不同培养体系对牛卵母细胞体外受精的影响

[目的]探讨适合于牛卵母细胞体外受精以及受精卵体外培养的最佳培养体系。[方法]通过对成熟的牛卵母细胞分别采用传统培养体系（对照组）和过渡培养体系（试验组）进行体外受精和受精卵体外培养,研究了不同组合的培养体系对受精率和卵裂率的影响。[结果]以受精液为TALP液,受精卵培养液为60%TALP液＋40%M-199液＋5%FCS的过渡培养体系能够提高牛体外成熟卵母细胞的受精率和卵裂率,分别为77.8%和55.6%。[结论]受精液为TALP液,受精卵培养液为60%TALP液＋40%M-199液＋5%FCS的过渡培养体系为牛卵母细胞体外受精以及受精卵体外培养的最佳培养体系。     

短季棉麦后晚播促早发技术

舞钢市棉花生产主要以春棉为主。近几年随着种植结构的调整,粮棉争地矛盾日益突出,在大力发展间作套种的基础上,发展夏棉生产,麦后种植短季棉,既能充分利用耕地和光热资源,实现粮棉双高产,又是一条保粮增收的有效途径。2008年舞钢市种植夏棉220hm2,其中有80hm2是麦后直播,140hm2是油菜茬直播。通过采取增加密度、早间定苗、增施提苗肥、加强化控、及早剪除空枝和无效花蕾等有效的促早发措施,虽然晚种,仍取得了单产皮棉708kg·hm^-2的收成。     

小鼠原始卵泡发育关键时期卵巢中miRNAs的生物学特征及功能分析

为了探究15.5胚龄和17.5胚龄小鼠卵巢中原始卵泡发育相关的miRNAs并解析其生物学功能,试验随机选用8～10周龄40只雌性和8只雄性健康小鼠进行饲养并合笼处理,提取小鼠原始卵泡发育关键时期15.5胚龄和17.5胚龄卵巢组织总RNA,PCR扩增筛选目的片段,高通量测序获得miRNAs,对其进行聚类、相关性、主成分和碱基偏好性分析,按照表达量倍数差异和表达差异显著性筛选差异表达miRNAs,对差异miRNAs进行靶基因预测,最后对获得的靶基因进行GO功能注释和KEGG富集分析。结果表明：经测序筛选共获得25个差异表达的miRNAs,其中上调的miRNAs有11个,下调的miRNAs有14个,差异倍数大于2且上调的miRNAs总共有5个,分别为mmu-miR-3471、mmu-miR-3472、mmu-miR-5132-3p、mmu-miR-3962及mmu-miR-7118-3p; 15.5胚龄和17.5胚龄的卵巢样品分别被聚集在两个区域,具有很好的一致性;miRNAs的长度不同,首位碱基的偏好性也不同;miRNAs在不同染色体上的碱基偏好程度也不一样;对筛选到的25个差异miRNA...     

鲜食蚕豆无公害栽培技术

鲜食蚕豆粒大,口感好,营养丰富,可鲜售,也可速冻加工远销国外市场,是一种效益较高的经济作物,其种植面积逐年增加.鲜食蚕豆生长旺盛,茎秆粗壮,分枝力强;株高85-105厘米;茎、叶色偏淡,叶大而厚;鲜豆种皮呈淡青白色,干豆种皮为青白色,通过日晒与贮藏后渐成褐色;每荚2粒左右,种荚百粒干质量200多克,鲜荚单粒质量5克左右;亩产鲜豆800公斤左右、干豆130公斤左右.     

鲜食蚕豆无公害栽培技术

鲜食蚕豆粒大,口感好,营养丰富,可鲜售,也可速冻加工远销国外市场,是一种效益较高的经济作物,其种植面积逐年增加。鲜食蚕豆生长旺盛,茎秆粗壮,分枝力强;     

小鼠骨骼肌卫星细胞的分离培养和鉴定

采用胶原酶和胰酶联用的酶消化法分离小鼠骨骼肌卫星细胞,应用差速贴壁法进行纯化,并利用RT-PCR和免疫荧光染色方法对分化前后细胞的标志基因进行鉴定。结果显示:分离出的肌卫星细胞生长状态良好,RT-PCR和免疫荧光染色显示肌卫星细胞Pax7和MyoD呈阳性表达,诱导分化形成肌管后,分化标志基因MyoG和MHC呈阳性表达。本研究成功从小鼠肌肉组织中分离出了肌卫星细胞,并具有很好的体外分化能力,可以为肌肉的发育分化和损伤修复研究提供良好的细胞模型。     

