DON暴露对断奶仔猪小脑组织脂质过氧化反应、神经递质分泌及钙稳态的影响

旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对断奶仔猪小脑组织中脂质过氧化、神经递质及钙稳态的影响。选择临床检查健康的15头"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,随机分成3组,每组5头,对照组饲喂基础饲粮,DON低剂量组和高剂量组分别饲喂1 mg·kg~(-1)和2 mg·kg~(-1)的DON饲粮。试验期为60 d。试验结束时进行屠宰,取部分小脑组织匀浆用于检测氧化与抗氧化指标、神经递质及钙离子含量;部分组织存于液氮,用于检测钙调通路相关基因和蛋白的表达水平。结果显示,与对照组相比,DON显著降低断奶仔猪小脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,提高一氧化氮(NO)含量;并引起5-羟色胺(5-HT)及Ca~(2+)含量显著增加,同时使多巴胺(DA)及乙酰胆碱(ACH)的含量显著下降;此外,DON还使小脑组织中钙调蛋白基因(CaM)及钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ基因( CaMKⅡ)表达降低,同时降低CaM蛋白表达水平,增加CaMKⅡ蛋白磷酸化水平。研究结果说明:DON可影响断奶仔猪小脑的脂质过氧化反应,改变神经递质分泌,引起钙稳态失衡,对断奶仔猪具有一定的神经毒性作用。     

乳房炎奶牛血液流变学指标及细胞因子的变化

随机选取63头荷斯坦奶牛,比较研究临床健康奶牛和乳房炎奶牛的血液病理学变化.结果表明:(1)临床型乳房炎奶牛在120,70,50,30 s-1等切变率下全血黏度、全血还原黏度、红细胞变形指数、红细胞聚积指数、红细胞刚性指数等血液流变学指标均显著高于健康奶牛和隐性乳房炎奶牛(P＜0.01或P＜0.05),而健康奶牛和隐性乳房炎奶牛各项血液流变学指标均差异不显著(P＞0.05).(2)临床型乳房炎奶牛血清中IL-1β、IL-8、TNF-α水平均显著高于健康奶牛(P＜0.01或P＜0.05),临床型乳房炎奶牛血清中IL-8、TNF-α水平显著高于隐性乳房炎奶牛(P＜0.05),而健康奶牛和隐性乳房炎奶牛血清中各细胞因子水平均差异不显著(P＞0.05).试验证实了临床型乳房炎奶牛"血瘀证"的客观存在,乳腺炎症反应参与了血瘀证的形成,血液流变学指标和血清中IL-8、TNF-α可以用作乳房炎诊断和治疗效果的评价.     

中药复方灌注剂治疗奶牛乳房炎的药效与应用安全性研究

治疗奶牛乳房炎的中药复方灌注剂由瓜子金、紫花地丁、鸡血藤和黄芪等11味中药组方制成。以兔子、小白鼠和豚鼠为试验动物,从镇痛、抗炎、解热、异常毒性、热源检查、溶血与凝集和过敏反应等方面进行了药效与应用安全性研究。试验显示,该中药复方灌注剂对小白鼠镇痛和抗炎效果以及对伤寒-副伤寒二联菌苗致家兔发热反应的解热效果极显著(P<0.01)。通过安全性试验,未发现该中药复方灌注剂引起异常毒性、热敏、溶血与凝集反应和过敏反应。结果表明,该中药复方灌注剂镇痛、消炎和解热效果显著,安全性较高,可用于临床试验。     

