菌体衣壳表面的展示 总被引:1,自引:1,他引:0
用RT-PCR扩增新城疫病毒(NDV)hn基因,得到大小约1700bp的片段,将其克隆至pGEM-T easy载体并测定其核苷酸序列。根据测序结果,另设计1对引物带有EcoR I限制位点,用PCR扩增基因主要功能区即编码HN蛋白球状头部的hngd片段,将其分别克隆至pSOC和pR质粒soc基因3′端,重组质粒pSOC-HNGD转化E.coli BL-21(DE3)感受态细胞,以终浓度1mmol/L的1PTG诱导表达,在SDS-PAGE凝胶上检测到相对分子质量大小约67000的目的蛋白条带。随后将重组质粒pR-HNGD转化T4宿主菌E2感受态细胞.阳性克隆用溶菌酶缺陷的T4-Z1感染,用不加溶菌酶的SC平板筛选阳性克隆。经PCR鉴定,hngd片段已整合在T4-Z1的基因组中。纯化后的重组噬菌体T4-Z1-HNGD用SDS-PAGE和Western-blot可检测到67000的特异条带。结果表明,HNGD蛋白成功展示在T4噬菌体衣壳表面,且与NDV抗血清具有良好的反应性。 相似文献
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日粮蛋白质水平对肉仔鸡生产性能和免疫机能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
用5种蛋白质水平(0 ̄3周分别为19.44%、20.69%、21.56%、22.43%、23.26%;3~6周对应的为17.62%、18.78%、19.56%、20.34%、21.52%),研究了日粮蛋白质水平对肉仔鸡生产性能和免疫功能的影响。结果表明:日粮蛋白质水平对肉仔鸡增重和免疫功能均有显著影响,蛋白质不足或过量都将使肉鸡生产性能和免疫力下降,蛋白质不足比过量对肉鸡生长和免疫的更为不利。使肉鸡获得最大生产性能和最佳免疫力的蛋白质水平并不一致。本试验中,3周龄前获得最佳生产性能的蛋白质水平为22.43%,获得最佳免疫力的蛋白质水平为20.56% ̄21.56%;3 ̄6周龄时二者基本一致为19.96%。 相似文献