温氏附红细胞体16S rRNA基因的序列测定和分析

从自然感染附红细胞体的湖北黄牛无菌采集血液,分离附红细胞体并提取病原基因组,用血营养菌的16SrRNA基因的通用引物进行PCR扩增,得到长约1.5kb的扩增片段,将其克隆到pMD18-T载体后进行测序和分析.结果表明该片段全长为1 471 bp（GenBank收录号为AY946266）,同源性分析表明该序列与Neimark公布的温氏附红细胞体（AF016546）的16S rRNA基因序列同源性达到98.7%,证实该病原为温氏附红细胞体,从分子生物学水平证实了温氏附红细胞体在湖北省的存在.将该序列与5种支原体、14种血营养菌及边缘无浆体等的相应序列进行比较,建立系统发育树,结果表明温氏附红细胞体同边缘无浆体的关系较远,而与肺炎支原体组的亲缘关系较近.     

湖北省羊血吸虫病流行病学调查

对湖北省血吸虫病疫区羊的血吸虫病进行了流行病学调查，结果表明：羊的血吸虫病血清学阳性率为16．88％，粪检阳性率为13．57％；羊的野粪占野粪总数的44．64％；羊的主要感染季节为4～6月；放牧羊的感染率高于舍饲羊。这一结果对制订血吸虫病的综合防治措施具有重要意义。     

水稻穗腐病病原分离、鉴定及生物学特性

 水稻穗腐病（rice spikelet rot disease,RSRD）是近年上升较快的一种水稻穗部重要病害,影响水稻产量和稻米品质。从稻穗发病谷粒中,共分离到4种真菌,经形态学、生物学及分子生物学鉴定,分别为层出镰刀菌（Fusarium proliferatum）、澳大利亚平脐蠕孢菌（Bipolaris australiensis）、新月弯孢菌（Curvularia lunata）和细交链孢菌（Alternaria tenuis）。4种病原菌均能在温度4℃~40℃、pH 3~12条件下生长,最适的温度范围是25℃~30℃,不同菌最佳产孢的pH值差异较大。4种菌均能在供试的碳、氮源培养基上生长,不同的碳、氮源对各菌的菌丝生长和产孢的影响不同。穗腐病是由多种病原菌引起的水稻后期穗部褐变病害,病原菌具有多样性、复杂性和致病性分化的现象。     

水稻稻曲病菌G蛋白β亚基基因的克隆、表达与序列分析

水稻稻曲病是由稻绿核真菌[Ustilaginoidea virens(Cooke)Tak]引起的一种常见的水稻后期穂部病害。G蛋白可能参与了稻曲病菌的致病过程。为了研究G蛋白在病菌致病过程中的作用,分离并分析了稻曲菌的G蛋白β亚基编码基因。根据丝状真菌G蛋白β亚基编码基因的同源保守序列设计简并引物,采用同源克隆和热不对称交错PCR的方法,分离得到了稻曲菌的G蛋白β亚基全编码基因序列。该序列的长度为2037bp,包含4个内含子,5个外显子和1个编码359个氨基酸的开放阅读框。根据克隆到的UvGβ1设计引物,通过RT-PCR克隆到包含整个开放阅读框的cDNA序列。该基因的DNA序列和cDNA序列在GenBank中注册的登记号分别为GU014921和GU065745。系统进化分析表明该片段与栗疫病菌(Cryphonectria parasitica)的G蛋白β亚基基因亲缘关系最近。将该基因的整个开放阅读框连接于pET-30a构建原核表达载体,通过诱导获得了重组蛋白。     

水稻纹枯病立枯丝核菌的分类及遗传多样性研究进展

水稻纹枯病是一种世界性病害,目前该病已成为限制水稻高产、稳产的主要障碍之一。本文简述了引起水稻纹枯病的病原菌立枯丝核菌的形态特征,概述了依据菌丝形态特征和融合群进行分类的概况,阐述了同工酶、RAPDI、SSR和AFLP等分子生物学技术在水稻纹枯病菌遗传多样性研究中的应用。     

安徽省水稻纹枯病菌致病力分化与遗传多样性

对分离自安徽省7个县(市)的32株水稻纹枯病立枯丝核菌在5个鉴别寄主上进行了致病力测定,分析了其遗传多样性。结果表明,水稻纹枯病菌各菌株间的致病力存在显著差异,安徽省水稻纹枯病菌中大多数为中等致病力。对这些菌株进行RAPD分析,结果显示,DNA多态率达98.2%,遗传相似性系数在0.62～0.84之间,表明水稻纹枯病菌遗传分化较大,群体结构多样性较丰富。在相似系数为0.653时,所有菌株可聚合为4类,聚合类型与菌株的地理来源相一致,菌株的致病力与RAPD聚类分析结果无相关性。     

6%吡喹酮注射剂的稳定性与刺激性试验研究

抗血吸虫药 6%吡喹酮非水溶液注射剂在室内避光自然温度条件下保存 12个月 ,颜色稳定性好 ,没有加深变黄的现象 ,但在不避光条件下 ,药液放置 6个月后明显氧化变黄。加速试验表明 ,2 5℃时 ,其注射剂的降解速率常数logK2 5℃ 为 - 5 972 8h-1,T1/2 为 5 5年。肌注刺激性试验表明 ,兔和牛肌注部位没有炎症和坏死病理变化 ,动物未表现出临床可见兴奋与抑制症状     

应用酶标SPA Dot-ELISA同时检测牛羊血吸虫病和肝片吸虫病

采用给雄性家兔注射黄牛、水牛、山羊ＩｇＧ混合液（１∶１∶１）制备的兔抗黄牛、水牛和山羊ＩｇＧ连接酶标ＳＰＡ，解决了酶标ＳＰＡ与牛羊血吸虫和肝片吸虫免疫复合物相结合的技术关键，并制成了可同时用于牛羊血吸虫病和肝片吸虫病诊断的酶试剂。建立了Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ同时检测牛羊血吸虫病和肝片吸虫病技术，能测出人工感染１～１５０条虫体７～４２ｄ病畜抗体，阳性检出率达１００％。