牛GUCY1A3和SFXN1基因的克隆及生物信息学分析

试验以人GUCY1A3和SFXN1基因序列为探针,BLAST获得同源性较高的牛的表达序列标签（ESTs）序列及部分mRNA序列。通过RT-PCR方法从牛肌肉及脑组织克隆cDNA序列与牛表达序列标签进行拼接,获得牛GUCY1A3和SFXN1基因,并对其进行了生物学特性分析。序列分析表明,牛GUCY1A3基因编码区长2 076 bp,编码691个氨基酸;牛SFXN1基因编码区长969 bp,编码322个氨基酸。氨基酸序列分析表明,GUCY1A3蛋白磷酸化位点分布于丝氨酸（Ser）、酪氨酸（Tyr）和苏氨酸（Thr）残基上,主要分布在细胞质中,不属于分泌蛋白,二级结构预测以α螺旋为主,保守结构域含1个CYCc功能结构域;SFXN1蛋白磷酸化位点分布于丝氨酸（Ser）、酪氨酸（Tyr）和苏氨酸（Thr）残基上,主要分布在内质网和浆膜上,属于跨膜蛋白,二级结构以α螺旋为主,保守结构域含1段低复杂度序列和3段跨膜螺旋区。试验结果为进一步研究牛GUCY1A3和SFXN1基因的表达调控机制与功能奠定了基础。     

舞钢市棉田杂草种类调查

近年来 ,随着农村种植结构的调整、耕作制度的改革 ,大面积使用化学除草剂 ,农田杂草优势种群和群落结构相应发生了变化。为掌握舞钢市棉田杂草种群结构和发生危害情况 ,为今后草害治理提供依据 ,合理使用除草剂 ,及时控制其危害 ,分别于２０００年 ,２００１年７～８月对所辖八台、安寨、枣林、武功、庙街、杨庄、铁山、尚店、王店１０个乡镇棉田进行了调查。调查采取随机抽取地块的方法 ,共调查了１００块（每块面积不少于６．７ｈｍ２）棉田 ,调查时间为棉花花铃期。１调查方法１．１调查器具计数器、标本夹及样方框（０．２５ｍ２） ,即…     

SO_2熏气实验装置改进研究

根据作物现场熏气设计,制作开顶式熏气装置并做3项改进。利用复合式气体检测仪监测熏气室内SO2浓度,汇总分析监测数据,统计检验SO2浓度差异性。结果表明,熏气装置可稳定获取设定的浓度梯度,且熏气室内各点浓度无显著差异。此装置可用来研究受控条件下SO2对农作物的伤害影响。     

实时荧光定量PCR法检测转基因牛拷贝数

为了检测bfat-1转基因牛的外源基因拷贝数,试验采用绝对定量PCR法鉴定外源基因的拷贝数。结果表明:绝对定量PCR可以准确、有效地检测转基因牛外源基因的拷贝数,标准曲线为lnN=-3.16Ct+40.76(R2=0.994 2),2头转基因牛的外源基因拷贝数分别为4.62±1.03,5.46±1.26。     

3个时期牛肌肉组织中长链非编码RNA表达谱的生物信息学分析

试验旨在分析不同时期牛肌肉组织中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNAs)的表达谱,并筛选出可能参与肌肉发育过程的相关的lncRNAs。采集3月龄胚胎、6月龄胚胎和9月龄出生个体的肌肉组织RNA样品进行高通量测序,通过生物信息学方法对鉴定到的lncRNAs进行分析筛选,对lncRNAs靶基因和3个时期差异mRNAs进行Veen分析,并对Veen结果进行GO和KEGG富集分析,筛选与肌肉发育相关的lncRNAs及靶标mRNA。结果显示,高通量测序共鉴定到212 851条新的未注释的lncRNAs,其中在不同时期差异表达的有9 913条,分属于基因间型、正义链型、反义链型和双向型4种类型,在各染色体上均有分布,其中正义链型lncRNAs在各个染色体上分布数量最多,分布范围最广。分析其结构发现这些lncRNAs具有开放阅读框短、表达水平低、编码能力弱、分布广、数量大等特征。通过GO和KEGG富集分析,最终筛选出3月龄胚胎、6月龄胚胎和9月龄出生个体肌肉中差异表达并与肌生成有密切关系的55条lncRNAs和38条候选靶标mRNA。本研究不仅提供了3个时期牛肌肉组织中lncRNAs的表达模式,而且通过预测lncRNAs与mRNA的相互作用关系极大地缩小了与牛肌肉发育相关的lncRNAs的研究范围,为揭示牛肌肉发育的功能提供了重要的靶点。     

