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O型口蹄疫病毒VP1嵌合基因的构建及原核表达 总被引:9,自引:0,他引:9
首先合成我国O型口蹄疫病毒2个疫苗毒株VP1基因的3个抗原袁位,与另外扩增的流行毒株VP1基因末端273bp片段相连,构建出O型VP1嵌合基因片段(VP1O)。然后,将VPIO基因连接到原核表达载体pET28a上,构建了重组表达质粒pET28a-VP1O,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。SDS-PAGE电泳表明。VP1O基因在大肠杆菌中获得表达。Western blotting检测证实表达的VP1O蛋白具有良好的生物学活性。对表达蛋白通过包涵体洗涤的方法进行初步纯化,获得了较高纯度的VP1O蛋白。 相似文献
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前言奶牛妊娠的早期诊断是提高繁殖率的一项重要技术措施,以保证母牛在产犊后90天内受孕,减少牛场经济损失。目前,采用配种后60天直肠检查诊断为多,但其时间间隔较长,一般要在配种后3个情期才能确诊,并且其准确率还受工作人员的技术水平的影响。为克服上述不足,不少学者通过测定乳中孕酮浓度来进行早期妊娠诊断。 相似文献
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我国目前给猪免疫的途径主要是通过肌肉注射。注射疫苗的剂量和部位的准确性,是影响免疫成功率的重要环节之一。用猪瘟疫苗预防注射为例,按规定每头猪肌肉注射猪瘟疫苗为1毫升、是150个猪瘟疫苗单位,如果注射剂量虽然是 1毫升但达不到肌肉层,或即使注到肌肉层而疫苗剂量不足1毫升(在注射过程中间各环节丢失),势必要影响免疫质量效果。造成1毫升的疫苗不能全部注入肌肉层原因,一方面是人的技术不熟练,另一个重要原因是目前所使用的各种注射器具在使用方法上有个共同点是边向体内进针边用手拍药,几乎同步进行,瞬时间人为控制这两个操作环节,必然有时会出现1毫升疫苗不能全部注入肌肉深层的缺点。 相似文献