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以抗堆型艾美耳球虫子孢子的单抗EASP-3G3作为工具,对鸡各段消化道上皮细胞切片和子孢子进行免疫组化染色,并利用蛋白质印迹技术来检测单抗所识别子孢子可溶性抗原的分子量,来确定子孢子和十二指肠上皮细胞之间是否存在共同抗原。结果表明单抗只与十二指肠上皮细胞发生反应,而与其他肠段无染色反应。而且单抗所识别的可溶性抗原分子量为35~48 ku。抗子孢子的单抗同时与十二指肠上皮细胞和子孢子反应,而不与其他肠段反应,证明堆型艾美耳球虫寄生的位点特异性与十二指肠上皮细胞表面的某种抗原分子有内在的关系。 相似文献
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根据GenBank中猪圆环病毒1型(PCV1)ORF2基因序列,设计一对引物,应用PCR方法从PK-15细胞和疑似患断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的仔猪组织病料中分别扩增出PCV1 ORF2全基因(702bp)。将此基因片段克隆入pMD 18-T载体,筛选获得重组质粒pMD-PCV1-ORF2并对其测序,结果表明:所克隆的PK-15来源和组织病料来源的ORF2基因的同源性为99.4%,二者与Genbank上发表的PCV1 ORF2基因的同源性介于97.3% ~ 99.9%,与PCV2-ORF2基因同源性介于67.9% ~ 68.4%,二者编码的蛋白在几个功能区域比较保守;抗原表位预测表明PCV1 ORF2编码的蛋白具有良好的免疫原性 相似文献
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应用间接ELISA检测微小隐孢子虫抗体的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
以在大肠埃希氏菌中表达的微小隐孢子虫(Cryptosporidum parvum)子孢子表面抗原CPl5为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA。试验筛选出的最佳反应条件为:大肠埃希氏菌CPl5抗原包被量为1μg/孔,用100mL/L的兔血清进行封闭,以正常大肠埃希氏菌裂解上清液稀释待检血清。试验结果表明,应用CPl5重组蛋白作为诊断微小隐孢子虫抗体的抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒TJ9602、HN9604、BJ9601分离株特性的研究 总被引:3,自引:1,他引:3
从天津、河南、北京的鸡场分别分离到TJ9602、HN9604、BJ9601鸡传染性支气管炎病毒毒株,对其进行了动物回归、生物学特性、理化特性、血清学试验、抗原定位,对分离株的S1基因进行了RT-PCR扩增、核酸序列分析等研究.确定3株分离毒株为致肾病变的IBV,亲嗜器官为肾脏.HN9604和BJ9601与M41和H120均有较强的中和抗原交叉反应性,S1基因同源性分析,HN9604和BJ9601 S1基因与H120毒株的同源性最高,与H120毒株同属于A分支,均属于Ⅰ群.U9602与H120、M41等参考毒株的中和抗原交叉反应均较低,S1基因同源性分析,属于Ⅱ群. 相似文献
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蜡样芽孢杆菌检测方法研究进展 总被引:1,自引:1,他引:0
蜡样芽孢杆菌是一种可引起食物中毒的常见食源性细菌,属于革兰氏阳性的条件致病菌,广泛存在于土壤、空气、水及植物源、动物源加工的食品中。近年发现也能感染包括人在内的多种动物,是一种人兽共患性细菌,特别是能够引起人畜肠道疾病,导致腹泻型或呕吐型食物中毒。快速准确检测蜡样芽孢杆菌是控制其污染和感染后治疗的关键环节。作者对蜡样芽孢杆菌的检测方法进行了全面详细的总结,主要包括传统检测方法、普通PCR、多重PCR(mPCR)、实时荧光定量PCR(Real-time PCR)、叠氮溴化丙锭—定量PCR(PMA-qPCR)、微滴数字PCR技术(ddPCR)、环介导等温扩增(LAMP)及酶联免疫吸附测定(ELISA)。从传统方法到新兴技术,涉及传统检测技术、分子生物学检测和免疫学检测技术,作者主要总结了各方法的原理、检测范围,并对各方法的优缺点进行了比较。这些检测方法的灵敏度、精确度、样本要求等有所不同,可根据检测需要和条件限制进行选择。将分子生物学方法和免疫学等方法有效地结合起来,多角度多层次地对样品进行检测,可全面而准确地呈现检测结果。蜡样芽孢杆菌能产生多种毒素,这些毒素决定了其致病性,所以除了检测菌体外,还可以对毒素进行检测,有助于确定病原及其致病力。总的来说,蜡样芽孢杆菌对人畜的健康安全均构成了威胁,快速准确地检测能有效辅助治疗和提前预防,作者将主要检测方法进行了总结,希望能有助于全面准确地评估蜡样芽孢杆菌的风险,为主动监测和预警提供科学依据。 相似文献
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蜡样芽孢杆菌是一种可引起食物中毒的常见食源性细菌,属于革兰氏阳性的条件致病菌,广泛存在于土壤、空气、水及植物源、动物源加工的食品中。近年发现也能感染包括人在内的多种动物,是一种人兽共患性细菌,特别是能够引起人畜肠道疾病,导致腹泻型或呕吐型食物中毒。快速准确检测蜡样芽孢杆菌是控制其污染和感染后治疗的关键环节。作者对蜡样芽孢杆菌的检测方法进行了全面详细的总结,主要包括传统检测方法、普通PCR、多重PCR(mPCR)、实时荧光定量PCR(Real-time PCR)、叠氮溴化丙锭-定量PCR(PMA-qPCR)、微滴数字PCR技术(ddPCR)、环介导等温扩增(LAMP)及酶联免疫吸附测定(ELISA)。从传统方法到新兴技术,涉及传统检测技术、分子生物学检测和免疫学检测技术,作者主要总结了各方法的原理、检测范围,并对各方法的优缺点进行了比较。这些检测方法的灵敏度、精确度、样本要求等有所不同,可根据检测需要和条件限制进行选择。将分子生物学方法和免疫学等方法有效地结合起来,多角度多层次地对样品进行检测,可全面而准确地呈现检测结果。蜡样芽孢杆菌能产生多种毒素,这些毒素决定了其致病性,所以除了检测菌体外,还可以对毒素进行检测,有助于确定病原及其致病力。总的来说,蜡样芽孢杆菌对人畜的健康安全均构成了威胁,快速准确地检测能有效辅助治疗和提前预防,作者将主要检测方法进行了总结,希望能有助于全面准确地评估蜡样芽孢杆菌的风险,为主动监测和预警提供科学依据。 相似文献