新型纳米β-TCP/明胶/鹿茸多肽复合材料对兔下颌骨缺损的修复

建立兔下颌骨缺损模型,观察纳米β-TCP/明胶/鹿茸多肤复合材料的修复效果,以期来研究复合材料的成骨效能.取80只实验用新西兰大白兔进行同期颌骨缺损造模,随机均分为材料1组(鹿茸多肽含量5 mg/g)、材料2组(鹿茸多肽含量20 mg/g)、材料3组(不舍鹿茸多肤)及对照组(无材料组).分别在2、4、8、12用对造模部位取材,每组每次取5只,做组织学及扫描电镜(SEM)分析.材料植入后4用即可见到明显的新骨生成,并且材料1组明显优于其他3组.材料3组也有少量的新骨生成,对照组新骨生成缓慢,缺损区内被脂肪组织、血管以及纤堆结组织所填埋,有少量的不连续的骨小梁生成.术后临床观察并无其他并发症,组织学观察骨缺损区内未见明显组织坏死和炎症细胞浸润.纳米β-TCP/明胶/鹿茸多肽复合材料对兔下颔骨缺损具有良好的修复效果.     

猫细小病毒的分离与鉴定

利用F81传代细胞从病死猫脾脏中分离获得1株病毒,该毒株可使培养细胞出现明显的细胞病变（CPE）。并对其进行形态学、理化学、人工感染试验和分子病毒学等鉴定,证明所分离的这株病毒为猫细小病毒。     

组织型纤溶酶原激活剂cDNA在BHK21细胞中的表达

将组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）基因ｃＤＮＡ经多次亚克隆插入到真核表达载体ｐＳＶＬ的ＳＶ４０启动子和ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子下游,构建了重组表达质粒ｐＳＶＬ－ｔＰＡ和ｐｃＤＮＡ３－ｔＰＡ。分别将这２种表达质粒以脂质体载体法转染ＢＨＫ２１细胞,ＥＬＩＳＡ检测结果表明,ｐＳＶＬ－ｔＰＡ和ｐｃＤＮＡ３－ｔＰＡ在哺乳动物细胞中能够表达,７２ｈ表达量分别是５２．８μｇ／Ｌ和７０．４μｇ／Ｌ。     

非洲猪瘟实时荧光RPA诊断方法建立及应用

[目的]非洲猪瘟(African swine fever,ASF)自2018年首次暴发于我国沈阳后,迅速扩散至全国,对我国养猪业造成了沉重打击.研究针对其病原非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)建立一种快速核酸检测技术,为及时发现、准确处理ASF疫情提供一种快速诊断方法.[方法]...     

狂犬病病毒糖蛋白转基因小鼠对该病毒形成免疫耐受

对带有绵羊ＭＴ启动子－狂犬病病毒糖蛋白基因的（ＭＴ－Ｒｇｐ）的ＴｇＮ（ｏＭＴ－Ｒｇｐ）２Ｌｇｅ、ＴｇＮ（ｏＭＴ－Ｒｇｐ）４Ｌｇｅ和ＴｇＮ（ｏＭＴ－Ｒｇｐ）６Ｌｇｅ３株转基因小鼠系（子代）进行了表达检测。ＥＬＩＳＡ结果表明，小鼠肝脏、肾脏中均有糖蛋白表达产物，以肝脏的表达量较高；对肝脏的免疫组化检测结果显示，糖蛋白分布在肝脏实质细胞，主要位于细胞膜上和胞浆内。对８只ＴｇＮ（ｏＭＴ－Ｒｇｐ）２Ｌｇｅ子代鼠一次接种灭活的狂犬病病毒８２０２株，接种前和接种后３周的血清抗体水平变化在转基因鼠和非转基因鼠之间有明显区别，非转基因鼠抗狂犬病病毒抗体水平明显升高，而转基因鼠抗体水平基本保持不变。经统计学分析，转基因鼠的抗体水平变化相差不显著，表明转基因小鼠对该病毒形成了部分免疫耐受性。     