分娩驴羊水的沉渣和生化检查

采集了8头分娩驴的羊水,对其沉渣和上清液分别进行了染色镜检和生化指标测定。结果表明:①分娩驴羊水中含有2种上皮样细胞,一种占绝大多数,明显较大,不规则,核小或无核;另一种罕见,明显较小,也不规则,有核。②分娩驴羊水比重和pH值平均分别为1.005±0.006(1.000~1.015)和8.0±0.0(8.0~8.0)。③与新生驴血清相比,分娩驴羊水中的肌酐和尿素氮显著增加,分别高达410.28μmol/L±54.83μmol/L(350.30~475.20μmol/L)和52.96 mg/dL±11.80 mg/dL(38.72~72.48 mg/dL)。④分娩驴羊水不含胆红素,但含有较新生驴血清显著降低的白蛋白、胆固醇、葡萄糖、钙、无机磷以及谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、淀粉酶和肌酸激酶,其含量分别为1.81 g/L±0.97 g/L(0.03~2.75 g/L)、0.13 mmol/L±0.17 mmol/L(0.01~0.47 mmol/L)、0.56 mmol/L±0.12 mmol/L(0.44~0.72 mmol/L)、1.98 mmol/L±0.37 mmol/L(1.44~2.43 mmol/L)、0.93 mmol/L±0.32 mmol/L(0.46~1.44 mmol/L)、0.98 U/L±0.99 U/L(0.00~2.66 U/L)、61.92 U/L±17.40 U/L(42.32~81.80 U/L)、0.69 U/L±0.58 U/L(0.00~1.29 U/L)和3.66 U/L±1.27 U/L(2.33~5.88 U/L)。说明分娩驴羊水是一种含有较低营养物和酶类、较高代谢产物以及一定数量细胞成分的偏碱性液体。     

不同稀释液配方对驴精液常温保存效果的影响

为了筛选适用于驴精液常温保存的稀释液配方,试验向驴精液中添加不同剂量柠檬酸、葡萄糖或卵黄的稀释液,进行常温保存,观察各组的精子活率以分析保存效果。结果表明:柠檬酸、葡萄糖、卵黄添加量分别为17.0 g/L、15.0 g/L和15%时对驴精液常温保存的效果较好。柠檬酸添加量为17.0 g/L时保存6 h的精子活率可达0.332±0.079;葡萄糖添加量为15.0 g/L时保存6 h的精子活率可达0.353±0.032;卵黄的添加量为15%时常温保存驴精液精子活率大于0.300的时间可达60 h。     

干扰lnc4351对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响

为探究长链非编码RNA(lncRNA)对牛骨骼肌卫星细胞增殖及分化的影响,本研究以牛骨骼肌卫星细胞及已建立的体外成肌诱导分化模型为基础,以前期高通量测序获得的牛骨骼肌卫星细胞分化前后表达差异倍数较大的一个预测lncRNA为靶标,对其进行生物信息学分析及亚细胞定位,命名为lnc4351。设计合成lnc4351的siRNA,转染牛骨骼肌卫星细胞,采用EdU染色的方法检测干扰lnc4351对细胞增殖的影响;对转染siRNA的牛骨骼肌卫星细胞进行体外成肌诱导分化,观察肌管的形成状态,同时采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测分化标志因子MyoG和MHC基因的mRNA及蛋白水平的表达变化,研究干扰lnc4351对细胞分化的影响。结果显示,lnc4351位于牛的14号染色体,不具有蛋白编码潜能,是一个未报道过的lncRNA,在牛骨骼肌卫星细胞的细胞质和细胞核内均有分布,主要存在于细胞核;干扰lnc4351表达后,EdU阳性细胞比率显著下降(P0.05),说明下调lnc4351表达显著抑制了牛骨骼肌卫星细胞的增殖;下调lnc4351表达后肌卫星细胞经诱导分化产生的肌管量呈现增多趋势,分化标志因子MyoG和MHC的蛋白水平显著或极显著上调(P0.05;P0.01),说明干扰lnc4351能够促进牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化过程。本研究结果表明,干扰lnc4351表达可以抑制牛骨骼肌卫星细胞的增殖并促进其成肌分化过程,为进一步开展lncRNA对牛骨骼肌发育的调控机制及肌肉发育相关研究提供参考。     

棉田高产高效立体种植技术

为增加棉田综合效益,提高棉农收入,推动全市棉花生产持续稳定地发展,2001—2004年在全市实施了棉田高产高效立体种植综合技术开发。经过4年来的试验研究,改进了3种种植模式,形成了具有地方特色的棉田高产高效种植技术体系,大大提高了棉农的植棉综合效益,有效地缓解了粮棉争地及棉花降价减收的矛盾,丰富与发展了棉田立体种植理论,取得了十分可观的经济效益和社会效益。4年来累计推广面积3000 hm2,棉田平均每公顷综合产值41316元,投入产出比为1∶6.79,比麦棉套种平均增长139.87%。1棉田立体种植模式及效益1.1西瓜、棉花立体种植1.1.1模式配置…