猪附红细胞体实验动物模型的建立

为建立一种合适的猪附红细胞体病动物模型，利用摘除脾和／或注射地塞米松的昆明小白鼠，以腹腔注射方式人工感染猪附红细胞体，通过血液涂片镜检、PCR检测、临床症状观察及病理剖检对感染情况进行了鉴定。结果显示，猪附红细胞体能够经腹腔注射感染昆明小白鼠，且感染鼠表现出与猪附红细胞体病相似的临床症状。结果表明，猪附红细胞体实验动物模型已成功建立，并证实啮齿类动物在附红细胞体的传播过程中发挥着重耍作用。     

牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因的克隆与原核表达

构建牛瑟氏泰勒虫P23基因片段原核重组表达质粒,表达重组蛋白。采用PCR方法扩增牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因,将扩增产物与pMD18-T-Simple载体连接,测序,验证扩增产物。将P23基因片段克隆到载体pGEX-4T-3上,经酶切分析、PCR鉴定后,IPTG诱导表达,最后用SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定表达产物。结果表明克隆的P23基因片段为684 bp,重组质粒pGEX-4T-3/P23构建成功;SDS-PAGE显示目的蛋白相对分子质量约为58 ku;Western blotting分析结果显示,与牛瑟氏泰勒虫阳性血清发生反应,而与牛瑟氏泰勒虫阴性血清无反应,表明牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白具有良好的抗原性和特异性,提示可以利用融合蛋白来建立检测抗体的间接ELISA诊断方法。