DNA指纹图与生化指标分析对近交系小鼠遗传检测的比较

采用JL-02多位点探针对来自北京和西安地区的5个BALB/c群、2个BALB/c-nu/nu群、4个C57群、1个CBA/N群和1个DBA/2群近交系小鼠进行了DNA指纹图分析,并与常规生化标记分析法进行了比较.结果显示,DNA指纹图的图带教均为17～22条,具有良好的多态性.生化标记分析中Hbb位点显示异常的BALB/c及BALB/c-nu/nu小鼠与其同群体正常小鼠的DNA指纹图有较大差异,2个体之间的相似系数(F)及共有带率(X)均在0.8以下,完全相同DNA指纹图的概率(P)均在1.3×10-2以下;生化标记分析未见异常的群体内,DNA指纹图基本一致,P＞2.2×10-1.DNA指纹图显示,不同单位的同一品系间存在一定差异,其F及X均在0.8以下,P＜1.1×10-3.不同品系间DNA指纹图的F及X相差较大,均在0.4以下,P=2.7×10-10.BALB/c群与BALB/c-nu/nu群间DNA指纹图的F和X在0.65以下,P=3.8×10-6.同一动物的基因组DNA,经不同次实验所得出的DNA指纹图基本一致.2种方法比较表明,DNA指纹图在动物遗传检测中比生化标记分析有较大的优势,它不但能确切地反映生化标记分析显示的异常动物的遗传变化,而且还检出了生化标记分析未能检出的动物遗传变异,因此更加灵敏.DNA指纹图能反映出动物个体间、群体间及品系间的变异程度、亲缘关系及遗传距离,这是生化标记分析无法比拟的.     

牛BLG/hEPO和大鼠WAP/hEPO基因在家兔乳腺中的表达

将人红细胞生成素 (h EPO)基因组 DNA(g DNA)与 1.1kb牛 β-乳球蛋白 (BL G)基因的 5′端上游调控序列融合 ,构建了 p CMV- BL G- EPO- b GH poly A(p CBEA)乳腺定位表达载体。该载体与已构建的大鼠乳清酸蛋白 (WAP)基因 5′端上游调控序列和 h EPO融合基因 p WAP- EPO- WAP3′U TR(p WE3′)和 p CMV- WAP- EPO- b GH poly A (p CWEA )经脂质体包裹后 ,通过显微外科方法 ,经乳腺导管注入妊娠中后期家兔乳腺内 ,进行短暂表达。于家兔分娩后 1～ 2 5 d采奶 ,EL ISA检测乳汁中 EPO含量 ,3个载体均获得表达。表达水平从高到低依次为 p CWEA、p CBEA、p WE3′;表达量为 0 .116～ 0 .75 3μg/ L ,且表达一直持续整个泌乳期     

2号染色体牛微卫星标记与生产性能关系的研究

本研究选用草原红牛、利木赞与草原红牛杂交后代共计40头作为试验牛群体，运用SPSS软件之GLM分析了21个性状与2号染色体上的3个微卫星标记的关系。结果表明，BM2113等位基因C（142bp）对腿围、净肉重和净肉率等性状有正面影响；IDVGA46等位基因C（21lbp）对5个肌肉度评分性状肴甲、肩部、腰厚、大腿肌、臀部外形以及胴体重、屠宰率、净肉重和净肉率等屠宰肉用性状有负面影响；TGLA44等位基因E（221bp）对耆甲、腰厚、臀部外形等肌肉度评分性状和体重、胴体重以及净肉重等屠宰肉用性状有正面影响。     

水泡性口炎病毒诱导BHK-21细胞的凋亡

采用HE、Giemsa染色、透射电镜以及DNA琼脂糖凝胶电泳等研究了水泡性口炎病毒（VSV）诱导BHK-21细胞凋亡的过程。结果显示：VSV感染BHK-21细胞后,光镜下可见细胞圆缩,细胞器固缩、核仁消失、染色质凝聚和核碎裂、凋亡小体出现;电镜下观察到染色质聚集形成典型的新月形,胞浆中充满大量空泡,细胞核因染色质凝聚也发生了空泡化;1％的琼脂糖凝胶电泳出现180-200bp整倍数的DNA梯形条带。结果表明,VSV诱导BHK-21细胞凋亡是其致细胞病变的主要表现形式之一。     

PRRSV GP5与GP4蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究

[目的]实现PRRSV GP5与GP4蛋白在同一载体中表达各自编码的蛋白,发挥GP5蛋白在体液免疫中的优势和GP4蛋白在信号转导中的作用。[方法]利用RT-PCR扩增出GP5与GP4基因,克隆到pIRESneo载体的多克隆酶切位点及新霉素磷酸转移酶位点中,用XhoⅠ和NruⅠ双酶切含GP5和GP4基因的表达盒,将此表达盒克隆到犬2型腺病毒E3区缺失性载体pPolyⅡ-CAV-2-△E3中,以AsⅠc和PmeⅠ双酶切进行鉴定。[结果]将构建好的重组腺病毒免疫小鼠,可以诱导产生较强的体液免疫应答（ELISA抗体和中和抗体）。[结论]该重组腺病毒具有较好的免疫原性,可为研制有效的亚单位疫苗奠定基础。