奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素cDNA的克隆及原核表达

促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用。本研究通过RT-PCR方法从奥利亚罗非鱼丘脑中扩增出长约400 bp的目的序列GnRH,并将其克隆到T载体中,经酶切鉴定、序列测定分析后表明其与尼罗罗非鱼和乌颊海鲷具有较高的同源性,处于同一个进化分支上;而与日本青、金鱼、拟鲤、壁虎等的同源性较低。将此cDNA片段定向克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-GnRH,转化到大肠杆菌TB1中,0.3M IPTG诱导4 h后成功表达出与预期大小相符的约56 kD的融合蛋白。表明大肠杆菌表达系统可以成功地体外表达奥利亚罗非鱼GnRH,为进一步制备抗体了解其免疫调节作用奠定基础。     

广东省猪伪狂犬病时间分布和空间分布的研究

为了研究猪伪狂犬病（PR）的流行病学,对1998-2004年间广东省PR血清流行的时间和空间分布进行了调查．结果表明：东莞、惠州、深圳、阳江、珠海的PR血清阳性率较高（〉20％）,清远和汕尾地区最少（〈10％）,最高地区是最低地区的3．82倍．有51．7％猪场血清阳性率分布在10％以下．PR血清流行在时间序列有每隔5个月出现1个峰值的可能（P〉0．05）．通过ARIMA模型预测,2005年1月广东省的PR血清阳性率为14．23％,与真实值15．06％符合得较好．时间-空间对应分析表明：2002、2003年为珠江三角洲PR流行的高峰期,粤北在2001年为高发年份;2002、2003年,PR的流行率均以粤东为最低．二维对应分析图概括了原始信息量的83．3％．     

福建白水栀鲜花香气的GC/MS分析

采用活体植株动态顶空套袋采集法和TCT-GC/MS联用分析技术,采集分析了白水栀鲜花的香气成分,共鉴定出21种化合物,香气成分主要为(Z)-3,7-二甲基-1,3,6-十八烷三烯(占67.02%)、苯甲酸甲酯(占14.20%)、3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇(占10.49%)。     

烟草补光育苗技术研究

[目的]完善烟草育苗技术,提高烟草成苗素质。[方法]以鄂烟1号烟苗为材料,选择不同人工光源进行补光处理,研究补光对烟草幼苗生长的影响。[结果]烟草叶片对可见光吸收利用的光谱范围较宽,对各波段光的吸收强度依次为蓝光〉绿光〉红光〉紫光;补光至14d时,普通荧光灯处理可显著提高烟苗叶绿素a的含量,普通荧光灯、生物效应灯、绿荧光灯处理可提高烟苗叶绿素b的含量;补光21d时,蓝荧光灯、红荧光灯处理可显著提高烟苗叶绿素a的含量,白炽灯、节能灯处理可显著提高烟苗叶绿素b及叶绿素a＋b的含量;各均可促进烟苗茎部干物质累积,以白炽灯、节能灯和生物效应灯的处理效果最好。[结论]白炽灯为烟草补光育苗的首选光源。     

不同诱食剂对阿勒泰大尾羊麦草采食量的影响

分别选择果绿、草味剂、甜蜜素、柠檬酸和苹果酸调质的果味剂作为试验诱味剂.试验结果表明在第1期试验中甜味剂处理组、绿色剂处理组和对照组20 d每只羊平均采食麦草量分别为, 653.96±35.60、587.21±26.57和600±21.31 g/d.甜味剂组分别比绿色剂处理组和对照组分别提高66.75和53.96 g,差异显著(P＜0.05).在第2期试验中草香剂处理组、果味剂处理组和对照组20 d每只羊平均麦草采食量为612.20±35.23、593.08±29.78和602.64±24.90 g/d,差异不显著(P＞0.05).在第3期试验中甜味剂和绿色剂组合诱食剂的麦草采食量为664.98±14.85 g/d,对照组的麦草采食量为631.66±14.29 g/d,差异显著(P＜0.05).说明以甜蜜素作为甜味剂诱食剂可以增加阿勒泰大尾羊的麦草采食量.     

TMR对延边黄牛肉中氨基酸和脂肪酸含量的影响

选取12头体重相近(274.8±11.18 kg),16月龄左右的延边黄牛(公牛),随机分成2组,每组6头,分别饲喂全价混合饲料(TMR)和粗精分离饲料(对照组).结果表明,饲养92 d后,牛肉中酪氨酸含量TMR组显著高于对照组(P<0.05),其它各种氨基酸含量2组间无显著差异(P>0.05);牛肉中棕榈酸、棕榈油酸的含量TMR组均显著高于对照组(P<0.05),其它各种脂肪酸含量2组间差异不显著(P>0.05).     

