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猪传染性胃肠炎病毒国内分离株S基因克隆及与国外分离株的同源性比较 总被引:1,自引:0,他引:1
用猪睾丸细胞增殖并扩增猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)国内分离株TH-98,根据基因库中已发表的TGEV S基因cDNA序列,利用Oligo软件设计并合成2对引物,进行逆转录聚合酶合酶链反应(RT-PCR),扩增出2.3kb和2.1kb2个片段,即Sa与Sb。将Sa与Sb先后插入到pUC18质粒载体上的EcoRⅠ和PstⅠ多克隆位点上,构建了重组质粒pUC-S,根据TGEV S基因位点和pUC18的物理图谱,用相应的限制性内切酶进行酶进行酶切及套式PCR方法鉴定,分析,证明克隆的pUC-S为TGEV S基因,同时对pUC-S进行序列测定分析,并与来自美国,英国和日本的5个毒株进行核苷酸及编码氨基酸同源性比较,证明了S基因的高度保守性。 相似文献
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抗囊虫药物对体外培养未成熟期猪囊尾蚴生化指标的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本实验首先从人工感染后30d患猪囊尾蚴病的猪分离未成熟期猪囊尾蚴,用PRMI1640完全培养液培养,分为4组,除1组作为对照组外,其余3组分别加入囊效0号(NX0),囊效1号(NX1),囊效2号(NX2)三种药物。置于培养箱中培养。通过监测能量代谢、糖代谢等不同代谢途径的酶及代谢物的变化。结果表明,药物通过抑制糖类物质代谢及能量代谢进而干扰其他代谢途径,从而杀灭虫体。实验中使用的三种药物对体外培养的未成熟期囊尾蚴均有效,而且NX1药效优于NX0、NX2。 相似文献
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在酿造酒工艺学教学实践的基础上,总结出6点教学经验,主要包括实物展示以提高兴趣,参观实习以加强感性认识,实际制作以理论结合实践,练习题的设置以巩固和加深理论知识并拓展创新意识,提高教师自身修养,以提高教学效果,先进教学手段的使用以提高教学效率,达到了良好的教学效果。 相似文献
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禽网状内皮组织增生症(Reticuloendotheliosis,RE)是禽类一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病.近年来,鸡群中REV流行比较严重;REV与马立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV)、鸡贫血病病毒((Chicken infectious anemia,CAV)和J亚群禽白血病病毒(Subgroup J Avian Leuko-sis Virus,ALV-J)等几种免疫抑制性病毒的混合感染也比较普遍.鉴于REV正越来越受到重视.本文就RE的诊断和综合防制作一综述. 相似文献
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中国工程木制材料开发大有前景 总被引:1,自引:0,他引:1
近几十年前,世界很多地区的林产工业依赖于优质天然林,生产大批量原木获得效益。对于很多林产品的生产国家,林业资源的可持续性保证了经济的发展。随着世界人口膨胀和生活水平的提高,人们对工程木制材料的需求也在持续上升。比如1998年美国消费的原木达到了前所未有的高度,约为5.05亿m^3。世界范围内对木材的需求在过去30年也翻了一番,约为35亿m^3。尽管整个世界在为林业的可持续发展做努力,供需之间的矛盾仍在不断恶化,到2050年估计世界对木材的需求会增至52亿m^3。 相似文献
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为了使猪圆环病毒2b型(PCV2b)Cap蛋白在猪圆环病毒病等疾病的诊断和防制方面取得更有效的应用,本试验将编码PCV2b Cap蛋白的ORF2基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,并构建pET-32a-ORF2重组质粒,重组质粒转化大肠杆菌BL21受体菌后,通过IPTG诱导表达重组蛋白,将重组蛋白用镍柱进行纯化并免疫大白兔,制备兔抗PCV2b Cap蛋白的多克隆抗体。利用ELISA、Western blotting、间接免疫荧光及病毒交叉反应等试验对制备的多克隆抗体进行生物学特性检测。ELISA检测结果显示,该抗体效价可达到1:216;Western blotting检测结果显示,该多克隆抗体可与PCV2b产生特异性的反应条带,说明其具有较好的反应活性;间接免疫荧光试验结果显示,该多克隆抗体能识别感染PK-15细胞中的PCV2b,说明该多克隆抗体具有鉴别诊断PCV2b的能力;病毒交叉试验结果显示,该多克隆抗体能与PCV2b反应,而不与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪轮状病毒(PRoV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)等猪源病毒发生交叉反应,表明该多克隆抗体具有高度特异性。本试验制备的抗PCV2b Cap蛋白多克隆抗体为PCV2b病原特性研究及该病的临床检测奠定基础。 相似文献
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利用PCR方法扩增乳源致病性金黄色葡萄球菌nEBPS全基因,将其定向克隆至原核表达载体pET30a(+)中,鉴定正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导获得了以可溶性表达的重组蛋白。通过NiNTAPurificationSystem纯化重组蛋白,纯化蛋白质量浓度为2.16g/L。纯化蛋白经免疫印迹检测显示重组蛋白能够被牛源金黄色葡萄球菌阳性血清识别,具有良好的反应性。将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,间接EI,1SA测定抗体效价为1:25600,凝集试验测定抗体效价为1:128。 相似文献