藜异型性种子后代植株对NaCl和KCl短期胁迫的响应

[目的]研究不同盐(NaCl和KCl)胁迫对藜(Chenopodium album)的抗氧化系统的影响,探讨异型种子后代植株之间对盐胁迫生理响应机制的可能差异.[方法]以藜异型性种子后代植物为材料,测量藜黑色及褐色种子在不同浓度(0、50、300 mmol/L) NaCl或KCl短时间胁迫下相关生理指标(氧自由基、MDA;SOD、CAT、POX).[结果]在不同浓度(0、50、300 mmol/L) NaCl或KCl短时间胁迫下,藜黑色及褐色种子后代植株活性氧水平随时间有升高但不显著,异型性种子后代植株之间无显著差异;MDA随盐胁迫时间增加,呈显著上升趋势,NaCl胁迫上升更明显.短时间盐胁迫下,两种种子后代中抗氧化酶活性(SOD、CAT、POX)均呈上升趋势,CAT和POX增加更显著;NaCl比KCl胁迫,低浓度比高浓度盐,对氧化酶活性的促进更明显.以上参数在异型性种子后代植株间未显示显著差异.[结论]抗氧化酶在藜耐受短期高盐(NaCl或KCl)胁迫过程中发挥重要作用;藜异型性种子后代植株在短期盐胁迫下表现相似的生理生化特性.     

对玉米种子快速发芽的探讨

目前所使用的种子发芽方法有常规发芽法和快速发芽法。常规发芽法的特点是准确,但所需时间较长。而快速发芽法可以在30～35℃的温度下,做各种作物种子的发芽试验,且省时、准确,具体操作如下。一、种子发芽率快速测定方法1.试样。从净度检验后的种子中随机取样4份,大粒种子每份50粒,中小粒种子每份100粒。2.大粒种子用毛巾卷发芽法。将毛巾煮沸消毒后,沥去多余水分,将种子均匀的摆放在浸湿的毛巾卷里,放在30～     

银染聚丙烯酰胺凝胶电泳技术体系的优化

【目的】针对银染PAGE实验中常出现的背景颜色深、条带弥散、凝胶变形及条带不整齐等问题进行归纳总结并提出优化方法。【方法】以甘蓝型油菜基因组DNA为研究对象,通过PAGE电泳后银染并调整试剂配方、实验条件,筛选出适合实验的技术体系。【结果】甲醇浓度、电压稳定性、电泳温度、气泡等显著影响实验结果。甲醛浓度过高(1.25%)时,虽所需染色时间短,但凝胶背景深;甲醛浓度过低(0.001 25%)时,背景浅但条带淡,需要长时间染色;电压不稳定会造成条带弥散;电泳温度过高,导致凝胶变形,条带弯曲;凝胶中的气泡会扰乱DNA条带的形状;NaOH浓度在0.875%~1.375%,染色结果无明显差异。【结论】甲醛用量4 mL(1%)、保持稳定电压、在冰浴中电泳、制胶时及时赶走所有气泡,可得到凝胶背景浅、条带清晰且正常的结果。     

番茄转录因子基因SlWRKY16的克隆及原核表达分析

从栽培番茄(Solanumlycopersicum)‘M82’中克隆到1个WRKY家族基因SlWRKY16。研究结果显示:SlWRKY16包含1 497 bp的完整开放读码框,编码498个氨基酸,理论分子量为55.5 kD,含有1个WRKYGQK保守结构域和C2H2锌指结构域,属于Ⅱb类WRKY转录因子基因,且定位于细胞膜上;栽培番茄Sl WRKY16与潘那利番茄Sp WRKY6(XP₀15064265.1)、马铃薯St WRKY6(XP₀06350473.1)同源性最高。qRT-PCR结果显示SlWRKY16在番茄不同组织中均有表达,叶片中的表达量最高;短时间非生物胁迫下该基因的表达量显著降低。此外,重组菌pET-30a-SlWRKY16在NaCl、甘露醇胁迫下生长均明显低于对照菌pET-30a。综上,番茄SlWRKY16基因可能在响应非生物胁迫过程中具有负调控效应。     

蛋白质凝胶电泳技术在作物品种鉴定中的应用

 随着世界各国经济贸易和农业科学技术的发展 ,特别是植物新品种保护法的实施 ,品种鉴定越来越引起人们的关注。大量证据显示 ,凝胶电泳技术在作物品种鉴定中起着举足轻重的作用。对各种凝胶电泳技术现状做了全面综述 ,包括电泳方法的发展过程、电泳方法间的比较、影响因素、应用范围、己取得的成就和未来的发展方向。随着我国植物新品种保护范围的不断扩大 ,电泳方法必将在作物品种鉴定中发挥更大的作用。     