大豆抗原蛋白对仔猪的免疫作用

通过口服或注射两种免疫途径研究大豆抗原蛋白免疫剂对仔猪血清中大豆抗原蛋白抗体效价及IgA、IgM、IgE、IgG和IL-4水平的影响。选取70头7日龄“杜×长×大”杂交仔猪,随机分成A组(对照)、B组[β-伴大豆球蛋白(7S)致敏]、C组[大豆球蛋白(11S)致敏]、D组(7S口服免疫+致敏)、E组(11S口服免疫+致敏)、F组(7S注射免疫+致敏)和G组(11S注射免疫+致敏),每组10头。D、F组和E、G组仔猪在7日龄时按分组设计,口服或注射纯化的11S或7S免疫剂,A组注射生理盐水;在14日龄时再免疫一次。所有仔猪于21日龄断奶。从21日龄开始,A组仔猪饲喂基础日粮,B、D、F组和C、E、G组仔猪饲喂分别添加5% 7S或5% 11S的基础日粮,连续饲喂7 d。在27日龄时,对仔猪进行皮肤致敏试验。在 7、14、21、27日龄时,所有仔猪前腔静脉采血,采用ELISA法检测血清中IgA、IgM、IgE、IgG和IL-4水平,采用琼脂扩散法测定血清中7S和11S的抗体效价。结果显示,仔猪皮肤致敏评判结果B、C组>D、E组>A、F、G组,且7S致敏性高于11S。在21日龄时,F、G组血清中抗体效价高于D、E组;在27日龄时,B、C组血清中抗体效价高于D、E、F、G组。在14日龄时,F组与A组相比,IgG、IL-4水平显著(P<0.05)升高;在21日龄时,D、E、F、G组的IgM、IgE、IgG、IL-4水平与A、B、C组相比显著(P<0.05)升高,除了G组IgG外,F、G组又显著(P<0.05)高于D、E组;在27日龄时,各处理组IgE、IgG和IL-4水平极显著(P<0.01)高于A组,且B组显著(P<0.05)高于C组,D、E组显著(P<0.05)高于F、G组。试验结果证实,7S对仔猪的致敏作用高于11S,大豆抗原蛋白免疫剂对仔猪具有一定的免疫保护作用,且对7S的免疫效果优于11S,注射免疫的效果要优于相同剂量的口服免疫。     

复方中药制剂对仔猪免疫机能及消化酶活性的影响

选取临床检查健康的80头4日龄"杜×长×大"三元杂交仔猪,按体重和性别分成4组,每组20头,分别饲喂基础日粮、基础日粮+人工乳、基础日粮+复方中药制剂0.25%、基础日粮+复方中药制剂0.5%,试验期21 d。所有仔猪于14、21、28和35日龄时称重,计算生长性能,与组Ⅰ相比,组Ⅳ仔猪平均日增重和日采食量分别升高18.32%和4.78%,料重比降低11.8%;同时每组固定10头仔猪,经前腔静脉采血,用于血清免疫球蛋白水平的测定,与组Ⅰ相比,组Ⅳ仔猪血清IgG、IgA和IgM水平分别升高18.09%、15.71%和17.35;试验结束时,每组选择6头仔猪进行屠宰,取十二指肠中段、空肠近、远段、回肠中段内容物,用于消化酶活性的测定,与组Ⅰ相比,组Ⅳ仔猪十二指肠淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性分别升高14.23%、36.87%和40.85%。结果表明,复方中药制剂能显著提高仔猪的生长性能、免疫机能和消化酶活性,有效促进仔猪生长。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇暴露对断奶仔猪延髓脂质过氧化反应、神经递质及钙稳态的影响

