两种报告基因在达摩凤蝶细胞克隆株RIRI-PaDe-2-C6中的表达

[目的]前期研究中,项目组从达摩凤蝶细胞系RIRI-Pa De-2中分离培养出单细胞克隆株RIRI-Pa De-2-C6,通过感染野生型苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Ac MNPV)发现克隆株RIRI-Pa De-2-C6对病毒敏感性高于原细胞系RIRI-Pa De-2。本研究将对达摩凤蝶单细胞克隆株RIRI-Pa De-2-C6的生物学特性和外源蛋白表达特性进行研究,并与原细胞系RIRI-Pa De-2进行比较,评价其用于外源蛋白表达的可行性。[方法]使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建重组β-半乳糖苷酶杆状病毒(Ac MNPV-Gal)和重组分泌型碱性磷酸酶杆状病毒(Ac MNPV-SEAP),分别侵染RIRI-Pa De-2和RIRI-Pa De-2-C6。在感染后的24、48、72、96、120、144、168 h检测2种重组蛋白的表达量,并对2个细胞系的形态学、生长曲线、倍增时间及核型进行分析和比较。[结果]表明:RIRI-Pa De-2和RIRI-Pa De-2-C6均可表达β-半乳糖苷酶(β-Gal)和分泌型碱性磷酸酶(SEAP),单细胞克隆株RIRI-Pa De-2-C6对重组β-Gal的表达水平显著高于原细胞系RIRI-Pa De-2(P0.05),在接种Ac MNPV-Gal后96 h表达量达到最高。RIRI-Pa De-2-C6对重组SEAP的表达水平与RIRI-Pa De-2无显著差异(P0.05)。显微观察发现,RIRI-Pa De-2-C6的细胞类型全部为梭形,比原细胞系RIRI-Pa De-2的细胞组成更加单一。RIRI-Pa De-2-C6的群体倍增时间为94.94 h,比原细胞系RIRI-Pa De-2的倍增时间(67.42 h)长。核型分析显示,RIRI-Pa De-2-C6的染色体数量呈正态分布,数目为21 82条,与RIRIPa De-2的染色体数目分布范围(48 97条)存在显著差异(P0.05)。[结论]通过单细胞克隆方法获得的克隆株RIRI-Pa De-2-C6无论在外源蛋白表达以及基础生物学特性方面均有别于原细胞系RIRI-Pa De-2。     

草莓属间体细胞融合研究

以长白山区的东方草莓和安娜草莓叶片为试材,PEG结合高浓度Ca2+、高pH值的方法进行原生质体融合,将融合后的杂种细胞接种到适宜培养基中进行细胞增殖形成细胞团和细胞团再分化芽苗培养.对融合、融合前后及融合后细胞增殖形成的细胞团分化的再生芽苗进行染色体鉴定,结果表明,1.0％纤维素酶+0.5％果胶酶+0.6 mol/L甘露醇+0.1％ 2-(N-吗啡啉)乙磺酸MES+0.05 mol/L CaCl2组合原生质体产量和活力最高;当PEG6000浓度为30％时,原生质体一对一融合概率最高,达10.67％;融合后形成的第一代类愈伤组织细胞及再分化的芽苗有60％染色体倍性为6x,说明草莓属间体细胞已经融合,进一步开展育种是可行的.     

活性人参与鲜人参生晒参和红参成分比较研究(Ⅰ)——人参皂甙分析测定

用同一产地的鲜人参加工成活性人参、生晒参和红参,采用高效液相法进行对比分析,人参皂甙含量高低依次为鲜人参、活性人参、生晒参、红参。潘性人参皂甙含量接近鲜人参,特别是丙二单酰基皂甙在加工过程中未发生或较少发生水解作用,仍以原皂甙形式存在,这是活性人参最大特点之一。     

连栋温室甜椒工厂化生产技术

正连栋温室甜椒工厂化生产技术包括岩棉塞+岩棉块育苗、椰糠条定植、甜椒不同生长阶段适宜的温室环境调控和水肥灌溉策略等,采用该技术实现了甜椒周年生产,每平方米甜椒产量达13.2 kg。甜椒营养价值高,富含抗氧化的VC,深受国内外消费者的欢迎。尤其北美、欧洲地区的甜椒栽培技术较为先进,产业化程度高,多采用玻璃连栋温室无土栽培技术,茬口为一年一茬,采收期可达     

白蜡虫多糖免疫调节与抑制肿瘤活性

采用环磷酰胺诱导免疫低下小鼠模型,通过测定模型小鼠的炭粒廓清指数、吞噬指数、胸腺指数和脾指数考察白蜡虫多糖的免疫调节能力;对接种S180瘤细胞的小鼠采用口服和注射方式提供白蜡虫多糖,以抑瘤率考察白蜡虫多糖体内抑瘤活性;以生长率为指标考察白蜡虫多糖对人白血病细胞株、人肺癌细胞株、人胃癌细胞株及人肝癌细胞株等4种肿瘤细胞的抑制作用。结果显示:白蜡虫粗多糖(Cwps)和纯化多糖(Pwps)均能明显增加免疫低下小鼠碳粒廓清指数及吞噬指数,但对胸腺指数和脾指数无改善作用;体内抑瘤试验发现,白蜡虫多糖对小鼠体内S180有明显的抑瘤效果,但对离体肿瘤细胞生长却无明显抑制作用。研究结果表明:白蜡虫多糖能增加免疫低下小鼠的非特性免疫能力,具有体内抑制肿瘤作用,但对肿瘤细胞无细胞毒作用,揭示白蜡虫多糖通过提高小鼠免疫能力达到体内抑制肿瘤的功效。     

弓形虫蛋白质翻译后修饰研究进展

弓形虫是一种复杂的单细胞原生动物寄生虫,通过入侵宿主细胞、分裂和诱导宿主细胞破裂等一系列的过程,在温血动物体内进行增殖。弓形虫的生物学特征受基因组、表观遗传及转录等多种因素的调控。蛋白质翻译后修饰（protein post-translational modifications,PTMs）,如磷酸化、泛素化、巴豆酰化、棕榈酰化、琥珀酰化、乙酰化、甲基化、糖基化和二羟基异丁酰化等,是弓形虫调节对细胞外刺激的反应和生命周期转变的主要机制之一。弓形虫蛋白质翻译后修饰通过改变靶蛋白的定位、结构、活性、蛋白质-蛋白质相互作用等增加蛋白质的复杂性和多样性,从而在虫体生命周期的任何时间点都可以发挥至关重要的作用。在这篇综述中,作者重点对弓形虫蛋白质翻译后修饰进行简要总结,以期为深入研究弓形虫的生物学特征奠定基础。     

关东人参系列产品综合质量评价

通过对关东人参、高丽参和日本参中主要成分的分析比较,发现关东人参主要产品中人参皂甙、糖分、氨基酸、挥发油等含量均高于高丽参和日本参。在分析中还首次从红参中分得顺式石竹烯等15种化合物和田七素。     

猪苗免疫接种的注意事项

当前,随着养猪业向规模化、集约化方向发展,饲养密度逐渐加大,猪的流动性和引种工作频繁,同时,猪病发生也变得很复杂。某些传染病的免疫失败不断发生,总结起来有疫苗、猪自身、免疫实施者三大因素。就此三个因素分别叙述注意事项,与业内同行共同探讨。