Ras-GRF1蛋白对小鼠学习和记忆能力的影响

通过避暗穿梭试验、跳台试验、水迷宫试验和自主活动试验观察Ras-GRF10/0鼠和野生鼠2种小鼠行为学变化,来研究Ras-GRF1蛋白对学习和记忆能力的影响。结果显示,在避暗试验中Ras-GRF10/0鼠被电击的次数多于野生鼠,且在第1天有显著差异(P0.05);在跳台试验中,野生鼠表现出的学习记忆能力也强于基因敲除鼠;在水迷宫定位航行试验中,基因敲除鼠的潜伏期均长于野生鼠,且在第2天有显著差异(P0.05),第3、4、5、6、7天都有极显著的差异(P0.01);在空间探索试验中,基因敲除鼠和野生鼠第1次穿越平台的时间和穿越平台的次数均无显著差异;在自主活动试验中,基因敲除鼠和野生鼠的活动次数没有显著性的差异,但是野生鼠的活动次数都多于敲除鼠。结果表明,野生鼠的学习和记忆能力均强于Ras-GRF10/0鼠,且野生鼠的中枢神经兴奋性高于基因敲除鼠,反映出Ras-GRF1蛋白缺失,对小鼠学习和记忆能力有一定程度的损伤。     

微藻作为动物产品多不饱和脂肪酸来源

多不饱和脂肪酸（PUFA）在营养和医学上的重要作用，已引起人们广泛的兴趣，特别是二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA），两者对防治心脏疾病、动脉硬化、癌症、风湿关节炎、气喘和糖尿病等人类疾病有明显效果，已成为研究开发的热点。海洋鱼油是EPA和DHA等ω－３PUFA的主要来源。由于鱼油资源有限，且鱼油中ω－３PUFA的构成和含量随着鱼的种类、季节、地理环境位置等不同而变化，利用海洋鱼油作为ω－３PUFA来源受到了很大的限制，另外，利用鱼油生产的EPA和DHA产品带有无法去除的鱼醒味，大大的影响了产品的质量。…     

马立克病毒感染鸡端粒酶活性的研究

对1日龄非免疫鸡分别接种马立克病病毒(MDV)Ⅰ型国际标准强毒GA株、国内标准强毒京-1株及Ⅰ型MDV疫苗毒CVl988株后第5d起，用改进的TRAP法和Bandscan软件测定分析、计算感染过程中鸡外周血淋巴细胞(PBMC)的端粒酶活性。结果，自接种MDV Ⅰ型强毒GA株和京-1株后，在鸡尚未出现临床症状和可视病变之前端粒酶就可被检测到，并且随着感染鸡日龄的增加逐渐升高，分别在20～25日龄时其相对活力达到最高值；接种MDV CV1988后，整个试验期端粒酶活性均呈阴性。试验结果表明，MDV CV1988疫苗株具有较可靠的免疫效果，PBMC端粒酶活性与马立克病的发病进程具有一定的相关性。     

盐酸多巴胺、硫酸沙丁胺醇、盐酸莱克多巴胺、盐酸克伦特罗残留量的HPLC检测

β-受体激动剂在临床上主要用于扩张支气管和增加肺通气量,用于治疗人和动物支气管哮喘以及松弛牛子宫和延缓其发育等[1]。20世纪80年代初的一系列动物试验结果表明,当用量超过推荐治疗剂     

PrP蛋白缺失小鼠单胺能神经递质及受体mR-NA表达量的变化

以C57BL/6野生鼠及Pr Pc蛋白敲除小鼠为研究对象,采用荧光定量PCR方法研究多巴胺(DA)、5-羟色胺及其特异性受体的mRNA表达量在脑中的变化规律。结果表明:Pr Pc蛋白缺失小鼠脑中5-HTR-1A,5-HTR-1B,5-HTR-2A,5-HTR-2C,DA显著高于野生鼠;5-HT,DR1,DR2,DR3,DR4显著低于野生鼠。说明Pr Pc蛋白对中枢神经系统有着重要的调节作用。     

