基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对羊源多杀性巴氏杆菌的快速鉴定

本试验通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对临床分离的1株羊源多杀性巴氏杆菌进行了快速鉴定,取得了与VITEK2 Compact传统生化方法和16S rRNA测序方法一致的结果。MALDI-TOF MS对分离菌株的鉴定分数为2.371,达到了种水平的鉴定。从分离到纯菌落到获得有效的鉴定结果,MALDI-TOF MS仅需要约30 min,而VITEK2需要约4 h, 16S rRNA测序方法需要至少2 d。因此,MALDI-TOF MS可以实现对临床分离的多杀性巴氏杆菌菌株的快速、准确鉴定,对进一步改善动物巴氏杆菌病的临床诊治具有重要意义。     

牦牛源BVDV非结构蛋白NS5A的原核表达及抗原表位分析

【目的】利用原核表达系统体外表达牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)NS5A基因,获得非结构蛋白NS5A,对其进行核苷酸、氨基酸序列分析,以解析BVDV非结构蛋白NS5A的功能。【方法】参考BVDV-1型毒株V006的NS5A基因序列(GenBank登录号:KX170647)设计并合成1对特异性引物,以分离到的牦牛BVDV GSTZ毒株cDNA为模板,PCR扩增NS5A基因片段,并克隆至表达载体pET-28a (+)中,构建重组原核表达载体pET28a-NS5A。经酶切初步鉴定及测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,然后利用IPTG诱导表达。经10% SDS-PAGE电泳及Western blotting分析鉴定重组蛋白的表达,并根据NS5A基因的序列构建遗传发育进化树,利用DNAStar软件预测NS5A蛋白的亲水性、表面可塑性和抗原性等特性,并结合二级结构的预测对NS5A蛋白的B细胞抗原表位进行预测。【结果】PCR扩增NS5A目的基因片段为1 488 bp,双酶切和测序鉴定结果证明,重组质粒pET28a-NS5A构建成功。经10% SDS-PAGE电泳及Western blotting鉴定重组蛋白,表达出了大小为55 ku的目的蛋白,大小与预期结果相符。通过对不同BVDV毒株NS5A基因序列构建遗传发育进化树,显示GSTZ毒株NS5A在遗传进化特征上属于BVDV-1型。NS5A蛋白的亲水性主要位于12—21、32—69、75—113、120—135、143—147、152—163、165—180、215—230、265—274、296—340、348—378、389—447、455—463、469—495位氨基酸处,表面可塑性主要位于14—18、37—42、76—81、86—109、154—160、169—178、218—228、297—309、348—358、365—373、414—442、430—437、454—460位氨基酸处,柔性区域较多,主要位于14—21、37—43、67—82、86—93、97—110、152—158、169—179、218—231、240—255、296—310、313—328、344—359、364—373、413—422和472—483位氨基酸处。NS5A蛋白的B细胞抗原表位主要位于15—18、76—81、154—158、169—178、218—228、297—309、348—358、365—373和414—422位氨基酸处。【结论】成功表达并鉴定了牦牛源BVDV的非结构蛋白NS5A,系统发育进化树表明BVDV GSTZ株基因型属于BVDV-1型,NS5A蛋白具有良好的抗原性,为深入解析BVDV非结构蛋白NS5A的自身结构功能、免疫学特性以及进一步研究非结构蛋白对病毒复制的影响提供参考。     

基于MATLAB仿真的木材铣削模糊控制系统的研究

利用模糊控制理论设计木材铣削加工在线控制系统。并应用MATLAB软件对该模糊控制系统进行验证和仿真，获得了最佳的控制效果。     

生态草病害调查方法

3年来,在吉林省西部地区实施的生态草建设工程已经初见成效,该项工作对于恢复和增进地力、减少土壤流失、避免土地沙化、保护生态环境等方面具有十分重要的意     

众志成城服务客户优化环境美丽家园——记上海众志环境设备有限公司

上海众志环境设备有限公司成立于2005年,公司总部位于上海市松江区新桥镇新凯路,是一家专业研发、生产、销售、经营绿化环境设备及厂房、温室、禽舍环境的控制设备公司。经过了短短两年的发展,公司已初具规模,拥有各类专业技术人     

内蒙古大兴安岭林区森林公园建设中主体景观设计的思考

文章就森林公园设计中如何把握主体景观的特点,使森林公园设计独具特色进行探讨。旨在使林区森林公园各具千秋,步移景移,吸引更多的国内外游客。     

某大型造纸厂高效污水处理工程设计与运行

指出了随着当前造纸领域中水循环利用率不断提高,废水处理难度大、成本高及污泥处理困难,某大型造纸厂污水处理站仅采用预处理+EGSB+A/O的工艺方案处理该厂生产废水。经处理后出水CODcr、色度、BOD5、氨氮、总氮及总磷等指标均达到《制浆造纸工业水污染物排放标准》(GB3544-2008)表2规定的新建企业水污染物排放限值要求,同时达到表3水污染物特别排放限值的要求,水处理成本仅为127元/t,污泥处置方便,且有一定经济效益,对于我国造纸污水的处理具有较高的应用推广价值。     

青杨虎天牛预测预报技术的研究

1993-1995年，对青杨虎天牛主要测报指标进行了研究。通过虫期发生量预测式，预测不同虫态的发生量，所预测的幼虫和成虫发生盛期与实查结果基本吻合。     

宜昌市城区行道树应用现状及发展建议

行道树能够展现一个城市的地域特色、文化特征和时代精神,形成有别于其它城市的空间特性,是一座城市的"绿色廊道"。行道树拓展的空间环境具有独特的"社会福利性质",随着城市居民生活水平的提高,对城市绿化的要求和期许越来越高,城市绿化作为城市的"绿眼",成为评价城市综合素质的参考指标~([1])。通过对宜昌市城区行道树的现状分析,坚持问题导向,有针对性的提出了宜昌市城区行道树的发展建议。     

低产野生板栗林改造技术

板栗是我国传统的、经济价值很高的经济林树种之一,据今已有3000多年的栽培历史。板栗营养丰富,味道甘美,炒食、菜食风味极佳,素有“铁杆庄稼”、“木本粮食”之称。据分析,栗果中含蛋白质5.7％～10.7％,脂肪2％～7.4％,淀粉51％～60％,富含多种维