一种快速提取猕猴桃RNA的新方法

本研究通过参考CTAB法、异硫氰酸胍法、Trizol法、SDS法以及"快速从含有高含量淀粉的种子胚乳中分离高质量RNA"方法,以‘Hort-16A’的幼叶、花和幼果进行总RNA提取,并对上述方法的结果进行比较。在综合上述方法进行改进后,筛选出了快速、稳定、操作简单、成本低,适合猕猴桃总RNA提取方法。与所参考的几种方法比较,该新方法提取RNA完整清晰。将提取RNA反转录c DNA为模板,以AP2基因和AG基因设计两对特异引物进行RT-PCR扩增,获得条带明亮单一,完整,经测序为所需目的条带。该新方法提取的RNA可为下一步进行基因克隆和功能验证实验提供数据资料。     

小麦蛋白磷酸酶2A调节亚基基因TaBβ-1的克隆及其在非生物胁迫下的表达特性

【目的】克隆小麦蛋白磷酸酶2A(PP2A)调节亚基(PR55)基因TaBβ-1,分析其在非生物胁迫下的表达特性,为小麦抗逆育种提供候选基因。【方法】以小麦品种旱选10号为材料,通过电子克隆和RT-PCR获得TaBβ-1的全长cDNA序列,采用生物信息学软件分析TaBβ-1及其编码蛋白TaBβ-1的序列特征,预测其功能,利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)技术分析该基因在小麦孕穗期不同组织中、不同生育时期新叶中的表达情况,以及在PEG、NaCl、低温及外源激素ABA等非生物胁迫下的表达模式,检测不同水分条件下成株期转基因拟南芥的叶片细胞膜稳定性。【结果】获得TaBβ-1的全长cDNA序列1931bp,其开放阅读框(ORF)为1539bp。该基因编码512个氨基酸,预测TaBβ-1蛋白分子量为57.1kD,等电点为5.87,含有PP2A调节亚基的1个CDC55保守结构域、1个alpha/beta结构域、2个PR55保守结构域和6个WD重复子。TaBβ-1在小麦孕穗期的根、穗、叶中均有表达,表达量依次为根穗叶;在不同生育时期的新叶中,苗期叶片的表达量最高。TaBβ-1的表达明显受PEG、NaCl、低温以及外源ABA的诱导。【结论】小麦蛋白磷酸酶2A调节亚基家族基因TaBβ-1在小麦苗期叶片中的表达量明显高于根、穗以及其它时期的叶片;TaBβ-1参与对高渗、高盐、低温等多种胁迫以及ABA处理的应答反应,但表达模式不同;在水分胁迫条件下,转基因拟南芥比野生型具有较高的细胞膜稳定性。     

转vip3基因作物研究进展

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Proteins,ICPs)转基因作物在全球种植已近15年。随着转基因作物种植面积的扩大,害虫对Bt杀虫蛋白产生抗性已成为一个严峻的问题。通过研究发现,苏云金芽孢杆菌的营养生长阶段可产生一种新的毒素,即VIP3蛋白。VIP3蛋白与已知的ICPs没有序列同源性和结构相似性,表达VIP3对十多种鳞翅目害虫具有毒杀作用,具有更广泛的抗虫谱,尤其可毒杀小地老虎(Agrois ipsilon)等对Bt非敏感害虫,对环境生物没有不良影响,是防治抗性害虫及扩大抗虫谱的一种新策略。     

进展性缺血性脑卒中危险因素分析

目的探讨与进展性缺血性脑卒中相关的危险因素.方法查阅近10余年来国内外关于进展性缺血性脑卒中的相关文献,分析与进展性缺血性脑卒中相关因素,为临床防治进展性缺血性脑卒中提供理论依据.结果研究表明：缺血区的脑血流量下降、血压变化、高血糖、发热与感染、脂蛋白与含铁蛋白含量、颈动脉粥样硬化及斑块形成、血浆总同型半胱氨酸水平、血清可溶性细胞间黏附分子1、白细胞流变特性及分子流变特性、血浆内皮素和一氧化氮含量的变化及谷氨酸（Glu）浓度等均与进展性缺血性脑卒中有关.结论与脑卒中进展相关的诸因素可增加致残率,预后差,治疗困难,对这些因素的关注有助于防治进展性缺血性脑卒中.     

