超声波辅助提取苹果籽油工艺研究

通过二次回归正交旋转组合试验探讨了超声波辅助提取苹果籽油的最佳工艺条件，研究了液料比（石油醚体积与苹果籽质量之比）、提取时间、提取温度和超声波频率对苹果籽油提取率的影响。结果表明，当液料比为8，提取时间为35min，提取温度为35℃，超声波频率为60kHz时，苹果籽油提取率最高，可达到23.94％。通过与索氏提取法对比，证明超声波是一种可靠、高效的提取苹果籽油的方法。     

新城疫病毒ClassⅠ强毒株磷蛋白在细胞中的表达与定位

根据Class Ⅰ新城疫病毒分离株9a5b编码序列设计特异性引物扩增P蛋白基因,原核表达后利用纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,经二次亚克隆后筛选到4株针对P蛋白的单克隆抗体,利用所得单抗进行P蛋白在细胞内定位分析,NDV 9a5b株按5 M.O.I感染量接种DF1单层细胞,当PI=4 h时,P蛋白呈点状弥散分布于细胞浆内;PI=6~8 h时,P蛋白聚集于细胞核周围;PI=12 h时,P蛋白呈单极化聚集于细胞核一侧;而PI=16 h后开始形成合胞体,P蛋白在单个细胞中仍呈现单极分布;当PI=48 h时,细胞核已发生碎裂,荧光强度有所减弱。本研究为深入开展P蛋白在病毒增殖以及细胞周期中的作用机制研究奠定了基础。     

青枣滚动划痕原理与计算

本文概述了金丝蜜枣加工中青枣划痕工艺存在的问题,提出了青枣滚动划痕原理。解决了青枣划痕时要求深浅一致、宽度均匀、不重划、不漏划和连续加工等问题,又使同一划痕器对枣的直径适应范围可以从最小到最大,同时建立了青枣滚动划痕的数学模型及滚动划痕器的设计计算方法。     

关于推进江苏水稻机插侧深施肥的思考

阐述了江苏省水稻施肥现状,分析了水稻机插侧深施肥的技术要点和优越性,并提出对策建议,以期为江苏水稻生产绿色发展和化肥减量增效提供参考。     

规模化畜禽养殖场粪便中多重耐药菌分离鉴定及其耐药特征

为了解禽畜粪便中多重耐药菌的污染特征,本研究对鸡粪、牛粪、猪粪和有机肥这4种不同样品中多重耐药菌进行了计数分析,并对不同来源的多重耐药菌株进行了分离和纯化,进一步开展了基于16S rDNA序列比对的分子生物学鉴定以确定其种属地位,以及基于药敏试验的耐药性特征分析。结果表明:不同养殖动物粪便中四环素、恩诺沙星、磺胺甲恶唑和泰乐菌素4种抗生素多重耐药菌的绝对数量和相对数量排序均为鸡粪>猪粪>牛粪,粪源有机肥中可培养的多重耐药菌的绝对数量和相对数量在堆肥后均有所下降。通过对耐药菌株鉴定和分类学分析,发现禽畜粪便中多耐药菌的菌门集中分布在Proteobacteria、Firmicutes和Actinobacteria,多重耐药菌的优势菌属为Escherichia、Corynebacterium、Kurthia;而有机肥样品中多重耐药菌的优势菌属为Staphylococcus、Glutamicibacter。菌株的药敏试验表明,3类动物粪污中的多重耐药菌都对红霉素、四环素有着较高的耐药率,均高于80%,而对阿米卡星这种抗生素表现出较好的敏感性,其耐药率低于30%。通过对Ⅰ、Ⅱ类整合子基因盒的扩增,发现PCR产物的大小从0.8 kb到1.8 kb不等,基因盒ad A2、dfr A17、dfr A1及sat2在养殖场粪污中检出率均较高。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及中药药敏试验

从数例疑似副猪嗜血杆菌病猪的肺脏和心包积液中分离到3株革兰氏阴性细小杆菌,经涂片镜检、生化试验和PCR鉴定,确定分离的3株菌为副猪嗜血杆菌.中药药敏试验结果表明,副猪嗜血杆菌对金银花及其组成的复方敏感,且复方作用效果优于单方.     

