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为研究血液外胞体中miRNA对延边黄牛垂体细胞中生长激素(GH)分泌的影响,本研究选择在延边黄牛和韩延牛血液外胞体中显著差异表达的miR-6523a,利用实时定量PCR(qPCR)和Western Blot技术,研究了miR-6523a对延边黄牛垂体细胞中GH分泌水平的影响及miR-6523a与靶基因间的调控机制。生物信息学分析和双荧光素酶报告基因系统结果显示,miR-6523a靶向了SSTR5的3′非翻译区(UTR);qPCR和Western Blot检测结果显示,与对照组相比,添加miR-6523a-mi能极显著提高延边黄牛垂体细胞中GH mRNA和蛋白的表达(P<0.01),而添加miR-6523a-in,GH mRNA和蛋白的表达有所降低,但和对照组相比差异不显著(P>0.05);与对照组相比,添加miR-6523a-mi能极显著抑制SSTR5 mRNA和蛋白的表达(P<0.01),而添加miR-6523a-in,SSTR5 mRNA和蛋白的表达均有所提高,但和对照组相比差异不显著(P>0.05)。本研究表明,miR-6523a可通过调节SSTR5基因的... 相似文献
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为探究盐酸血竭素(DP)抗金黄色葡萄球菌(S.aureus)分选酶A(SrtA)的活性及机制,本研究利用纤连蛋白黏附试验和细胞侵袭试验,验证DP通过抑制SrtA的活性影响S.aureus黏附于纤连蛋白和降低其对细胞的侵袭能力;利用荧光底物肽实验,测定DP对S.aureus SrtA的抑制作用;利用生物膜试验,观察DP对S.aureus形成生物被膜(BF)的影响能力;利用分子模拟和定点突变方法,分析验证DP对SrtA的活性中心影响作用。结果表明,DP分别在2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL和16μg/mL时,可显著性抑制S.aureus SrtA蛋白的催化活性,且这一抑制作用呈浓度依赖性;DP可以通过影响SrtA的催化活性从而阻碍其表面蛋白锚定于宿主细胞表面,进而降低S.aureus侵袭细胞的能力;DP在8μg/mL和16μg/mL时可以显著降低S.aureus与纤连蛋白结合的能力(p<0.01);DP在2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL和16μg/mL时均可以显著降低S.aureus形成BF的能力;DP可通过与SrtAΔN59中的P30和T105结合而封闭了其活性中心。综上所述,DP可作用于S.aureus毒力因子SrtA,通过抑制SrtA的活性达到减弱其毒力的效果。本研究将为DP抗S.aureus的作用机制提供参考依据。 相似文献
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[目的]从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome(外胞体),研究2种外胞体对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响。[方法]通过超高速离心等方法,从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome,并以100 ng/m L的浓度分别转染给原代培养的延边黄牛垂体细胞培养12、24和48 h,对细胞上清液中GH含量进行检测。[结果]电镜下延边黄牛与韩延牛血液Exosome均呈圆形或椭圆形的双层膜小囊泡,直径均为30~100 nm,膜结构完整。韩延牛Exosome处理组的延边黄牛垂体细胞GH mRNA表达显著高于延边黄牛Exosome处理组(P0.05)。韩延牛血液Exosome处理组垂体中GH的含量显著高于延边黄牛血液Exosome处理组(P0.05)。[结论]延边黄牛和韩延牛血液中的Exosome对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响有明显差异。 相似文献
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以健康家兔和小鼠为试验材料,通过肠推进试验和离体回肠法研究了中药“肠宁”对动物机体小肠平滑肌运动的影响.结果表明,“肠宁”能有效抑制家兔离体肠管,使其收缩幅度降低,舒张时间延长,并且对硝酸毛果芸香碱引起的小肠蠕动加快起到拮抗作用;能减缓活体小鼠小肠的蠕动速度,与对照组比较差异显著. 相似文献
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大肠杆菌多重耐药基因AcrA的PCR检测 总被引:1,自引:0,他引:1
临床分离的大肠杆菌多重耐药菌株越来越多,大肠杆菌形成多重耐药的原因主要与大肠杆菌染色体上存在的AcrAB外排系统有关。本试验首先用环丙沙星、四环素和氯霉素对敏感大肠杆菌进行多重耐药诱导,使敏感大肠杆菌具有了多重耐药性。然后对多重耐药性大肠杆菌的基因组DNA进行了提取,以基因库中AcrA基因的编码序列设计引物,以多重耐药性大肠杆菌基因组为模板,对AcrA基因进行了PCR扩增和测序,得到了1005bp的片断,并与基因库中AcrA基因的序列进行了比较,同源性为99.8%。结果表明:AcrA基因与大肠杆菌的耐药性有关。 相似文献
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连翘对大肠埃希菌多重耐药基因AcrA的影响研究 总被引:2,自引:0,他引:2
为了研究和开发理想的大肠埃希菌多重耐药抑制剂,用连翘作用于多重耐药大肠埃希菌,提取其基因组DNA,并以大肠埃希菌AcrA基因的编码序列设计引物,成功扩增出AcrA基因中1005bp的片段,与多重耐药菌种中的AcrA基因序列进行对比。结果表明,连翘改变AcrA基因的编码序列,并能有效抑制多重耐药大肠埃希菌的生长,减弱其耐药性。 相似文献
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熊胆汁具有清热、平肝、明目等功能,常用于惊风抽搐、目赤肿痛、咽喉肿痛等疾病的治疗。目前主要是采用活熊引流技术提取胆汁,但在提取过程中由于种种原因容易造成细菌感染,引起胆囊炎。试验对患有胆囊炎熊胆汁中的细菌进行了分离鉴定,并针对分离的细菌进行了中药筛选,旨在筛选有效药物为预防和治疗熊胆囊炎提供理论依据。1材料与方法1.1试验材料培养基:普通琼脂、普通肉汤、伊红美蓝、麦康凯、三糖铁琼脂斜面、远藤氏培养基均按常规方法配制。试验药物:单味中药和复方中药,延边大学农学院药理实验室提供。仪器:立式高压蒸气灭菌器、显微镜… 相似文献
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