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201.
202.
采用PCR方法扩增PPV6保守区域基因252bp,将其克隆到pClon007载体,构建重组质粒作为标准阳性质粒。以质粒模板建立PPV6的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法,并进行敏感性、特异性和重复性等验证。结果表明,重组质粒特异性好;建立的real-time PCR方法Ct值与标准品模板在8.80×109~8.80×101 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.993,斜率为-4.320。该方法检测灵敏度可达8.80×101 copies/μL。该方法对JEV、PRV、PRRSV、PCV2、FMDV等猪常见病原检测均无特异性扩增;对临床样品的检测结果表明,所建立的荧光定量PCR阳性检测率为40.63%。本试验成功建立了PPV6SYBR Green I real-time PCR检测方法,可实现对PPV6快速灵敏的诊断。 相似文献
203.
应用反向遗传技术对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)LaSota株感染性克隆PBRN-FL质粒进行操作,构建插入欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)ORF5基因的重组质粒LaSota-ORF5并进行病毒拯救及鉴定。依据GenBank所发表的欧洲型PRRSV LV株ORF5序列,设计引物扩增ORF5片段,通过PBRN-FL质粒上P和M基因间的PmeⅠ酶切位点插入目的片段,构建重组质粒LaSota-ORF5。采用磷酸钙转染法将重组质粒和PCI-NP、PCI-P、PCI-L等3种辅助质粒共转染BSR-T7/5/细胞拯救病毒并对其分别进行RT-PCR、间接免疫荧光(IFA)和Western blot(WB)试验鉴定。结果显示:拯救病毒的RT-PCR产物测序结果正确,IFA出现绿色荧光,WB试验条带大小符合预期,证明GP5蛋白有效表达。结果表明:成功构建并拯救得到重组病毒rLaSota-GP5,为制备表达PRRSV GP5蛋白的重组NDV疫苗奠定基础。 相似文献
204.
褪黑素诱导小豆抗锈病机理的初步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
为明确外源褪黑素诱导小豆抗锈性的作用及机理,以感病小豆品种‘宝清红’为材料,采用叶面喷施不同浓度褪黑素激发处理小豆真叶,而后对真叶挑战接种锈菌夏孢子,结果表明,低浓度(11.61 mg/L)褪黑素可显著提升小豆对锈病的抗性。夏孢子萌发试验表明,褪黑素对夏孢子萌发及芽管生长无显著抑制作用,表明褪黑素无抑菌活性。进一步的基因表达分析发现,与对照相比,褪黑素激发诱导了水杨酸(SA)通路关键基因NPR1于接种后24 h显著上调表达,且病程相关蛋白PR1、几丁质酶(CHI)、β-1,3-葡聚糖酶(GLU)及PR5均于接种后24~120 h被显著诱导表达,说明褪黑素可能通过诱导NPR1表达,进而激活下游PR蛋白的高水平应答,使感锈病小豆品种获得对锈病的抗性。 相似文献
205.
为探究不同退耕年限刺槐林草本层物种多样性与地上生物量的动态变化特征及其主要影响因子,采用时空替代法,以子长市不同退耕年限(5、20、40 a)刺槐林为研究对象,不同退耕年限(5、20、40 a)撂荒地为对照样地,分析该区域刺槐林草本层的物种多样性和地上生物量变化特征及其与土壤因子的相互关系。结果表明:不同退耕年限刺槐林和撂荒地的草本层物种多样性和地上生物量均呈现出较大差异,物种多样性整体呈现出优势多数种属于少数科,弱势少数种属于多数科的变化特征,以耐旱、耐贫瘠的菊科、禾本科和豆科植物(铁杆蒿、长芒草、达乌里胡枝子等)为优势种;撂荒地和刺槐林的地上生物量整体上随着退耕年限的增加而持续增加,刺槐林草本层比撂荒地草本层具有更大的地上生产力。冗余分析表明:刺槐林草本层的物种多样性指数与地上生物量呈负相关关系(P<0.05);土壤全钾、全磷、粉粒和黏粒含量与草本层物种多样性呈正相关关系(P<0.05);土壤容重、土壤水分与草本层地上生物量呈正相关关系(P<0.05),说明它们是影响草本层物种多样性和地上生物量变化的主导因子。 相似文献
206.