采后钙及热处理对葡萄柚果实贮藏期细胞壁物质代谢的影响

以“里约红”葡萄柚果实为试材,用3％ CaCl2、50℃热水单独、复合浸泡处理5 min,在 室温(18±2)℃、相对湿度85％～90％的环境条件下贮藏,研究采后钙、热处理对葡萄柚果实的贮藏效果及细胞壁物质代谢的抑制作用.结果表明:采后钙、热处理有效控制了果实硬度下降、失重率上升,维持果实共价结合型果胶(SCSP)、24％半纤维素(24KSF)含量,降低了果实水溶性果胶(WSP)、果实离子型果胶(ESP)、4％果实半纤维素(4KSF)含量.其中,以3％CaCl2+50℃处理效果最佳,贮藏75 d果实硬度、乙醇不溶物、果实共价结合型果胶(SCSP)、24KSF分别比对照高出21.31％、6.44％、22.60％和50.46％.此外,钙处理效果优于50℃热处理.相关性分析结果表明,果实硬度与细胞壁各组分呈显著相关.通过主成分分析构建的综合评价模型可知,采后钙、热处理可提高贮藏期间葡萄柚果实质地综合品质,抑制细胞壁物质代谢降解,从而延长葡萄柚果实贮藏期.     

晋南地区棉种携带枯黄萎病菌检验和病圃抗性鉴定及防治

1材料和方法2004年初由运城市植保站提供的毛子有冀668、晋棉33、晋棉31、99B、永丰998、GK19、95-1、中棉所41、新高抗5号。脱绒包衣和光子的有抗九、抗五、晋棉31、GK19、晋棉33共14个品种。种子带菌检验方法:取样。要有代表性,种子量大的随机抽样,种子量少的,四分法抽样,按使用量取即可。装样品的器具,一定要清洁、干燥。最好预先用70%的酒精消毒,并随取随作,防止种子污染。检验的数量每个种子取500～600粒。检验方法:采用水、琼脂培养法,使用这种方法检验对这两种病原菌均适用。首先将棉子流水冲洗片刻,再置于万分之一的链霉素液中浸…     

晋麦47背景回交导入系的遗传选择与性状分析

为深入研究小麦抗旱相关性状的遗传基础,以旱地品种晋麦47为轮回亲本、水地品种鲁麦14为供体亲本构建的导入系(ILs)为材料,在雨养和灌溉两种条件下考察穗下节和穗部农艺性状,利用56对在双亲间表现多态性的SSR标记引物对BC3F4导入系群体的150个株系进行遗传选择,分析筛选后的148个导入系遗传背景及性状相关性.结果表明,ILs群体中有两个株系分别在2个、13个标记住点的基因型不同于双亲,ILs群体的晋麦47基因型回复率达94.38%.在两种水分条件下ILs群体多数性状表现超双亲.性状变异系数在2.34%～127.11%之间,性状均值偏向轮回亲本晋麦47;ILs群体灌溉条件下的每穗总小穗数(TNS)极显著大于雨养条件下的,与鲁麦14相似.除穗顶部不育小穗敷(SST)外,其余性状在两种水分条件下均呈极显著正相关(r=0.221～0.555).ILs群体穗下节长(FIL)和旗叶叶枕至德基部长(LPSB)的遗传力均较高,大于0.5975;穗顶部不育小穗数(SST)、穗基部不育小穗数(SSB)的遗传力均较低,小于0.4638,说明小穗结实卒易受环境水分条件影响.     

化学计量学辅助紫外分光光度法同时测定依诺沙星和环丙沙星

在pH6.5的HAC-NaAc缓冲溶液中,铝能分别与依诺沙星(ENX)和环丙沙星(CPLX)形成络合物,其λmax分别为267nm和276nm,两者紫外吸收光谱严重重叠;本文用偏最小二乘法辅助紫外分光光度法法不经分离,同时测定了模拟样中依诺沙星和环丙沙星,ENX和CPLX的平均回收率分别达98.5%和99.9%,相对标准偏差RSD分别为2.5%和3.5%.     

云南葡萄柚果汁的加工工艺研究

利用已引种于云南省西双版纳普文林场的9个美国葡萄柚品种为原料,对其进行葡萄柚果汁的加工工艺研究.结果表明：不同品种的葡萄柚果实的平均出汁率在50%左右,采用0.1%～0.25%的β-环糊精包埋葡萄柚果汁中的苦味成分,在25MPa压力下均质,并在85℃杀菌15min,可获得较理想的效果.     

樟叶越桔叶2个新6−O−咖啡酰葡萄糖苷的分离鉴定

为进一步挖掘樟叶越桔叶中的化学成分,采用硅胶、葡聚糖凝胶LH−20、Diaion HP20等多种柱层析方法,从其叶的80%甲醇提取物中分离得到2个新的6−O−咖啡酰葡萄糖苷,分别命名为樟叶越桔苷K（dunalianoside K,1）和樟叶越桔苷L（dunalianoside L,2）,它们的化学结构通过HRMS、¹H NMR、¹³C NMR、HSQC、HMBC和COSY等波谱分析得到确定。