鸡痘病毒ORF073基因克隆及原核表达

根据已经发表的鸡痘病毒(FPV)美国致病株的ORF073基因序列,设计1对引物,分别以282E4FPV、LP株FPV、102E6FPV为模板,扩增出目的片段,将其克隆到pGEM-TEasy载体中,经酶切鉴定证实,并进行序列测定。目的片段包含了大小为522 bp的ORF073基因,与GenBank上的AF198100(FPVUS)和AJ581527(FP9)序列进行序列比较分析表明:3种病毒株的ORF073基因与鸡痘病毒美国致病株(FPVUS)和英国弱毒株(FP9)完全一致。克隆的ORF073基因与原核表达载体pET-28a构建重组表达载体,经IPTG诱导,在BL21(DE3)细菌中表达了分子质量约32 ku的蛋白。     

双酶法分解怀山药的工艺研究

[目的]研究高温α-淀粉酶和糖化酶对怀山药的分解效果。[方法]利用高温α-淀粉酶和糖化酶对怀山药分步进行水解糖化以减小分散颗粒直径和沉淀率,在控制一定温度和时间的条件下,采用正交设计和因素分析来确定最适酶解条件,从而提高山药汁的可溶性固形物百分含量,降低其沉淀率和色泽。[结果]试验表明,双酶法分解怀山药的最适酶解条件为:高温α-淀粉酶添加量0.4%(20 000U),山药浓度10%,酶解温度85℃,时间2 h条件下酶解效果最佳;糖化酶添加量0.4%(10 000 U),糖化温度55℃,时间3 h,pH 5.0。[结论]研究可为怀山药的深度开发提供一定的理论依据。     

饲喂粪肠球菌对断奶仔猪粪便与猪舍气溶胶中细菌群落结构的影响

为了研究日粮添加粪肠球菌对猪粪便和猪舍空气中细菌群落结构特征的影响,选取254头断奶仔猪,随机分成2组,其中对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加粪肠球菌。饲喂38 d后,采集粪便和猪舍空气样品,采用Illumina高通量测序技术分析粪便和猪舍空气的细菌群落结构特征。结果表明:试验组与对照组猪粪便及猪舍空气中细菌多样性无显著性差异(P0.05);厚壁菌门(Firmicutes)在所有粪便和空气样品中相对丰度最高,介于65.45%～81.10%之间,但试验组和对照组中厚壁菌门相对丰度没有显著性差异(P0.05);试验组猪粪便和猪舍空气中蓝细菌门(Cyanobacteria)相对丰度显著高于对照组(P0.05),变形菌门(Proteobacteria)相对丰度显著低于对照组(P0.05)。饲喂粪肠球菌可使粪便和猪舍空气中条件致病菌不动杆菌属(Acinetobacter)和埃希氏菌属-志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)相对丰度显著降低(P0.05),对于养殖对象和饲养工人健康以及周边生态环境都具有有益作用。     

12种中药有效成分对3株水产致病菌体外抑菌试验

选择12种有抑菌作用的中药的有效成分,采用平板挖洞法对3种水产常见致病菌作药物敏感试验,然后采用二倍稀释法测定12种中药有效成分对3种致病菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明：12种中药有效成分对3株细菌都有不同程度的抑制作用,其中没食子酸、槲皮素、黄岑苷、大黄酸、盐酸小檗碱、大黄素甲醚对温和气单胞菌抑制效果最好, 没食子酸、槲皮素对温和气单胞菌MIC,MBC最小,MIC为0.03125 mg/ml,MBC为0.0625 mg/ml;大黄素甲醚、没食子酸、甘草酸、槲皮素对嗜水气单胞菌抑制效果最好, 大黄素甲醚、没食子酸、甘草酸对嗜水气单胞菌MIC,MBC最小,MIC为0.03125 mg/ml,MBC为0.0625 mg/ml;大黄素甲醚、甘草酸、没食子酸、盐酸小檗碱对变形杆菌抑制效果为最好,没食子酸,大黄素甲醚、甘草酸对变形杆菌MIC,MBC均最小,MIC为0.03125 mg/ml,MBC为0.0625 mg/ml。     

苹果渣中多酚物质的提取技术研究

研究了用乙醇为溶剂提取苹果渣中多酚物质的最佳工艺,考察了乙醇提取时乙醇浓度、料液比、提取时间和提取温度对提取率的影响;正交试验结果表明,最佳浸提条件为乙醇浓度60%,提取温度60℃,提取时间4 h,料液比1∶12;此条件下提取量为1 072.615 mg/kg。     

