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41.
家蚕半胱氨酸蛋白酶抑制剂BmCPI40鉴定及时空表达特征 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】鉴定家蚕(Bombyx mori)半胱氨酸蛋白酶抑制剂,并对其表达特征及调控进行分析,为深入研究半胱氨酸蛋白酶抑制剂在家蚕变态发育中的作用提供数据支持。【方法】根据家蚕基因组数据库和Primer 5.0软件设计BmCPI40去信号肽引物,对家蚕半胱氨酸蛋白酶抑制剂BmCPI40进行克隆,利用Clustal X和MEGA4.0软件对BmCPI40进行氨基酸序列和进化关系分析。采用原核表达系统对重组的BmCPI40进行表达、纯化和抗体的制备。运用RT-PCR和qPCR技术在核酸水平分析BmCPI40时空表达特征,利用Western和免疫荧光技术分别对BmCPI40进行蛋白水平检测和组织定位。qPCR方法检测20E诱导条件下BmCPI40在家蚕体壁中的表达量变化。用20E处理细胞,双荧光素酶报告系统对BmCPI40启动子序列活性进行检测,探究BmCPI40调控方式。【结果】鉴定、克隆、表达了家蚕的半胱氨酸蛋白酶抑制剂,并命名为BmCPI40,其ORF全长366 bp,编码121个氨基酸,其中前18氨基酸构成其信号肽,编码蛋白质大小约为12 249.21 Da,等电点为4.43;进化树分析显示BmCPI40与一些病原微生物半胱氨酸蛋白酶的抑制剂结构域进化关系较近;BmCPI40的原核表达结果表明,重组的BmCPI40以可溶蛋白的形式表达;BmCPI40 5龄第3天各组织Western blot结果显示,其主要存在于家蚕表皮中,头部也有微量存在;时期检测结果表明,BmCPI40幼虫期表达量明显高于蛹期,眠期及变态期表达量下调明显,这与核酸水平的qPCR结果相一致,进一步的体壁免疫荧光定位证实BmCPI40主要存在于体壁的皮细胞周围;qPCR表明,20E诱导5龄第2天家蚕幼虫后,BmCPI40表达量减少;双荧光素酶检测结果显示,20E诱导细胞后,BmCPI40启动子序列荧光素酶活性下降,证实BmCPI40受到了蜕皮激素的抑制作用。【结论】 BmCPI40的表达受到蜕皮激素的诱导下调,同时其可能参与了家蚕的蜕皮及变态发育过程。 相似文献
42.
浅谈工业与民用建筑冻土工程地质勘察的质量控制 总被引:1,自引:0,他引:1
由于冻土的复杂性和特殊性认识得不够全面,有时会出现缺漏项情况,从而影响勘察质量。现遵循质量策划控制到质量的原则,对勘察过程的每一道工程程序进行质量把关、质量控制,以达到提高勘察质量的目的。 相似文献
43.
44.
<正>2014年12月23日,由农业部科教司组织的“948”项目验收会在西南大学蚕学宫307召开,西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室夏庆友教授主持的“948”项目《家蚕重要经济性状的功能基因组学引进与研究》顺利通过专家组验收。验收会议由农业部科教司崔江浩副处长主持,周常勇副校长出席会议并发言。会上,项目主持人夏庆友教授就引进任务、考核目标、完成情况、取得的成果和前景以及经费使用情况等方面的内容作了汇报。验收专家组认真听取了项目组的工作汇报,审阅了有关材料。经质询 相似文献
45.
46.
【目的】探讨桑蚕Bombyx mori滞育阻断机理,比较HCl、二甲基亚砜(DMSO)法阻断蚕卵滞育后卵壳表面发生的一系列变化。【方法】用HCl和DMSO分别在产后20和12 h处理蚕卵,利用扫描电镜观察卵壳表面及气孔在处理后不同时间点的变化。【结果】HCl和DMSO处理均能成功地阻断蚕卵滞育的发生,蚕卵平均孵化率分别为93.37%和87.81%。扫描电镜观察HCl和DMSO处理的卵壳表面蚀刻效果明显,均出现了“脂质”脱落物;并且处理后蚕卵的气孔有逐步增大的趋势,与DMSO处理相比较,HCl处理获得的现象更为明显。【结论】卵壳表面变化可能与桑蚕滞育的阻断有关。 相似文献
47.
纳米18%阿维.烟碱AS对菜粉蝶幼虫毒力测定结果:比单剂1.8%阿维菌素EC和40%硫酸烟碱EC的毒力都高,得出了毒力回归方程式,共毒系数值大于常数值100,表明纳米18%阿维.烟碱AS具有较强的增效作用;配伍纳米18%阿维.烟碱AS在室内测出了对菜粉蝶效力最强的最佳使用剂量梯度(每公顷用药量),研究表明:用375~750 mL/hm2,有效成份a.i.g/hm2(67.5~135 g)对水750 L,对菜粉蝶的防效高、速效性和持效性强。 相似文献
48.
49.
长春市城市土壤特性研究 总被引:7,自引:0,他引:7
对长春市的几种典型城市土壤进行了分析研究。根据长春市土地利用类型,将长春市的城市土壤研究区划分为街道、公园、住宅区、学校、工厂五个功能区,共设lO个采样点。在对长春市城市土壤环境调研的基础上,对表层土壤(0-30cm)的理化性质进行了分析,并与长春市的自然土壤理化性质进行对比。研究结果表明:长春市的城市土壤理化性质与长春市自然土壤的理化性质有很大差异。并且不同的用地类型对土壤产生的影响有明显差异。基于研究结果,提出了长春市城市土壤的保护建议,为长春市绿化提供一定的参考。 相似文献
50.
CPPU对苦瓜果实生长的影响及其机理 总被引:3,自引:0,他引:3
以中熟苦瓜品种蓝山大白为度材,用CPPU10mg.L^-1,20mg.L^-1,50mg.L^-1和100mg.L^-1在开花当天和花前3天,花前1天以及花后3天,花后1天处理苦瓜子房,研究了对苦瓜果实生长、膨大和产量形成以及营养品质的影响。同时,对CPPU促进苦瓜果实生长和膨大的机理作了研究。试验结果表明,10mg.L^-1、20mg.L^-1和50mg.L^-1和CPPU在开花前、后1天和开花 相似文献