两种表达载体对西瓜食酸菌生物学特性的影响

【目的】分析两种常用基因功能表达载体对宿主西瓜食酸菌生物学特性的影响,为基因功能研究选择载体提供理论参考。【方法】以西瓜食酸菌野生型FC440菌株为宿主菌,分别转入表达载体pBBR1MCS-5和pHC60,从胞外纤维素酶活性、胞外蛋白酶活性、胞外多糖含量、游动性、致病性和过敏性反应、生长速率以及抗铜性等,对转化菌株进行生物学特性影响的分析。【结果】载体pBBR1MCS-5对菌株的生物学特性各方面未表现出显著影响,载体pHC60会显著抑制菌株的生长速率和游动性。【结论】表达载体本身会影响西瓜食酸菌的某些生物学特性,在基因功能研究中,应依据所研究基因的功能选择适宜的表达载体。     

晚熟玉米新品种丹玉8401的选育及高产栽培技术

丹玉8401是辽宁丹玉种业科技股份有限公司最新选育的晚熟玉米杂交种。该品种于2017年1月通过辽宁省农作物品种审定委员会审定,具有高产、稳产、抗倒、适应性强、米质优等特点。在辽宁省春播生育期130 d,需活动积温2 900℃左右,适宜在辽宁晚熟区域种植。     

优良玉米新品种丹玉615的选育、栽培技术与育种经验总结

丹玉615是丹东农业科学院于2013年冬在海南以自选系X22为母本、自选系H635为父本杂交选育而成的玉米单交种。于2017-2018年参加辽宁省中晚熟区试,2年平均产量714.2 kg/亩,比对照郑单958增产4.4%;2018年参加生产试验,平均产量688.4 kg/亩,比对照郑单958增产7.7%。该品种2019年通过辽宁省审定,具有高产、优质、适应性好、活秆成熟等特点。     

河北省特色农产品电子商务平台的研究

通过将各类特色农产品信息进行采集、整理、归类、分析、汇总的基础上,以系统工程原理和方法为指导,以计算机技术、数据库技术、网络技术及多媒体技术为研究工具,建立了以特色农产品电子商务为核心的信息化技术应用网络平台技术体系。     

农村科技信息资源实用分类体系研究

依据农业科学分类、国民经济统计分类、本体论理论与多年从事农业信息技术工作的经验相结合的原则,利用计算机技术和农业信息技术等方法,本着实用、科学和简明的原则,对农村科技信息资源体系进行了分类体系的研究。     

越冬前低温锻炼期间不同品种葡萄枝条中渗透性物质和保护酶活性的变化

通过越冬前的低温锻炼,全球红、巨峰、里扎马特3个鲜食葡萄品种枝条中脯氨酸、可溶性糖含量均明显增加,低温锻炼中期积累最快;超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性显著升高,SOD活性的提高主要在低温锻炼的前、中期,且上升平缓,POD活性的提高主要在前期,中后期不再提高;质膜相对透性在前中期变化不大,后期明显上升。从品种来看,经低温锻炼后,全球红枝条中脯氨酸、可溶性糖含量及SOD、POD活性均相对较高,巨峰次之,里扎马特较低。从时间进程来看,在低温锻炼诱导葡萄抗寒性过程中,POD活性提高在前,游离脯氨酸积累在后,之后是质膜相对透性的提高。     

乳房链球菌GAPC基因的克隆及原核表达

为了重组表达乳房链球菌表面脱氢酶GAPC基因,为免疫学研究提供目标蛋白,用PCR方法从石河子分离株的基因组DNA中扩增出GAPC基因,用T/A克隆法将其插入PBST载体,并构建原核表达载体pET-32a（＋）-GAPC。用BL21（DE3）/pET系统表达Trix-GAPC融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物。结果表明,PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中乳房链球菌（AF421900.1）GAPC的基因序列同源性为99%。SDS-PAGE显示,经IPTG诱导后BL21（DE3）/pET-32a（＋）-GAP总蛋白中出现一条分子质量为55ku的新蛋白带。Western blot分析显示,GAPC蛋白可与乳房链球菌多克隆抗血清发生特异性反应。该研究已成功表达了GAPC,为GAPC在细菌致病中作用的研究以及相关疫苗的制备奠定了基础。     

竹片炭化工艺及装备的设计开发与应用北大核心

竹片凉席传统生产工艺存在机械化程度低、劳动强度大、污染环境严重等问题。针对这一生产现状,对竹片炭化工艺与装备进行了设计开发,并应用于实际生产。竹片炭化工艺替代了传统的蒸煮工艺,实现了生产过程废水零排放和绿色生产的目的。     

牛源耐药性金黄色葡萄球菌的分离鉴定及黏附因子基因FnBP和clfA的表达分析

为探究致奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的生物学特性,对新疆垦区部分奶牛场乳房炎奶样进行病原学分析,并对病原菌进行耐药性、毒力因子的表达分析。从乳房炎奶样中分离得到S.aureus,采用血浆凝固酶试验、KB法、琼脂筛选法、生化鉴定法(VITEK32)、聚合酶链式反应等法进行鉴定。针对毒力基因clfA(凝集因子A)和FnBP(纤维结合素结合蛋白)进行特异性PCR扩增,用T/A克隆法将其插入pMD18-T载体,并构建原核表达载体pET-28a(+)-FnBP和pET-28a(+)-clfA。转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物。常规鉴定出葡萄球菌105株,其中金黄色葡萄球菌(S.aureus)62株,从62株S.aureus中检出耐药性金黄色葡萄球菌(MRSA)13株,检出率为20.10%,2株未确检。经测序证实与GenBank中FnBP基因(J04151)和clfA基因(AB245457)序列同源性分别为100%和95.69%。SDS-PAGE显示,clfA和FnBP蛋白相对分子质量分别为45ku和58ku。Western blot分析显示,clfA蛋白和FnBP蛋白均可与金黄色葡萄球菌多克隆抗血清发生特异性反应。病畜奶样中MRSA检出率较高,新疆垦区部分牛场呈蔓延趋势,成功表达了clfA、FnBP蛋白,具有一定的免疫保护效果。     

10%戊菌唑乳油的高效液相色谱分析

本文采用高效液相色谱法，以甲醇和水溶液为流动相，使用ZORBAX SB-C₁₈反相色谱柱和紫外可变波长检测器，在220nm波长下对10%戊菌唑乳油进行分离和定量分析。结果表明，该分析方法的线性相关系数为0.999 8,标准偏差为0.061,变异系数为0.60%,平均回收率分别为100.03%。该方法简便快捷，灵敏度、精密度和准确度高，适用于戊菌唑乳油的定量分析。