鸡TIGAR基因真核表达质粒的构建及其抗凋亡功能评价

【背景】 TP53诱导的糖酵解和凋亡调节因子（TP53-induced glycolysis and apoptosis regulator,TIGAR）是p53下游的靶基因,具有调节糖酵解水平和去除活性氧（Reactive oxygen species,ROS）并降低由活性氧诱发的细胞凋亡水平。【目的】 构建鸡源TIGAR基因的真核表达质粒,并检测TIGAR基因在DF1细胞中的抗凋亡作用,为建立稳定表达鸡TIGAR基因的细胞系做准备。【方法】根据GenBank（登录号：XM_417232.6）中预测基因设计引物,利用RT-PCR的方法从SPF鸡脾脏中扩增鸡TIGAR基因,将扩增产物克隆至载体（Flag-CMV14）后送公司测序验证;随后构建进化树对鸡TIGAR基因与其他哺乳动物及水生动物的TIGAR基因进行同源性分析。将重组质粒（Flag-TIGAR）转染入DF1细胞24 h后,使用新城疫病毒诱导细胞凋亡,利用Western Blot检测重组质粒表达情况以及Poly ADP-Ribose Polymerase（PARP）裂解情况。此外还将重组质粒（Flag-TIGAR）转染入DF1细胞,并于收样前2 h使用Staurosporine刺激细胞发生凋亡,分别在转染后24、48 h收集样品,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。【结果】 RT-PCR扩增TIGAR基因,在843 bp处出现目的条带与预测相符,构建的TIGAR真核表达质粒（Flag-TIGAR）经测序,结果显示其序列与GenBank上预测的基本一致。Western Blot结果显示在30 h、36 h收集的样品中PARP均被裂解且转染重组质粒（Flag-TIGAR）的实验组与未转染质粒（MOCK）组或转染空载体（Flag-CMV14）组的样品相比,裂解的PARP表达量明显降低,且差异极显著（P<0.01）。流式结果显示：24 h 检测转染Flag-CMV14后细胞总凋亡率为11%（早期凋亡7.8%,晚期凋亡3.2%）,而转染Flag-TIGAR后细胞总凋亡率仅为4%（早期凋亡3.7%,晚期凋亡0.3%）,转染Flag-CMV14的早期凋亡率和晚期凋亡率均高于转染Flag-TIGAR组,且差异显著（P<0.05）。48 h转染Flag-CMV14后细胞总凋亡率为20.3%（早期凋亡14.3%,晚期凋亡6.0%）,而转染Flag-TIGAR后细胞总凋亡率为6.4%（早期凋亡4.8%,晚期凋亡1.6%）,转染Flag-CMV14组的细胞早期凋亡和晚期凋亡率均高于转染Flag-TIGAR的组,且差异极显著（P<0.01）。【结论】成功扩增出鸡TIGAR基因,并构建了其真核表达质粒,通过Western Blot和流式实验均证实过表达TIGAR后可降低细胞的凋亡程度并有利于细胞存活。     

利用野猪改良台系杜洛克猪生产性能的研究

台系杜洛克猪具有良好生产性能,已成为浙江省猪三元杂交的主要终端父本品种,但在长期生产实践中也暴露一些不足之处,影响它的推广利用.我们拟导入野猪血液,来克服台系杜洛克猪的缺点以进一步提高它的生产性能,使它在浙江省乃至全国的养猪生产中发挥更大作用.本研究是全面测定导入12.5%野猪血液的台系杜洛克猪的生产性能和一些重要生物学特性,了解它是否能作为选育台系杜洛克新品系的基础.通过以肥育性能对比试验为核心的6个方面35个项目的测定,基本明确:导入12.5%野猪血液的台系杜洛克猪保持了原台系杜洛克猪的体型结构和产仔数水平(头胎9.4头/胎),继承了台系杜洛克猪的生长快(日增重699g)、胴体瘦肉率高(65.99%)等优点,吸取了野猪的饲料利用率高(全程料重比2.47:1)、屠宰率高(72.6%),肌纤维细(56.85 μm)、肌纤维间隙大(21.08 μm)、肌肉失水率低(17.31%)、肌肉营养成分含量高(粗蛋白23.3%,成人7种必需氨基酸总量8.35%)、抗病力强(球蛋白含量39.69/L,淋巴细胞数量11亿个/L)等特点,使台系杜洛克的性能得到进一步完善和提高,作为一个较好的杂交组合,可作为选育台系杜洛克新品系的基础.此外,我们在研究中还发现野猪在杂交改良中,在肉质性状和抗病力性状上是以中间遗传方式传递其遗传特性,杜洛克猪的只要在肌纤维未"老化"前的适当年龄屠宰利用,也可使其食用品质处于良好状态.纠正过去认为杜洛克猪肉粗老不好吃的片面观念,这对食品行业很有意义.     

翻转课堂教学模式研究--以《非营利组织管理》课程教学为例

翻转课堂是目前教育领域中新生的一种教育教学模式,能够推动教育教学的有效发展,推动教育的改革和完善。与其他模式相比,其优势在于整合教育资源,提高教学质量,为师生带来良好的课堂体验。研究发现,《非营利组织管理》课程在授课过程中存在学生注意力分散、学习主动性不足等问题,对出现的问题及原因进行了深入分析。希望利用现代电子化教学来提高教学质量。