多重PCR方法快速检测粪样中产气荚膜梭菌

建立了多重聚合酶链反应 (multiplexPCR)检测产气荚膜梭菌的α_毒素和肠毒素 (enterotoxin)基因。该方法可以检测猪粪便样品或小肠内容物中肠毒性产气荚膜梭菌。首先猪粪便样品经前处理后 ,接种选择性培养基 ,再挑取单个菌落溶于超纯水中 ,煮沸提抽 ,制备样品DNA ,进行PCR检测。从实验中我们成功的扩增出 32 4bp的α毒素基因片段和 2 33bp的肠毒素基因片段。以人工污染样品 10倍系例稀释后进行检测 ,该方法的检测灵敏度达到 1.0× 10 4 CFU/g并对 5 8份猪粪便样品检测 ,获得 5 3株产气荚膜梭菌 ,分离率为 91%,其中 4株为带有肠毒素的产气荚膜杆菌 ,占整个分离菌株的 7.5 %。因此多重PCR方法在检测粪样中的产气荚膜梭菌是一种非常有用的方法并可以快速检出肠毒素 ,从而避免了使用动物作定型试验。     

硅对铝酸毒害下黄瓜生长发育的影响

采用盆栽试验和田间试验方法,研究硅对铝酸毒害下黄瓜幼苗MDA含量、POD活性等生理指标及黄瓜整个生长发育过程的影响.结果表明,2 mmol/L的AlCl3对黄瓜幼苗的生长发育有明显的抑制作用,当AlCl3浓度达到10 mmol/L时,严重抑制黄瓜的生长发育;加硅处理可以缓解铝酸毒害对黄瓜生长发育的抑制作用,缩短座果期,促进雌花开放,减少畸形瓜数.硅增强黄瓜对铝酸毒害抗性的最佳处理浓度范围在0.01～1.00 mmol/L;加硅处理可以显著降低黄瓜幼苗叶片中丙二醛(MDA)含量,显著增加过氧化物酶(POD)等保护酶的活性,减轻了黄瓜叶片膜脂的过氧化程度.生产上可通过加硅处理增加黄瓜对铝酸盐毒害的抗性,可进一步研究硅对铝酸酸化土壤的修复作用,进而通过施用硅肥增加黄瓜等经济作物的产量.     

抗鸡白痢沙门氏菌单抗及其在鸡白痢病检疫中的应用研究

应用淋巴细胞杂交瘤技术制备了一组针对鸡白痢沙门氏菌O_9抗原的单抗。以单抗3-47-26酶结合物和鸡白痢沙门氏菌脂多糖抗原建立了一种抗体竞争ELISA试验以检疫鸡白痢病,该法通过样品抑制酶标单抗与LPS的结合,以检测鸡白痢抗体。试验结果表明,79份鸡白痢阳性血清具有显著抑制作用(95.0％±4.3％),而130份鸡白痢阴性     

鸡痘病毒基因组DNA复制非必需片段的鉴定

将中国鸡痘病毒鹌鹑化弱毒株（２８２Ｅ４）蚀斑纯化，在ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞上增殖后，经超声波裂解，蔗糖梯度离心得到纯化病毒，以蛋白酶Ｋ消化，酚：氯仿、氯仿和水饱和乙醚抽捉，乙醇沉淀，得到ＦＰＶ基因组ＤＮＡ，后用ＥｃｏＲｌ消化，随机克隆到ｐＵＣ１８质粒中。限制性内切酶片段电泳分析结果表明，克隆到１０个不同大小的片段，根据酶切图谱分析，选取克隆或亚克隆后的单一酶切位点，插入标记基因（Ｐ１１一ＩａｃＤ筛选出３个复制非必需片段。为进一步构建表达外源片段重组质粒载体创造了良好的条件。     

新城疫病毒F_（48）E_8株cDNA文库的构建

以ＳＰＦ鸡胚繁殖我国标准新城疫病毒Ｆ＿（４８）Ｅ＿８强毒株，经蔗糖密度梯度超速离心纯化病毒。再以酚－ＳＤＳ法提取病毒基因组ＲＮＡ，作为反应模板、采用Ｐｒｏｍｅｇａ公司商品试剂盒合成双股ｃＤＮＡ。以同聚物加尾的方法将ｃＤＮＡ克隆到质粒ｐＧＥＭ３Ｚｆ（一）中，经ＡＩＸ平板筛选，限制性内切酶分析和Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的核酸探针检测，共获得插入外源片段大小在０．６～４．８ｋｂ的阳性克隆７５个，初步构建了Ｆ＿（４８）Ｅ＿８株的ｃＤＮＡ文库     

有机红枣生产管理规程

2004年临县有机红枣生产基地通过了国家有机产品各项指标检验，获得中国认证中心全国红枣首家认证。有机红枣是指来自于有机红枣生产体系，根据国家有机产品生产要求和相应的标准，并通过国家有机食品认证机构认证的红枣产品。有机红枣是一种环保型安全食品。要求生产程序符合有机生产规范、环境（空气、土壤、水质等）无污染。生产过程中绝对禁止使用农药、化肥、激素等人工合成物质。     

沙门氏菌快速检测试剂盒的研制及其应用

在建立直接ＥＬＩＳＡ方法基础上，首次研制出检测沙门氏菌的单抗快速检测试剂盒。对现场分离菌株进行的双盲考核试验共做２８０个菌株，两种方法的总符合率为９４．６％。以２０％的脱脂乳为冻干保护剂，经冻干后，其效价和物理性状最佳，试剂盒批内和批间重复试验的变异系数小于１０％，试剂盒的稳定性较好。采用本试剂盒检测了３０５９份人的粪样，检测出１６６份阳性样品，比市站多检出７２份阳性样品。在对６１９份肉样、６８８份鱼粉、６００份奶样、６２０份蛋样检测中，比常规国标方法多检出１００株沙门氏菌。因此，以直接ＥＬＩＳＡ为基础构建的快速检测试剂盒在沙门氏菌检验中，具有重要实用价值。     

不同H5亚型禽流感灭活苗对鸡H5N1株的免疫效力试验

采用H5N2和H5N1两种类型的禽流感（AI）油乳灭活疫苗免疫鸡群对高致病性AI流行株H5N1AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明：在同等免疫剂量条件下，H5N2和H5N3油乳灭活苗对鸡群具有相似或同等的免疫效力，均能抵抗对高致病性AIH5N1流行株的攻击；AI母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。     

森林腐殖土防治落叶松幼苗立枯病

森林腐殖土含有大量的菌根菌,用于苗圃有利于苗木生长发育和抑制幼苗立枯病病菌。1982～1984年在辽阳县国营苗圃的试验表明,每平方米苗床施用10千克腐殖土,落叶松幼苗菌根真菌感染率达100％与未施腐殖土及施药剂比较,立枯病发病率分别由原来的95.6％(生(?)和80.5％下降到10～16.5％,并且苗高、地径、根系等均有显著提高。因此,施用腐殖土是防治立枯病,改善生态环境和提高苗木生产率的有效办法。     

不同H_5亚型禽流感灭活苗对鸡H_5N_1株的免疫效力试验

采用H5N2和H5N1两种类型的禽流感(A I)油乳灭活疫苗免疫鸡群对高致病性A I流行株H5N1A IV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明:在同等免疫剂量条件下,H5N2和H5N1油乳灭活苗对鸡群具有相似或同等的免疫效力,均能抵抗对高致病性A IH5N1流行株的攻击;A I母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。