文章旨在探究添加中草药对发酵全混合日粮(TMR)化学成分、微生物组成及发酵品质的影响。将苜蓿干草、玉米粉、豆浆渣、豆粕、预混料、食盐按照干物质(DM)36∶25.5∶21∶12∶5∶0.5的比例混合调制TMR,分为4组,分别加入2%无菌水、2%当归、2%黄芩、2%茯苓,室温条件下厌氧发酵,并于发酵7、14、28、56 d开封,测定化学成分、微生物组成及发酵品质。结果表明,发酵56 d后,所有组别的TMR发酵品质良好,具有较高的乳酸(LA)含量(7.31%DM~8.30%DM)、较低的p H(4.56~4.63)和氨态氮(NH3-N)含量(3.13%TN~3.75%TN)。随着发酵时间的延长,所有组别的p H和好氧细菌(AB)数量极显著降低(P<0.01)、乳酸(LA)含量极显著升高(P<0.01);DM和可溶性碳水化合物(WSC)含量极显著降低(P<0.01)。添加中草药能够显著降低TMR发酵56 d后的p H(P<0.05),提高LA含量(P<0.05)。其中,当归组发酵56 d后LA含量最高,p H和NH3-N含量最低。综上所述,添加中草药可以有效抑制... 相似文献
207.
笔者通过对西藏日喀则市运营较好、带动能力较强的农畜产品加工企业进行调研,较为全面地分析了该市农畜产品加工业存在的着问题及技术瓶颈,并提出了促进该地区高原特色农畜产品加工业的建议与对策。 相似文献
208.
209.
涂料在长期使用过程中会因环境因子、物理损伤或其他因素导致涂层内部产生微裂纹,降低其保护性能,从而影响使用期限、增加经济成本。为了修复裂纹或损伤,应用于涂料中可进行自修复的微胶囊技术成为了现在热门的研究方向。笔者首先根据囊芯材料不同,归纳了几种常见的自修复体系,并对各体系目前的研究进展、微胶囊制备原理以及未来发展等方面进行了总结。微胶囊型自修复体系主要包括双环戊二烯-Grubbs固化剂体系、环氧树脂芯材微胶囊自修复体系、异氰酸酯微胶囊自修复体系、干性油微胶囊自修复体系、极性溶剂芯材自修复体系、硅氧烷自修复体系和硅油型自修复体系等。现阶段自修复涂料的研究主要针对制备过程中的工艺因素优化,部分自修复体系在涂料领域实现广泛应用还比较困难。对制备微胶囊的常见方法进行了介绍,主要包括界面聚合法、原位聚合法、溶剂挥发法,需根据微胶囊应用领域、性能要求、成本和生产规模等因素共同决定制备方法。论述了微胶囊自修复技术在木器涂料、颜料和纺织印染,以及建筑、航空航天和船舶涂料中的应用,发现微胶囊技术研究应用越来越趋向专业化。最后,对微胶囊技术的发展趋势进行了展望,如优化现有自修复系统、改性微胶囊提升其修复作用等。 相似文献
210.
本市一养鸡专业户,于1993年10月26日从某农场购进AA苗鸡2500只,在自家房里平养。20日龄时开始陆续发病,死亡数逐日增加,到12月1日止,共死亡500多只,死亡率为20%左右。我们对发病鸡群进行了系列诊断.确诊为肉鸡腹水综合症。采取了相应的防制措施,收到了较好的效果。报告如下:一、发病经过:本市10月下旬,天气转冷,户主对其鸡群采取保暖措施,地面垫上保温糠草,房顶用塑料布封闭.过道生煤炉,门窗紧闭,很少通风换气。到11月中旬,鸡群陆续发病死亡,并逐日增多。到12月1日.已死亡500多只,死亡率达20%左右,发病率达30~40… 相似文献