表达禽流感HA和NP双基因重组禽痘病毒的免疫保护性

将分别来自禽流感病毒A／Goose／Guangdong／3／96(H5N1)毒株的HA基因和A／Goose／Guangdong／1／96(H5N1)NP基因重组到禽痘病毒基因组中，获得了能同时高效表达这两种蛋白的重组禽痘病毒(rFPV—HA—NP)。将rFPV—HA—NP经翅膀刺种途径接种8周龄SPF鸡，并设亲本禽痘病毒免疫和非免疫对照组。免疫后4周分别用10LD50的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A／Goose／Guangdong／1／96(H5N1)和A／FPV／Rostock／34(H7N1)毒株进行攻击。结果重组禽痘病毒rFPV—HA—NP免疫鸡群后能够诱导产生高水平的特异性抗体，可完全抵抗H5N1毒株的致死性攻击，并可有效阻止H7N1病毒攻击后病毒在泄殖腔的排出。而禽痘病毒免疫组和非免疫对照组在攻毒后全部发病并死亡。结果表明NP在与HA共同表达时，在诱导交叉保护性方面有一定的免疫增强功能。     

H5亚型AIV HA基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达

应用DNAStar软件,参照GenBank中注册的AIV H5亚型毒株HA基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR方法成功地扩增出带双酶切位点的H5亚型AIV的HA基因,通过BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切位点将H5 HA基因插入转移质粒载体pFastBacHTa中,获得重组转移载体pFastBacHTa-H5HA并将其转化DH10Bac细胞,与Bacmid发生位点特异性转座作用,得到重组穿梭载体Bacmid-H5HA,再将其转染昆虫细胞High Five,PCR鉴定证实该基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下游,经SDS-PAGE和Western blotting检测,HA基因在High Five细胞中得到了表达,表达产物大小约为67 ku,而且具有特异的免疫反应性.     

春风和煦日扬帆正当时执业兽医制度呼之欲出——访农业部全国畜牧兽医总站于康震站长

引言：2001年中国加入WTO，我国兽医体制面临与国际接轨；2001年后北京、上海、山东、辽宁等地相继开始兽医体制改革实践探索；2004年农业部兽医局成立，正式实行官方兽医制度，我国兽医体制改革步伐加速。执业兽医制度是国家兽医制度的基石之一、国家动物防疫体系的核心组成部分。建立执业兽医制度也是我国兽医卫生制度与国际接轨的需要。该制度的实施不仅有利于增强我国畜产品国际竞争力，而且对形成兽医行业的良性循环将起到积极的作用，执业兽医的整体水平和社会地位将会越来越高。执业兽医制度与官方兽医制度是一对孪生姊妹，官方兽医制度已经迈出坚实的一步，执业兽医制度呼之欲出。怀着对执业兽医制度的热切期盼，本刊记者(以下简称：记)近日采访了全国畜牧兽医总站于康震站长(以下简称：于)，请他为我们揭开执业兽医制度的神秘面纱。     

改革创新通力合作推进兽医行业健康发展

我国兽医职业资格制度已经推行了五年,中国兽医协会成立也即将满五个年头,今年又是深入推进政府机构改革和职能转变重要的一年,及时总结回顾五年来我国兽医行业发展取得的重要成就和历程,适应经济社会转型发展的新形势新需求,坚持改革创新,统筹各方力量,对加快推进兽医行业健康发展无疑具有重要的现实意义。     

狂犬病街毒的分离与鉴定

本课题组自2004年开始动物狂犬病灭活疫苗(FLury LEP株)的研制,在对疫苗进行评价的过程中,对一份来自广西的狂犬病病犬脑组织进行了鉴定,旨在为疫苗的本动物攻毒试验提供适宜的攻击毒株,并为我国狂犬病分子流行病学研究提供依据.鉴定结果如下.     

猪传染性胃肠炎病毒实验室诊断研究进展

猪传染性胃肠炎(TGE)是一种以严重腹泻、呕吐和脱水为临床特征的高度接触性传染病，属于国际兽疫局(OIE)法典中B类疫病中必检的猪传染病。该病的病原TGEV是有囊膜的正链RNA冠状病毒，与SARS病毒同属一个病毒属。检测TGEV的方法主要有病毒分离、中和试验、免疫荧光抗体试验、酶联免疫吸附试验和电镜技术等，这些方法对于检     

绿色荧光蛋白基因真核表达载体的构建与表达检测

拟构建绿色荧光蛋白（ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ, ＧＦＰ）基因的真核表达载体 ｐｃＤＮＡ_３ＧＦＰ,并观察其在 ＭＤＣＫ细胞（大肾细胞系）中的表达。以Ｎｏｔ　Ⅰ切取ＧＦＰ后插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ_3,以ＢａｍＨⅠ鉴定方向,以ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥＴＭ将ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ转染至培养的ＭＤＣ Ｋ,经Ｇ４１８筛选ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ阳性克隆,荧光显微镜下观察。结果证实成功构建了含ＧＦＰ ｃＤＮＡ的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ,并成功转染ＭＤＣＫ,在荧光显微镜下阳性克隆细胞呈绿色。 ＧＦＰ基因可在 ＭＤＣＫ细胞中成功表达,并发出绿色荧光,是一良好的报告基因和筛选标记。     

荷兰暴发禽流感--警示禽流感的防治

本月1日,荷兰农业部宣布,在东部靠近德国边界的格尔德兰省的6个农场发现了禽流感疫情,动物疾病控制中心(CIDC)确诊为H7亚型高致病力禽流感病毒感染.这一消息立即震动了荷兰全国,荷兰农业部已上报国际兽医局(OIE)并发布命令,要求所有农场暂时停止鸡、鸭等活禽及其蛋类和动物饲料等相关产品的转运和销售.为尽快控制疫情,OIE于7日的通报表明,荷兰已立即在受病毒传染的农场扑杀近5万只感染鸡.这一场突如其来的禽流感沉重打击了荷兰的家禽饲养业.3日,欧盟宣布全面禁止荷兰活禽及其蛋品出口,并将尽快通过欧盟一体化措施,防止疫情向其它欧盟成员国以及第三国蔓延.……     

我国兽医工作机构改革和人力资源管理

一、认识兽医工作机构和人力资源的意义 兽医工作机构是做好兽医事业健康发展的载体. 2005年国务院出台了<关于推进兽医管理体质改革的若干意见>,对兽医管理体制改革做出全面部署和具体安排.     

猪圆环病毒的致病机理及其影响因素

猪圆环病毒2型(PCV2)感染可损伤猪的免疫系统,引起感染猪的胸腺萎缩、T细胞和B细胞数量减少;细胞因子的表达量改变,如IL-10的量上升,IL-8的量明显下降,IFN-γ量减少。同时,PCV2感染的靶细胞在胎儿期是心肌细胞、肝细胞和巨噬细胞,而出生后只有巨噬细胞。因而推测猪感染PCV后,机体的免疫力下降,感染猪处于亚健康状态,其它病原因子如猪繁殖与呼吸综合征病毒、细小病毒、衣原体、猪流感、肺炎支原体和胸膜肺炎放线杆菌等,或应激因素如营养元素缺乏、免疫刺激和较差的饲养管理等多种因素都可加重PCV2感染猪的病情,进而发展成临床症状和病理变化较明显的断奶后仔猪多系统综合征、猪肾病综合征等与猪圆环病毒相关痰病。