SD大鼠层粘蛋白受体基因的克隆与序列分析

以大鼠大脑皮质神经元的总RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增了SD大鼠层粘蛋白受体基因, 并将其克隆到pMD18-T Simple载体中进行测序,运用分子生物学软件对获得序列进行了分析.结果表明所克隆的SD大鼠层粘蛋白受体基因的ORF片段包含了朊蛋白基因的完整编码区,共888个核苷酸, 该基因内无内含子,编码295个氨基酸的前体蛋白,推测其相对分子质量约32.6 kD.与已报道的绵羊、家鼠、猪、牛、人相应序列作比较,发现其核苷酸序列和氨基酸序列具有较高的同源性.氨基酸序列分析表明,SD大鼠层粘蛋白受体的氨基酸点突变位点为V176M,G243E.研究结果为探讨层粘连蛋白受体基因的功能及其在疾病发生、发展过程中的作用提供了基础数据.     

肺动脉高压肉鸡肺小动脉中膜5-HT量及其与肺血管重构的关系

静脉注射纤维素粒子复制肉鸡肺动脉高压模型,观察肺小动脉中膜5-羟色胺(5-HT)表达和肺小动脉管壁病理形态学变化,探讨5-HT与肺血管重构的关系。80羽科宝肉鸡分为对照组(n=30)和试验组(n=50)。20日龄时,试验组每羽鸡静脉注射0.3 mL的纤维素悬液;对照组每羽鸡静脉注射等体积生理盐水。记录肺动脉高压综合征(PHS)发病率,并分别于21、28、35、42 d从各组随机抽样,测定右心室/全心室质量比(RV/TV)、红细胞压积(PCV)、血红蛋白(Hb)、肺小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)、平均中膜厚度(mMTPA)和肺厚壁末梢血管百分比(TWPV%);采用免疫组化方法标记5-HT,并用病理图像分析软件检测肺小动脉5-HT的量。结果表明:试验组肉鸡PHS发病率显著高于对照组(P<0.05);RV/TV值在35、42 d时显著升高(P<0.05);PCV在28、35 d时显著升高(P<0.05);Hb值在35 d时显著升高(P<0.05);血管mMTPA、WA/TA和TWPV%在35、42 d时均显著升高(P<0.05);肺小动脉5-HT含量升高,在各时间点均差异显著(P<0.05),且5-HT含量...     

连翘水提液体外对禽流感病毒增殖及炎症因子表达的抑制效应

旨在评估连翘体外抗H5N1和H9N2禽流感病毒（avian influenza viruses,AIVs）增殖及其介导炎症的效果,本试验制备了连翘水提液,首先采用CCK-8法测定了连翘水提液对DF-1细胞的安全浓度,并通过3种处理方法（药液预处理病毒后感染细胞、先感染病毒后给药、先给药后感染病毒）来筛选连翘水提液的最佳给药方式;在最佳给药方式下,使用TCID₅₀法检测禽流感病毒H5N1和H9N2的增殖情况,并采用qRT-PCR检测了炎症相关趋化因子和细胞因子的表达变化。结果显示,连翘水提液对DF-1细胞的最高安全浓度为4 mg·mL^-1;先感染病毒后给药是最佳的给药方式;在最佳给药方式下,连翘水提液能显著降低H5N1和H9N2 AIVs在各个时间点的病毒滴度,并呈剂量依赖性关系;与对照组相比,H5N1 AIV给药组中CX3CL1、IL8L1、CCL5、SCYA4、IL1β、IL-6和TNF-α的表达显著降低,H9N2 AIV给药组中CX3CL1、IL8L1、CCL5、IFN-β、IL-6和TNF-α的表达也有类似的下降趋势。这表明连翘能够抑制H5N1和H9N2 AIVs在DF-1细胞中的增殖,降低炎症相关细胞因子的表达,有良好的抗炎和抗病毒活性。     

鸡传染性肿瘤病的诊断

在鸡群常见的肿瘤性疾病中有马立克氏病(Marek’s disease，MD)，淋巴细胞白血病(Lymphocyte Leukosis，LL)和网状内皮细胞增殖症(Reticuloendotheliosis，RE)。由于这3种肿瘤病在临床症状及病理变化上很相似，仅靠肉眼观察和光学显微镜下观察很难将这3种病准确快速地鉴别开来，特别是诊断者临床诊断经验不够丰富时常常给疾病的诊断及防治工作带来困难。     