口服蓖麻毒素对小鼠肠道及免疫器官的毒性作用

本试验通过灌胃小鼠纯化蓖麻毒素(1/5 LD50),对毒素在机体内对胃肠道及免疫器官的毒效应进行了分析.中毒初期,小鼠体增重及胸腺、脾脏相对重均明显下降,随着毒素的不断排出,小鼠的体征有恢复正常的迹象.病理切片、扫描电镜及透射电镜的结果表明,蓖麻毒素可引起一系列肠道病理反应,肠粘膜损伤极其严重;脾细胞发生明显的凋亡和坏死症状.     

几种常见的鸡病毒免疫抑制病

近些年来,我国养鸡业发展迅速,养鸡生产形式也发生了很大变化。当前尽管广泛应用各种疫苗预防接种对鸡的重要传染病进行防制,但是生产实践中仍然时常有各种疾病大面积爆发的报道,导致大批鸡死亡或淘汰,造成巨大的经济损失。除了与疫苗使用不当,免疫程序不合理,饲养管理不善,病毒血清型和毒株之间的抗原结构不同等因素有关外,与某些传染病尤其是病毒性传染病引起的免疫抑制有关。免疫抑制足指由于各种因素影响,使得机体对抗原的应答能     

小鼠朊蛋白相关蛋白Shadoo的表达、纯化及多克隆抗体的制备

构建SPRN重组原核表达载体,并进行目的蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备,提取BALB/c小鼠全血基因组,PCR扩增SPRN基因,克隆至融合表达载体,在大肠埃希菌中表达鼠Shadoo蛋白并纯化;以纯化蛋白为抗原免疫新西兰白兔制备抗血清,并检测抗体效价,用Western blot方法分别检测与重组及内源性Shadoo蛋白的反应性.结果表明,成功制备了小鼠Shadoo蛋白兔源多克隆抗体,为研究Shadoo蛋白与PrP蛋白之间的功能调节关系,自身的生理学作用以及Shadoo蛋白在传染性海绵状脑病发病机制过程中的生物学功能奠定了良好的基础.     

梅花鹿正常朊蛋白特异性片段的高效表达和纯化

根据梅花鹿正常朊蛋白基因序列设计特异引物,采用PCR方法扩增出梅花鹿正常朊蛋白特异性基因片段PRNP(67～699),将该基因克隆至pGEX-6p-1载体中,构建pGEX-6p-1-PRNP原核表达质粒.将重组质粒转化至Rosetta-gami(DE3)受体菌中,IPTG(1.0 mmol/L)37℃诱导培养4 h,经SDSPAGE和Western-blotting鉴定,结果表明目的蛋白获得高效表达.通过GST-Resin Kit纯化,得到质量浓度为417.8 mg/L的蛋白,并具有抗原性.     

22L毒株朊蛋白错误折叠循环扩增方法的建立

参考Saborio和Soto创建的名为蛋白质错误折叠循环扩增(protein misfolding cyclic amplification,PMCA)的方法建立一种22L毒株系朊蛋白错误折叠循环扩增方法,以便研究22L毒株系异常朊蛋白(scrapie PrP,PrPSc)的合成机制。在阴离子去污剂十二烷基硫酸钠(SDS)存在的条件下,这种方法可以通过超声降解从而重复扩增产物,并在仓鼠脑匀浆中快速有效的模仿体内朊病毒PrPSc的复制,因此可以在几个小时内高浓度扩增PrPSc。已有试验结果发现,PrPSc体外转化率在使用粗提的脑组织匀浆时比使用纯化重组PrP更高,这个发现暗示着高效率的PrPSc转化可能还需要探索其他未知的宿主因素。研究结果表明,建立的这种改良的PMCA技术可用于研究PrPSc合成的生物化学机制,以此来进行诊断与治疗方法的研究。