利用酵母双杂交技术筛选与wsv112互作的宿主蛋白

对虾白斑综合征病毒(WSSV)开放阅读框wsv112编码脱氧尿苷焦磷酸酶(dUTP pyrophosphatase, dUTPase)。为研究wsv112与宿主的互作关系,本研究采用酵母双杂交Gal4系统从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肠道cDNA文库中筛选与wsv112互作的候选蛋白。以WSSV为模板,构建pGBKT7-112诱饵载体,转化到Y2H Gold酵母菌感受态细胞中,转化菌液涂布到不同缺陷型培养基上,检测诱饵载体的自激性和毒性。将凡纳滨对虾肠道cDNA文库与诱饵菌株pGBKT7-112接合,通过筛选力度不同的缺陷型培养基、颜色反应、PCR、测序鉴定等步骤筛选阳性克隆,将阳性菌株提取质粒,再经过回复杂交实验验证筛选出的阳性质粒与诱饵载体的作用。研究表明,诱饵载体pGBKT7-112无自激性和毒性,可用于酵母双杂交实验;经初筛和回复杂交实验最终得到2个阳性质粒,经过NCBI数据库对比,其编码的蛋白分别与日本囊对虾(Penaeus japonicus) C型凝集素(AGW27416.1)和克氏原螯虾(Procambarus clarkii) 40S核糖体蛋白S20小亚基蛋白(ALE99171.1)具有37%和98%同源性。本研究为wsv112的调控机制提供新的线索。     

发酵条件对细菌工程菌产WSSV-VP37的影响

在pBAD/gIIIA-VP37重组表达载体构建的基础上,研究发酵工艺参数对重组WSSV-VP37(rVP37) 蛋白表达量的影响,并对重组质粒的稳定性和重组菌的生长进行研究.结果表明,pBAD/gIIIA-VP37表达的rVP37以包涵体形式存在于菌体中,发酵温度及诱导时间影响rVP37蛋白表达和菌体产量,以37 ℃诱导5h最佳.重组质粒在宿主菌中具有良好的分离稳定性,WSSV-VP37基因的插入对宿主菌的生长规律影响不大.     

野生与养殖甲鱼生化成分的比较研究

对野生与养殖甲鱼的生化成分进行了分析，结果表明，野生与养殖甲鱼除背甲与内脏重量组成略有差异外，其他各部分重量组成相近，野生甲裙边蛋白质含量高于养殖甲鱼，养殖甲鱼内脏脂肪含量高于野生甲鱼。养殖甲鱼裙边氨基酸总量高于肌肉，而必需氨基酸总量则相反。雄性甲鱼裙边与肌肉中氨基酸总量高于雌性甲鱼。     

2014年中国不同地区对虾白斑综合征病毒ORF14/15和ORF23/24缺失区序列比较

对虾养殖面临诸多病害威胁,对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus, WSSV)是养殖对虾主要病原之一,WSSV不同地理株的变异可能导致WSSV毒力的变化。为了解2014年中国大部分地区WSSV ORF14/15和ORF23/24的变异情况,本研究选择2014年1月–8月期间采集的48份WSSV阳性样本,用特异引物扩增ORF14/15和ORF23/24片段,连接于T载体,转化至Top10中,筛选阳性克隆,测序分析不同样本之间的缺失差异。结果显示,能够扩增ORF14/15和ORF23/24样品的比例分别为43.75%和33.33%。在ORF14/15扩增中,分别扩增出1260 bp、1270 bp、1892 bp和2662 bp片段,与TH-96-Ⅱ比对共有4种缺失情况,即缺失6540 bp、6530 bp、5908 bp和5138 bp。而在ORF23/24扩增中,分别扩增出1140 bp和1146 bp片段,与中国台湾株(TW)比对有两种缺失情况,即缺失12070 bp和12064 bp。研究结果表明,WSSV在中国大部分地区存在一定程度的变异,而不同毒株之间在ORF14/15可变区差异比较明显,在ORF23/24可变区差异不大,但均具有大片段缺失。     

鲈鱼幼鱼人工配合饲料中蛋白质,脂肪适宜含量的研究

探讨了人工配合料中蛋白质,脂肪对鲈鱼幼鱼生长的影响,对各试验组幼鱼肝组织中的脂肪含量进行了比较,经３５ｄ试验养殖,结果表明：鲈鱼幼鱼配合饲料中蛋白质和脂肪的含量分别为３９．８５％～４０．１２％和５．４％～１５．４％时较为适宜。     

鳀油的氧化特性及保藏方法的研究

研究了鳀油在不同保藏温度下的氧化特性和几种抗氧化剂的效果，以感观和理化指标评估了鳀油的质量变化，提出低温加抗氧喹是阻止鳀油氧化的有效方法     

凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei) F0-ATP合酶b链全长cDNA的克隆及组织分布

采用RACE方法克隆得到了凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的F0-ATP合酶b链基因的全长cDNA序列。生物信息学分析显示,该基因开放阅读框744 bp,编码248个氨基酸,分子量为28.2 kDa。Blast比对结果显示,克隆得到的cDNA序列所编码的氨基酸序列与海虱(Caligus clemensi) F0-ATP合酶β亚基的同源性为50%,与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster) F0-ATP合酶β亚基的同源性为60%。免疫组化实验及流式细胞分析表明,F0-ATP合酶b链广泛分布于对虾鳃组织中,并且在对虾血细胞表面有分布。     

用鳕鱼碎肉制美味鱼松试验

鳕鱼俗名明太鱼、大头腥鱼。近年我国进口大量的冻狭鳕鱼,经解冻后加工成鱼片,成品出口销量很大。但鳕鱼加工成片后,尚有大量碎肉、鱼排为下脚料,如何将其利用,变废为宝是值得探究的。本文主要介绍用鳕鱼下脚料研制美味鱼松的试验情况。