山羊地方性鼻内肿瘤病毒SC株gag基因分子克隆与原核表达

克隆山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV)的群抗原基因gag,并通过原核表达系统对gag进行表达研究。参照GenBank中收录的山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)gag基因序列设计1对特异引物,以地方性鼻内腺癌(ENA)山羊鼻内分泌物中病毒RNA为模板,RT-PCR扩增获得目的片段,并将产物连接到pMD18-T载体获得阳性克隆(pMD18-gag)并测序。根据gag基因的ORF设计1对表达用引物进行亚克隆,并将ORF重组到pET-32,重组质粒转化至宿主菌Rostta中,用IPTG诱导表达,对表达的蛋白用SDS-PAGE分析,纯化表达产物,通过ELISA初步分析产物的反应原性。结果显示:克隆获得长2 249 bp的核酸序列(GenBank:HM104174),含有完整的ORF,与已报道的ENTV-2 gag基因的同源性高达87%,氨基酸水平上的同源性高达96.4%。表达产物大小约87 ku,与理论推理一致。采用ELISA方法检测表达产物未能与ENA阳性血清发生特异性反应。结果表明:gag基因在原核系统pET-32/Rostta中得到表达,表达产物与ENA阳性血清不具反应原性。     

禽类贮精能力影响因素的研究进展

禽类输卵管的壳腺部和泄殖腔之间存在一种特殊的管状腺被称作贮精腺,能使禽类精子在输卵管内暂时存活的能力叫做贮精能力。在家禽生产中,高贮精能力的母禽可以降低人工授精的频率,减少对母禽的应激,减少种公禽的储备,节省人力劳动成本。该文主要从影响禽类贮精能力的直接因素、外界环境和遗传等方面对贮精能力的影响做以综述,以期为禽类贮精能力的提高研究提供思考。     

用科学发展观指导芦山县畜牧业产业化发展

党的十七大报告指出:"科学发展观,第一要义是发展,核心是以人为本,基本要求是全面协调可持续,根本方法是统筹兼顾。"深入贯彻落实科学发展观,关键是在准确把握科学发展观的科学内涵和精神实质的基础上,做到自觉地坚定地运用这一科学理论指导实际工作。本文作者在深入学习实践科学发展观基础上,按照科学发展观的要求,客观分析我县畜牧业产业发展现状、发展特点和发展优势,前瞻性、全局性地科学谋划发展定位和发展重点,紧紧围绕增强农业综合生产能力和农民增收这条主线,以科学发展观为指导,提出相应的发展对策和建议,推进我县畜牧业产业化大发展。     

鸭HDAC1基因编码区的分子克隆及生物信息分析

本研究利用RT-PCR方法获得了鸭HDAC1基因编码区(CDS)序列,结合生物信息学方法对鸭HDAC1序列进行了分析,并比较了其与人HDAC1二级结构和空间结构上的差异。结果表明:鸭HDAC1基因开放阅读框序列1 440 bp,编码479个氨基酸残基,与原鸡的同源性在核苷酸和氨基酸水平分别达到91.46%及93.53%,而与哺乳动物类及昆虫类同源性较低。HDAC1系统进化树表明,鸭HDAC1与原鸡聚在一支,而与哺乳动物人和小鼠遗传距离相对较近,并归类为一大支;鸭与人HDAC1二级结构和修饰位点上也有一定差异,在亲、疏水性质方面又表现一致。鸭与人HDAC1功能也较类似,在氨基酸生物合成、中央中介代谢、转译、能量代谢等功能都具有调控功能,而鸭HDAC1在氨基酸生物合成明显高于人HDAC1在此方面功能的概率。以上结果提示,这些二级结构、空间结构上的差异所造成鸭与人HDAC1功能上的差异,有可能是研究鸭HDAC1的切入点,需要在后续研究中加以重视。     

家兔MyoD1基因多态性与生长和屠宰性能的相关性

采用DNA直接测序法筛选生肌决定基因(MyoD1)5'-UTR及编码区的遗传多态性,采用高分辨率溶解曲线分型技术(HRM)对候选单核苷酸多态性位点(SNP)进行基因分型,并分析其与生长和屠宰性能的相关性(n=190)。结果显示:仅在外显子4上发现一个同义突变SNP(c.783 G>A)。等位基因A和G在3品种中的平均频率为0.216和0.784,基因型GG、GA和AA的平均频率分别为0.674、0.221和0.105。相关性分析表明,无论公母兔,其AA基因型个体的全净膛重和半净膛重都显著高于GA基因型个体(P<0.05),而该SNP位点与生长性状间无显著相关。研究结果支持MyoD1基因可作为家兔屠宰性能的候选基因。     

鹅ATP5E基因cDNA克隆及生物信息学分析

线粒体ATP酶合成体ε亚基(ATP synthase,H+transporting,mitochondrial F1 complex,epsilon,ATP5E)是ATP合成酶催化中心的最小亚基,在能量代谢过程中具有重要作用。本研究利用RT-PCR和RACE技术获得鹅ATP5E序列,并结合生物信息学方法对鹅ATP5E的序列进行深入分析。结果表明:克隆获得鹅ATP5E基因序列全长为347 bp,包括156 bp的编码区序列,编码51个氨基酸。同源性分析发现,鹅ATP5E核苷酸序列与推测氨基酸序列与原鸡的同源性最高,分别达到87.74%和89.58%,而与其他物种之间的一致性差异稍大。氨基酸序列分析发现该基因编码蛋白理论分子量为水溶性蛋白,相对分子量为5.79 ku,理论等电点为10.01,无信号肽序列和跨膜区,预测含有4个磷酸化位点,二级结构以α螺旋为主,预测ATP5E蛋白主要在能量代谢和脂肪酸代谢过程中有着关键作用。以上研究为进一步探讨ATP5E基因在鹅肝脂肪变性过程中的功能研究奠定了信息基础。