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目的 探索细菌表达dsRNA介导的RNAi在美国白蛾中的可行性,为RNAi技术在美国白蛾等林业害虫上的应用提供依据。 方法 选择几丁质酶HcChi基因作为靶标,设计有效的干扰片段,构建到L4440干扰载体上,并转入HT115大肠杆菌菌株。IPTG诱导HT115表达HcChi的干扰片段,用菌液持续饲喂美国白蛾幼虫,观察幼虫生长情况,定量PCR检测HcChi的转录水平。 结果 构建了带有HcChi-L4440表达载体的HT115菌株,经IPTG诱导能够合成HcChi-dsRNA,浓缩菌液持续饲喂幼虫显著抑制HcChi的表达,相对表达量显著下降了76.7%~90.3%,幼虫生长发育迟缓,体重增长量与对照相比显著减小40.7%。 结论 成功构建HcChi RNA干扰载体,通过饲喂法在美国白蛾中获得RNAi效应。该体系首次在美国白蛾中建立,为该物种的基因功能研究和生物防治提供新思路。 相似文献
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复县的苹果树栽培历史较久,株数多、面积广。在多年的生产实践中果农积累了许多修剪经验,对恢复树势,提高产量,起到了重要作用。但是,目前还有许多盛果期树,常出现大小年结果现象。除了肥、水、土等管理条件没 相似文献
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【目的】克隆美国白蛾系统性RNA干扰缺失基因序列,对该基因进行序列特征分析和时空表达模式检测,并研究其在美国白蛾幼虫系统性RNA干扰中的功能。【方法】通过RT-PCR和RACE技术从美国白蛾幼虫中进行基因克隆,并进行生物信息学分析;利用qPCR技术检测该基因在美国白蛾不同发育阶段和幼虫不同组织中的相对表达量;利用RNAi和qPCR技术验证外源dsRNA对该基因的干扰效率,以及干扰该基因表达后对其他靶标基因干扰效率的影响。【结果】从美国白蛾幼虫中克隆得到一个美国白蛾系统性RNA干扰缺失基因并命名为HcSID-1(Gen Bank登陆号:MG696730)。该基因全长2 761 bp,开放阅读框(ORF) 2 613 bp,编码870个氨基酸,预测蛋白分子量为97. 08 kD,理论等电点(pI) 6. 81,有1个19 aa的信号肽。氨基酸序列分析表明,Hc SID-1蛋白有1个长N末端(308 aa),序列中后段309—855位氨基酸之间具有典型的11个跨膜结构域;系统进化分析表明HcSID-1与鳞翅目昆虫同源性较高,和家蚕的Bm SID-3亲缘关系最近;时空表达分析表明,HcSID-1在美国白蛾各发育阶段和幼虫各组织中均有表达,在幼虫中肠组织表达量最高。注射HcSID-1 dsRNA可显著降低该基因在转录水平的相对表达量,且该基因的下调能降低HcChi dsRNA在美国白蛾幼虫中的RNA干扰效率。【结论】获得具有典型家族特征的美国白蛾SID-1基因序列,该基因的下调能够影响其他靶标基因dsRNA的RNAi效率,表明该基因可能具有与其他SID基因在系统性RNAi过程中相同的功能。 相似文献
47.
红玉苹果长果枝腋花芽复剪试验 总被引:1,自引:0,他引:1
红玉苹果到了结果期以后,一年生长果枝常形成腋花芽,每枝腋花芽数少者二、三个,多者十个以上,群众叫做一串花。这些腋花芽在冬季修剪时很难辨认,直到萌芽现蕾期才能确认。生产上在冬季修剪时,对不易识别腋花芽的长果枝,多不短截,直到萌芽现蕾期,再进行复查修剪。 近年来在得利寺公社就试验推广过复剪红玉长果枝腋花芽这一技术措施,但群众有许多顾虑,怕剪丢了产量,为了明确复剪果枝腋花芽的效果,消除顾虑,1964年春,在推行红玉腋花芽复剪的同时,由领导、技术员与群众三结合的进行了这个试验。 试材与方法 红玉腋花芽复剪试验取材于得利寺三八队的山地果园与河东队的平地果园。山地土层较浅,为石砾土。平地土层厚,为沿河冲积油砂土。树龄均在三十年生上下,树势中庸,选下层主枝上的中、外部果枝,枝长30厘米左右。于1964年春初花期进行复剪(剪口距 相似文献
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甘肃蚕豆赤斑病及轮斑病的为害分析及经济阈值研究 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来,春蚕豆赤斑病(Botrytis fabae Sardina,B.cinerea Pers)和轮斑病(Cercospora zonata Winter)已成为影响甘肃蚕豆生产的主要病害,且两病均形成叶斑、叶枯以致落叶等症状,每年损失产量约28%~40%,重病年则达50%以上。为了探讨两病对蚕豆的为害损失,拟定科学合理的防治指标,笔者于1993~1994年进行了研究,结果报道如下。 1 研究方法供试品种为临夏尕红蚕豆(Vicia faba var.),小区面积分别为10.5m~2和7.0m~2,重复4~5次,均按随机区组排列。于当年发病初期开始,各处理间隔7~8d施药,均用20%粉 相似文献
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1976年6月,在临汾果树场一株18年生的柳玉苹果树上,发现一个比柳玉果实着色好、成熟早的芽变枝条。1977年观察,这个枝上的苹果于5月30日就开始着色,6月10日着色就相当好了,6月13日成熟采收。1978年低接了柳玉芽变幼树12株,1980年定植,81年有一株小树中干顶部连串形成了3个腋花芽,82年春开花后座果6个,南边的4个果6月7日着色,14日着色达70%,靠北边的2个果6月9日着色,21日着色达70%,23日着色近100%。对柳玉芽变母枝及其低接幼树多年观察,均表现出色红、早熟这两个突出性状。1985年7月1日,通过有关专家鉴定,确认为柳玉 相似文献
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在分析大兴安岭东部森林生态环境现状的基础上 ,根据林业分类经营的原则、天然林保护工程的需要 ,系统地阐述了森林生态环境建设的途径与方法 ,并提出了相应的对策和措施。 相似文献