增光保温是北方日光温室番茄高产增效的关键措施

辽宁省朝阳县位于辽宁省西部,地理坐标为北纬40°55′~41°54′,东经119°51′~120°47′,属北温带大陆季风气候区。年平均日照2861.7小时,属全省之首。太阳辐射量为每平方厘米140.7千卡。年平均气温8.5℃,日温差较大。朝阳县推广的高效节能日光温室。①具有合理的采光角度,坐北朝南,正南偏西3~8度。此方向可延长下午光照时     

异子蓬异型种子萌发基因差显的cDNA AFLP技术体系优化

以异子蓬种子为材料,建立并优化其萌发过程中基因表达差显的cDNA-AFLP技术体系。分别以总RNA和mRNA反转录的双链cDNA为模板,对25μL PCR扩增体系中的退火温度、引物量、DNA聚合酶种类及电泳条件进行优化。结果显示,以分离的mRNA为模板可以反转录得到品质较好的双链cDNA;PCR扩增选择较高退火温度(第1轮为56℃,第2轮为65～56℃)、引物量为1μL(10μmol/L)、使用高效PremixLA Taq Hot Start DNA聚合酶、在约800V电压下进行60g/L变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,可得到条带清晰、多态性好的cDNA-AFLP结果。     

不同灭菌方法对烟草和拟南芥种子萌发及无菌苗生长的影响

[目的]在植物转基因研究中及时获得大量健壮的无菌苗是后续实验的基础.研究种子的灭菌处理方法对种子萌发及随后的幼苗生长的影响.[方法]以烟草和拟南芥种子为材料,通过比较次氯酸钠(NaClO)灭菌后用无水乙醇或/和灭菌水单独或交替处理的效果,研究其对拟南芥粘液质种子和烟草无粘液质种子的萌发和无菌幼苗生长的影响.[结果]无水乙醇对烟草种子萌发及幼苗生长有显著抑制作用,萌发率、幼苗根长和株高等均显著降低;无水乙醇短时间处理能促进拟南芥萌发、幼苗生长及叶片数的增多,而无水乙醇长时间处理只能促进拟南芥主根的伸长.结合种子萌发和幼苗的生长状况,10; NaClO处理4min后用灭菌水润洗对烟草种子灭菌效果最好;10; NaClO处理4 min后,先无水乙醇润洗2次,再灭菌水润洗3次对拟南芥种子灭菌效果最好.[结论]烟草和拟南芥均属于小种子类型,但二者最佳灭菌方法显著不同,为两种转基因模式植物烟草和拟南芥种子的灭菌方法提供参考依据.     

蛋白质电泳技术在品种真伪和纯度检验上的应用

应用种子贮藏蛋白和同工酶电泳技术对油葵品种康地4、5、6、7号及G101的父母本和杂交种在品种鉴定上的应用方面进行分析研究,结果表明:在所有品种中,种子贮藏蛋白电泳谱带多,但没有明显差别;过氧化物酶谱带数少,在G101杂交种有明显区别父母本的过氧化物酶谱带;酯酶电泳谱带数目较多且清晰,康地6号杂交种中出现了明显的父母本的互补酯酶电泳谱带.利用酯酶谱带对康地6号杂交种进行纯度鉴定,其结果与田间鉴定结果相近.     

玉米自交系JH089种子萌发及幼苗生长的抗逆性

【目的】研究玉米优良自交系JH089在不同胁迫下种子萌发特性及幼苗生长情况,分析其对各种胁迫的耐受性,研究自交系JH089的抗逆性,为选育抗逆杂交种提供理论依据。【方法】以玉米自交系JH089为材料,在萌发期及2叶期进行不同浓度NaCl(100、200、250、300、400、500 mmol/L)、PEG 6000(10%、20%、30%)及4℃胁迫处理,测定萌发率、抗旱指数、株高、叶形等指标。【结果】玉米自交系JH089在萌发期随着NaCl或PEG处理浓度的增加,萌发所需时间延长,活力指数及抗旱耐盐指数下降。在幼苗期盐浓度高于200 mmol/L 或者PEG高于20%时株高、叶长和叶宽显著降低,出苗率大幅下降,植株生长显著减缓,叶片受胁迫程度明显,较长时间低温处理幼苗生长受到抑制。【结论】玉米自交系JH089能耐受低浓度的盐或旱胁迫,短时间低温对幼苗生长无显著影响,但较高强度或较长时间胁迫则造成明显伤害。