旨在通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)体内暴露试验,检测仔猪延髓组织的脂质过氧化反应、神经递质分泌及钙稳态的变化,研究DON对仔猪的神经毒性作用。选取30头21日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,随机分为对照组、DON低剂量组和DON高剂量组,每组10头仔猪。对照组饲喂基础饲料,DON低剂量组和高剂量组分别饲喂含1、2 mg·kg^-1DON的饲料,试验期为60 d。试验结束时,每组随机选择5头仔猪屠宰,采集延髓组织,检测氧化与过氧化水平、神经递质含量和Ca²⁺浓度、钙调蛋白(CaM)与钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)mRNA相对表达量及CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ的蛋白表达水平。结果显示:与对照组相比,DON高、低剂量组脂质过氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著降低(P<0.01),而一氧化氮(NO)浓度极显著升高(P<0.01);DON高、低剂量组神经递质5-羟色胺(5-HT)浓度极显著升高(P<0.01),而乙酰胆碱(ACH)浓度极显著降低(P<0.01),高剂量组多巴胺(DA)和γ-氨基丁酸(GABA)浓度显著下降(P<0.05);DON高、低剂量组钙稳态指标Ca²⁺浓度均极显著升高(P<0.01),低剂量组CaM mRNA表达量显著降低(P<0.05),高、低剂量组CaMKⅡmRNA表达量均极显著降低(P<0.01);DON高剂量组CaM蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),而p-CaMKⅡ蛋白表达水平极显著升高(P<0.01)。试验结果表明,DON暴露能够改变仔猪延髓组织脂质过氧化反应及神经递质的分泌,并导致钙稳态紊乱,对断奶仔猪具有一定的神经毒性作用。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对断奶仔猪血清及小肠黏膜免疫功能的影响

旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对断奶仔猪血清及肠道黏膜免疫功能的影响。选择30头21日龄临床检查健康的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,体质量(6.87±0.41)kg,随机分为3组,对照组饲喂基础日粮,低剂量组和高剂量组分别饲喂含1,2 mg/kg的DON日粮,试验期为60 d。试验结束时,所有仔猪经前腔静脉采血,分离血清,用于检测免疫因子含量;同时每组随机选择5头仔猪进行屠宰,收集免疫器官及各段小肠,用于检测免疫器官指数及小肠组织中免疫球蛋白的表达水平。结果显示:与对照组相比,DON处理组仔猪血清中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、补体3(C3)及补体4(C4)含量均显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);试验组仔猪脾脏指数较对照组显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);小肠各段肠黏膜中免疫球蛋白表达水平均随DON含量的增加而显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。结果表明,在本试验条件下,DON可降低断奶仔猪的体液免疫及肠道黏膜免疫水平,改变仔猪的免疫功能。     

高脂血症奶牛乳腺组织中脂代谢相关生化指标和基因表达的变化

本试验旨在研究高脂血症奶牛乳腺组织中脂代谢相关生化指标和基因表达的变化。选取12头荷斯坦奶牛,采用全自动生化分析仪测定奶牛血清中主要生化指标,根据血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量是否升高将奶牛分为正常组和高脂组。取奶牛乳腺组织制作病理切片及油红O染色,观察乳腺组织病理形态学变化和脂滴蓄积情况。提取乳腺组织总RNA,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测乳腺组织脂代谢相关基因的相对表达量。结果表明:1)高脂组奶牛乳腺组织中脂代谢指标TC、TG、极低密度脂蛋白(VLDL)的含量显著升高(P0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量呈降低趋势,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量呈升高趋势,但差异均不显著(P0.05)。2)病理学观察可见高脂组奶牛乳腺腺泡上皮细胞脱落,乳腺腺泡壁明显增厚,细胞肿胀,部分细胞脂滴增多,细胞核染色质浓缩、边移、细胞轮廓不清。油红O染色可见正常组奶牛乳腺组织细胞核明显呈蓝色,红色区域较少,主要集中在细胞边缘,仅有少量脂滴聚集,而高脂组奶牛乳腺组织有大片红色区域,小叶间结缔组织密度增加,乳腺上皮可见脂滴相互融合形成大的空泡状脂肪细胞。3)与正常组相比,高脂组奶牛乳腺脂代谢内源合成关键酶基因乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)以及活化相关基因乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)、长链脂酰辅酶A合成酶1(ACSL1)的相对表达量显著升高(P0.05),摄取和转运关键基因脂肪酸结合蛋白3(FABP3)、分化抗原簇36(CD36)、脂蛋白脂肪酶(LPL),去饱和酶关键基因硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)、脂肪酸去饱和酶1(FADS1)以及乳酯化关键基因乙酰甘油磷酸脂酰转移酶6(AGPAT6)的相对表达量显著降低(P0.05)。综上所述,高脂血症促使奶牛血脂水平升高,引起乳腺组织出现明显的病理变化,同时,乳腺脂代谢相关基因表达发生明显变化。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇暴露对仔猪海马神经细胞神经递质、脂质过氧化及钙稳态的影响北大核心CSCD