榨菜生长过程中硝酸盐分布规律初研

按照榨菜的正常播种时间和生长季节,连续3 a对榨菜移栽苗、返青苗、榨菜茎膨大初期、膨大期、成熟期及雨水节后期按GB/T 15401-94方法进行了硝酸盐含量的测定,从900多个检测数据中发现了硝酸盐蓄积量从移栽到成熟过程中的分布规律.     

应用半套式RT-PCR技术诊断番鸭呼肠孤病毒病

参考GenBank中番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,MDRV)S1基因序列设计并合成3条引物C1、HP11和HP12,组成半套式RT-PCR,扩增片段为300 bp.应用该半套式RT-PCR对MDRV、禽呼肠孤病毒(ARV)、番鸭细小病毒(MPV)、鹅细小病毒(GPV)、鸡胚成纤维细胞(CEF)和番鸭胚成纤维细胞(MDEF)培养物进行扩增.结果仅能从MDRV中扩增出300 bp特异片段,而不能从ARV、MPV、GPV、CEF和MDEF细胞培养物中扩增出特异片段;该方法检测灵敏度为1 fg核酸,重复性好.对人工感染和临床疑似病例用病毒分离和半套式RT-PCR进行检测,2种方法符合率为100%.因此,该半套式RT-PCR可以用于番鸭呼肠孤病毒病的临床快速检测.     

有机磷农药降解菌—阴沟肠杆菌的生物学特性

[研究目的]对有机磷农药降解菌阴沟肠杆菌的生物学特性进行研究,为研究其降解特性机理及应用提供理论依据.[方法]测定阴沟肠杆菌生长曲线、生理生化特征,筛选出最适生长培养基,测定不同温度、pH值、摇床振数、装液量下的生长状况,确定最适生长条件,测定对乐果、甲胺磷、敌敌畏、敌百虫的耐受力和利用情况.[结果]阴沟肠杆菌培养3h后进入对数生长期,可以利用分解大部分含碳化合物.在营养贫瘠的条件上生长,生长温度范围为10～43℃,生长pH值范围为6～12,对乐果、甲胺磷、敌敌畏、敌百虫的降解利用必须建立在一定的营养物质的基础上.[结论]该菌的繁殖速度快,在营养条件较贫瘠的条件下就可以生存,是一株生存能力很强的菌株,适合应用于土壤、水体环境中的有机磷农药的降解.     

三个牦牛群体激素敏感脂肪酶（HSL）基因外显子Ⅰ的多态性

 【目的】探究激素敏感脂肪酶（HSL）基因在牦牛内的遗传多态性,为进一步揭示牦牛群体间遗传分化、开展牦牛肉质性状的关联分析以及HSL基因在牦牛物种中的定位、表达调控等研究提供依据。【方法】采用PCR-RFLP方法对九龙牦牛、麦洼牦牛和巴州牦牛共92头牦牛的HSL基因部分外显子I进行SmaI酶切多态性分析;统计基因频率、基因型频率大小,进行卡方（χ2）适合性、独立性检验,并计算纯合度、杂合度、有效等位基因数和多态信息含量等遗传多态参数。【结果】3个牦牛群体在HSL基因外显子I具有SmaI酶切多态性,在该酶切位点存在AA、AB和BB 3种基因型。3个牦牛群体均检测到AA和AB基因型,而BB基因型只在巴州牦牛中检测到。九龙牦牛和麦洼牦牛的AA基因型频率最高,而巴州牦牛AB基因型频率最高;A等位基因频率在3个牦牛群体中均高于B等位基因频率,为优势等位基因。适合性检验表明3个牦牛群体在该酶切位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态;独立性检验表明九龙牦牛与麦洼牦牛、巴州牦牛之间表现为差异显著（0.01＜P＜0.05）和差异极显著（P＜0.01）,而麦洼牦牛与巴州牦牛之间表现为差异不显著（P＞0.05）。测序分析表明,HSL基因外显子I第70位（从PCR产物测序片段的5′端计数）发生了单碱基突变（G→A）,并导致了编码氨基酸由甘氨酸（G）变为精氨酸（R）。【结论】牦牛在HSL基因外显子I内具有SmaI酶切多态性,其多态性是因所分析序列内一单碱基突变（G→A）所致,该碱基转换导致了氨基酸由甘氨酸（G）变为精氨酸（R）;在该酶切位点,九龙牦牛、麦洼牦牛和巴州牦牛均处于Hardy-Weinberg平衡状态。九龙牦牛与麦洼牦牛、巴州牦牛之间表现为差异显著（0.01＜P＜0.05）和差异极显著（P＜0.01）,而麦洼牦牛与巴州牦牛之间表现为差异不显著（P＞0.05）。