利用野猪改良台系杜洛克猪生产性能的研究

台系杜洛克猪具有良好生产性能,已成为浙江省猪三元杂交的主要终端父本品种,但在长期生产实践中也暴露一些不足之处,影响它的推广利用.我们拟导入野猪血液,来克服台系杜洛克猪的缺点以进一步提高它的生产性能,使它在浙江省乃至全国的养猪生产中发挥更大作用.本研究是全面测定导入12.5%野猪血液的台系杜洛克猪的生产性能和一些重要生物学特性,了解它是否能作为选育台系杜洛克新品系的基础.通过以肥育性能对比试验为核心的6个方面35个项目的测定,基本明确:导入12.5%野猪血液的台系杜洛克猪保持了原台系杜洛克猪的体型结构和产仔数水平(头胎9.4头/胎),继承了台系杜洛克猪的生长快(日增重699g)、胴体瘦肉率高(65.99%)等优点,吸取了野猪的饲料利用率高(全程料重比2.47:1)、屠宰率高(72.6%),肌纤维细(56.85 μm)、肌纤维间隙大(21.08 μm)、肌肉失水率低(17.31%)、肌肉营养成分含量高(粗蛋白23.3%,成人7种必需氨基酸总量8.35%)、抗病力强(球蛋白含量39.69/L,淋巴细胞数量11亿个/L)等特点,使台系杜洛克的性能得到进一步完善和提高,作为一个较好的杂交组合,可作为选育台系杜洛克新品系的基础.此外,我们在研究中还发现野猪在杂交改良中,在肉质性状和抗病力性状上是以中间遗传方式传递其遗传特性,杜洛克猪的只要在肌纤维未"老化"前的适当年龄屠宰利用,也可使其食用品质处于良好状态.纠正过去认为杜洛克猪肉粗老不好吃的片面观念,这对食品行业很有意义.     

预防猪瘟歌诀

预防猪瘟歌诀 猪瘟又叫烂肠瘟, 畜禽一类传染病。 不同年龄和品种, 一年四季均发生。 死亡率高威胁大, 影响养猪积极性。 病程长短虽不一, 发病表现一致性。 最常见者急性型, 病期长达一星期。 主要症状体温高, 稽留几日热不退。 精神不振食欲差, 喜卧草窝喝脏水。 结膜发炎脓眼屎, 便秘下痢常交替。 干硬粪便带黏液, 拉稀粪便臭难闻。 鼻端耳后胸腹下, 四肢内侧和会阴。 皮肤充血变紫绀, 出血小点星状密。 股沟淋巴结肿大, 公猪包皮积尿液。 极度衰弱昏迷死, 剖检尸体看…     

银木的组织培养及植株再生技术研究

以银木2年生小苗的茎段为外植体,建立银木的组织培养和再生体系。研究不同种类、不同浓度生长调节剂、光照条件等因素对银木组培各阶段产生的影响。结果表明：适合嫩茎段腋芽初诱导与生长对培养基的选择不甚严格,在基本培养基MS中即可诱导;增殖培养基为MS+ BA 0.5 mg/L+ NAA 0~ 0.05 mg/L,增殖系数可达3.5以上;生根的最佳培养基为1/2MS+ NAA 0.1 mg/L + IBA 0.2 mg/L,生根率达98%以上。银木的高效快繁体系建立为银木的开发利用和工厂化育苗提供可靠技术依据。     

新城疫病毒ClassⅠ强毒株磷蛋白在细胞中的表达与定位

根据Class Ⅰ新城疫病毒分离株9a5b编码序列设计特异性引物扩增P蛋白基因,原核表达后利用纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,经二次亚克隆后筛选到4株针对P蛋白的单克隆抗体,利用所得单抗进行P蛋白在细胞内定位分析,NDV 9a5b株按5 M.O.I感染量接种DF1单层细胞,当PI=4 h时,P蛋白呈点状弥散分布于细胞浆内;PI=6~8 h时,P蛋白聚集于细胞核周围;PI=12 h时,P蛋白呈单极化聚集于细胞核一侧;而PI=16 h后开始形成合胞体,P蛋白在单个细胞中仍呈现单极分布;当PI=48 h时,细胞核已发生碎裂,荧光强度有所减弱。本研究为深入开展P蛋白在病毒增殖以及细胞周期中的作用机制研究奠定了基础。