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对体外培养的仔猪海马神经细胞中神经递质、脂质过氧化及钙稳态的影响,探讨DON的神经毒性作用。以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng/m L)处理仔猪海马神经细胞24 h后,检测细胞中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、乙酰胆碱(ACH)、γ-氨基丁酸(GABA)、去甲肾上腺素(NE)含量,总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量,钙离子(Ca2+)、钙调蛋白(Ca M)含量以及Ca M m RNA相对表达量。结果表明:与对照组相比,1)当DON浓度为1 000 ng/m L时,5-HT、DA、ACH含量显著升高(P<0.05),GABA含量极显著升高(P<0.01),而NE含量显著降低(P<0.05);当DON浓度为2 000 ng/m L时,5-HT、DA、ACH含量极显著升高(P<0.01)。2)当DON浓度为250 ng/m L时,SOD活性和T-AOC极显著降低(P<0.01);当DON浓度为1 000 ng/m L时,GSH-Px活性显著降低(P<0.05),NO含量极显著降低(P<0.01),而MDA含量极显著升高(P<0.01);当DON浓度为2 000 ng/m L时,CAT活性显著降低(P<0.05),GSH-Px活性极显著降低(P<0.01)。3)当DON浓度为125 ng/m L时,Ca M含量极显著升高(P<0.01);当DON浓度为250 ng/m L及以上时,Ca2+含量和Ca M m RNA相对表达量极显著升高(P<0.01)。综上,DON暴露可改变仔猪海马神经细胞神经递质的分泌及脂质过氧化,并影响钙稳态,对仔猪海马神经细胞具有一定的神经毒性作用。     

犬源复合益生菌对脾气虚犬盲肠菌群的影响

本试验旨在通过高通量测序技术研究犬源复合益生菌对脾气虚犬盲肠菌群的影响。选取24只1岁龄比格犬,随机分成4组:对照组、脾气虚组、自然恢复组和益生菌治疗组,每组6只。其中,对照组饲喂基础饲粮;脾气虚组、自然恢复组和益生菌治疗组在饲喂基础饲粮的同时每天按照10 mL/kg BW的剂量灌喂番泻叶水煎液,连续灌喂7 d,建立脾气虚模型。在试验第7天,采集脾气虚组犬盲肠内容物;对照组和自然恢复组犬继续饲喂基础饲粮7 d,益生菌治疗组犬在饲喂基础饲粮的基础上每天按照1×10~9CFU/只的剂量灌服犬源复合益生菌7 d。在试验第14天,随机从对照组、自然恢复组和益生菌治疗组各选4只犬采集盲肠内容物。利用Illumina HiSeq 2500平台及QIIME测序软件对各组犬盲肠内容物进行生物信息学分析。结果显示:1)对照组与益生菌治疗组盲肠菌群的ACE指数、Chao1指数、Shannon指数均高于脾气虚组与自然恢复组,而Simpson指数则低于脾气虚组与自然恢复组。2)益生菌治疗组盲肠菌群中拟杆菌门、纲、目、科以及芽孢杆菌纲、属的相对丰度均显著高于对照组和脾气虚组(P<0.05),其他菌群在不同分类水平上的相对丰度均与对照组无显著差异(P>0.05)。综上所述,犬源复合益生菌不仅能够使番泻叶诱导的脾气虚犬盲肠菌群多样性恢复至正常犬水平,而且还能够提高盲肠菌群中有益菌拟杆菌、芽孢杆菌的占比,对脾气虚犬盲肠菌群结构有良好的调节作用。