猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5和M基因重组腺病毒的构建及表达

为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组腺病毒活载体疫苗,本研究将PRRSV GP5和M基因串联表达盒定向克隆至穿梭质粒pacAd5CMVK-NpA多克隆位点处,获得重组穿梭质粒pacAd5CMVK-NpA-GP5-M,与骨架质粒pacAd5 9.2-100共转染293AD细胞,包装出含有GP5和M基因的重组腺病毒rAd5-GP5-M。应用PCR技术、间接免疫荧光、Western blot分析,结果表明,GP5和M基因已经被成功整合到了腺病毒基因组上,且GP5和M蛋白在293AD细胞上均得到了表达;滴度测定表明,该重组腺病毒rAd5v-GP5-M的TCID50为10-6.5/mL;连续传代试验表明该重组腺病毒可在细胞内稳定繁殖,有效地转录并表达GP5和M蛋白,具有较高的遗传稳定性。该研究为PRRSV重组腺病毒疫苗的研制打下了基础。     

腺病毒载体狂犬病疫苗研究进展

狂犬病是一种古老的人兽共患传染病。世界上已有部分国家和地区成功地消灭了狂犬病。在我国,每年有约3 000人死于狂犬病。腺病毒作为载体的优点包括高效的入核机制、优良的转染性、较低的病原性、较高的基因表达量及清楚的基因背景。目前,腺病毒已广泛应用于基础研究、基因治疗和疫苗研发。20世纪末,以腺病毒为载体的表达狂犬病病毒糖蛋白的疫苗就已诞生,一直发展至今。以腺病毒载体狂犬病疫苗作为口服疫苗,可望在控制和消除狂犬病中发挥着巨大的作用。     

C57BL/6J小鼠亚慢性镉中毒模型的建立

为了建立小鼠亚慢性镉中毒模型,本研究将20只C57BL/6J雄性小鼠随机分为4个剂量组和溶剂对照组,每组隔天分别腹腔注射含0.25、0.5、1和2 mg/kg剂量的氯化镉溶液和等量去离子水(溶剂),共染毒4周,观察不同剂量的镉离子对雄性小鼠肝脏、肾脏、睾丸的损伤情况.结果各处理组小鼠体质量增长要比对照组慢,脏器系数与对照组相比也有显著差异,处理组小鼠肝脏、肾脏、睾丸中镉含量显著高于对照组.病理组织切片结果表明,各处理组中小鼠的肝脏、肾脏、睾丸组织均出现不同程度的损伤.氯化镉可以显著地抑制小鼠体质量增长,并对小鼠的脏器系数产生影响,腹腔注射后在肝脏、肾脏、睾丸组织中产生蓄积,并对其造成一定损伤.隔天腹腔注射2 mg/kg剂量的氯化镉,4周可建立较理想的小鼠镉中毒模型.     

用去透明带仓鼠卵穿透试验检测牛冷冻精子的受精能力

研究了用去透明带仓鼠卵穿透试验检测牛冷冻精子的受精能力。对36头西门塔尔、23头夏洛来和12头利木赞牛冷冻精子的实验结果表明：三个品种的牛冻精均能穿入去透明带仓鼠卵，并形成发育良好的雄原核。穿透率在70％－80％左右，有原核卵百分率在30％左右。去透明带 鼠卵穿透试验是检测牛冻精受精能力的有效方法。     

非洲猪瘟病毒JX21毒株全基因组序列分析和生物学特性研究

为了明确非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)JX21毒株的基因组变化及其生物学特性，试验采用PCR检测、病毒分离培养、病毒全基因组测序、红细胞吸附试验及动物感染试验等对从江西省某菜市场采样分离到的ASFV自然变异毒株JX21进行研究。结果表明：与ASFV SY18毒株序列比较，JX21毒株全基因组序列中出现110处碱基差异和8个基因的自然缺失。其中EP402R基因(编码CD2v蛋白)第395位碱基后插入1个碱基“A”,导致翻译提前终止，JX21毒株丧失了红细胞吸附特性。试验组5头健康家猪感染JX21毒株后，28 d内全部死亡，期间均出现较高水平的病毒血症，剖检后均出现ASFV阳性组织，病程较长。说明分离的JX21毒株属于自然变异株，基因组中存在多处变异，其中EP402R基因变异可引起病毒失去红细胞吸附特性，其毒力未见明显减弱，仍为100%致死，但病程延长。