舞钢市设施蔬菜病虫害发生现状与无害化治理对策

一、设施蔬菜病虫害发生现状 (一)病害问题 1、生理性病害严重.冷害、低温障碍、生理性沤根、由低温造成根系发育差,对某些元素吸收能力差,使作物表现出各种各样的缺素症、日灼伤、肥害、药害发生普遍,有些地块发生严重,成为设施农业生产的突出问题. 2、病毒病加重.如番茄、辣椒、西瓜等病毒,发生为害最重,主要有TUHV、THV和CMV等.从目前来看,国内还没有防治病毒的特效药剂,生产上常用一些激素、细胞分裂素和叶肥等的混合制剂防治,对病毒病的发生有一定的缓解作用,但对病毒没有直接的杀灭效果.     

舞钢市棉田杂草调查及防治技术

近几年来在种植业结构调整中,棉花已成为舞钢市农村经济的支柱产业。全市常年植棉面积1000hm2,单产皮棉1305kg·hm-2,棉田平均产值3万元·hm-2左右。棉花种植模式主要有麦棉套种和瓜棉套种,种植方法大多实行营养钵育苗移栽或地膜覆盖,不同的种植方式都能为杂草的生长创造条件,形成小气候,有利于杂草的生长,如管理不及时,中后期会形成草荒。2001—2005年通过对全市棉田杂草进行调查,杂草种类有10科20种。禾本科杂草占17.8%,阔叶杂草占76.4%,其它杂草占5.8%;一年生杂草占82.3%,多年生杂草占17.7%,以马唐、狗尾草、牛筋草、藜、苋、香附子、蟋…     

麦田恶性杂草日本看麦娘的发生及防治

日本看麦娘 (AlopecurusjaponicusSteud)属禾本科一年生杂草 ,自 2 0世纪 90年代初期危害逐年加重 ,现已成为舞钢市麦田主要杂草之一 ,一般可影响小麦产量 10 %～ 2 0 %。 1999～ 2 0 0 2年 ,笔者对日本看麦娘在本地的发生及防治技术进行了研究。1　形态特征幼苗 :第 1片真叶带状 ,长 7～ 11cm ,宽 1mm ,先端急尖 ,叶缘两侧有微细倒向刺状毛。 3条直出平行叶脉。叶舌膜质三角形 ,顶端齿裂。心叶螺旋状内卷。成株 :与看麦娘 (AlopecurusatqualisSobol)极为相似。主要区别 :秆较高 ,30～ 90cm。圆锥花序较粗大 ,长 4～ 10cm ,宽 4～ 9cm。花…     

Tris-葡萄糖稀释液中添加重酒石酸去甲肾上腺素、丙酸睾酮对低温保存犬精子活率的影响

人工授精技术可以发挥良种公犬的利用效率,但人工采集的鲜精需先用优良的稀释液稀释后再进行授精才能达到较高的人工授精受胎率.1965年,Harrop和Bendlorf等首次利用牛奶和卵黄-柠檬酸钠缓冲液稀释犬精液,5 ℃可存活数天;1988年,Battista等比较了Tris、Test、Lactose及PIPES稀释液,结果发现无论是活率还是存活率、存活时间Tris稀释液的效果最好.     

牛Dgat1基因高GC含量片段的定点突变

将扩增出的1.8 kb目的片段克隆入pUCm-T载体,以构建好的质粒为模板进行突变反应。DpnⅠ酶切反应产物,去除甲基化及半甲基化DNA模板。酶切产物经纯化后转入DH5α感受态细胞,提取质粒测序。结果表明,双核苷酸碱基AA突变为GC,成功得到突变载体。将定点突变试剂盒方法加以改进,完成GC含量高达69.5%模板定点突变,改进后的方法操作简单、经济实用,有效地解决了高GC含量模板难突变难题。