H9N2禽流感病毒PB2蛋白627位点突变对小鼠肺脏RIP3、Slit2和Robo4表达和分布的影响

PB2蛋白627位点被证实是决定甲型流感病毒宿主范围和致病性的关键因子,为深入探究H9N2禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)及其PB2蛋白627位点突变株对BALB/C小鼠肺脏RIP3、Slit2和Robo4基因表达和组织分布的影响,该研究使用H9N2 AIV(V_K627E)和该毒株PB2蛋白627位点突变株(rV_K627E)感染BALB/C小鼠,分别在攻毒后第1、3、5、6 d采集肺组织,通过qRT-PCR和免疫组织化学技术对RIP3、Slit2和Robo4基因在小鼠肺组织中的特异性表达和分布进行研究。结果显示,攻毒组小鼠肺脏RIP3的表达量与对照组相比显著上升,同时V_K627E组RIP3的表达量显著高于rV_K627E组;Slit2和Robo4的表达量在攻毒后第1 d明显低于对照组,之后r VK627E组的表达量与对照组和V_K627E组相比显著上升。免疫组织化学检测结果显示,RIP3蛋白主要分布在小鼠肺泡壁上皮细胞以及肺动脉血管内皮细胞,呈弱阳性...     

猪弓形体病诊治

猪弓形体病是人和多种动物共患的一种原虫病,其病原体为刚地弓形虫。根据其不同发育阶段,可分为五种形态,即滋养体、包囊、裂殖体、配子体和卵囊。前二者为无性生殖期,存在于中间宿主体内,后三者为有性生殖期,只存在于终末宿主——猫体内。2002年10月9日,在兽医院诊断室接触到一病例,一猪场送来病猪进行检测,经详细问诊,该厂猪群已发病三天,死亡5到6头/18头,     

实验性热应激对肉仔鸡免疫器官的影响

对实验性热应激肉仔鸡的免疫器官的组织学变化、超微组织学变化进行了动态观察，对热应激造成的免疫器官的细胞凋亡及免疫反应能力进行了检测。结果表明，热应激可引起免疫器官胸腺、脾脏、法氏囊的发育分化不良，使法氏囊指数、脾脏指数明显下降，胸腺指数虽有下降，但幅度较小；热应激对免疫器官的组织结构有显著影响，尤其对法氏囊和脾脏的影响更明显，主要表现为实质细胞的萎缩、消失性病变，但无明显的实质细胞崩解坏死、炎性细胞浸润、炎性充血等病理变化，并随热应激时间的延长而逐渐加重，最后以实质细胞几乎完全消失、间质结缔组织增生而纤维化告终。热应激可显著影响试验鸡血清新城疫病毒抗体滴度，与对照相比，其抗体滴度的峰值低，维持时间短，下降速度快；通过电镜观察和细胞凋亡的原位检测，证实热应激时免疫器官的淋巴细胞和巨噬细胞有凋亡现象，这种凋亡现象在早期尤其显著。     

产房仔猪腹泻的鉴别与治疗

产房仔猪腹泻常见多发,主要表现为：腹泻、消瘦、脱水、被毛粗乱,衰竭死亡;病死猪皮肤苍白或呈暗红色,暴发或散发,治疗效果较差。病因可分为传染性因素和非传染性因素,传染性因素主要包括：冠状病毒或轮状病毒感染、大肠杆菌感染、产气夹膜梭菌感染、猪球虫感染、沙门氏菌感染、猪痢疾;非传染性因素常见于气温骤变仔猪受凉、母猪无乳或少乳造成仔猪低血糖症表现的腹泻症状等。     

SD大鼠和BALB/c小鼠PRND基因的克隆和序列分析

以睾丸总RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增了SD大鼠和BALB/c小鼠的叠朊蛋白(PRND)基因,并将其克隆到pMD18-T载体中进行测序,运用生物信息学软件对这些序列进行了分析。结果表明获得的SD大鼠和BALB/c小鼠PRND基因的完整ORF片段,基因无内含子,分别编码178和179个氨基酸的前体蛋白。与GenBank登录的其他同品种鼠相应序列进行比较,SD大鼠发生了G187C点突变,相应地引起了G63R的氨基酸改变;BALB/c小鼠发生了G12T、C13G和C528T点突变,但只发生了L5V的氨基酸改变,其余均为同义置换。氨基酸一级结构分析显示2种PRND编码的Dopple蛋白均由氨基端的信号肽、中间的成熟蛋白和羧基端的GPI锚定结合区组成。二级结构预测表明,Dopple蛋白由3个α-螺旋和2个β-折叠片层组成。研究结果为进一步研究Dopple蛋白的结构、功能及其在传染性海绵状脑病发生发展中的作用提供了基础数据。