神经退行性疾病线虫模型的相关综述

模式生物秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)是多细胞无脊椎动物,其中神经细胞占体细胞的三分之一。秀丽线虫作为重要的模式生物在生命科学的发展过程中发挥着举足轻重的作用。线虫为人们理解复杂的细胞生命活动做出了极大的贡献。本文对秀丽线虫的重要成果作一简要综述。     

朊蛋白与金属离子之间作用的研究进展

朊病毒(PrP^Sc)是由动物体内正常朊蛋白PrP^c构象改变形成的,PrP^Sc与PrP^C在氨基酸序列上完全一致,PrP^C中α-螺旋丰富而PrP^Sc富含β-折叠。目前,科学家还未研究清楚PrP的生理机能。人们普遍认为:人和动物感染朊病毒病时除PrP外还存在一些重要的辅助因子影响着PrP^C变构、PrP^Sc传播、PrP^Sc引起神经细胞凋亡等病变过程,因此,研究朊蛋白的各种辅助因子将有助于阐明这方面的问题,这些辅助因子包括各种金属离子,如Ca²⁺、Cu²⁺、Fe²⁺、Mn²⁺。作者概述金属离子对朊蛋白结构和功能的影响,以及它们在朊病毒病的发病过程中可能起的作用。     

朊病毒病生物标记microRNA-142-3p可视化快速检测

为了更快捷、方便的检测朊病毒病,根据已有报道确定micro RNA-144-3p作为朊病毒病的生物标记,通过mi RBase数据库公布的micro RNA-142-3p的核酸序列,设计特异性标记有生物素的俘获探针和标记有FAM的检测探针,从而建立了纳米金偶联核酸试纸条的高效,快捷,可视化检测方法。结果表明:该检测方法具有良好的特异性和较高的灵敏度(0.005 nmol·L-1)。该检测试纸条的建立在朊病毒病预防,控制,诊断过程中具有一定实际意义。     

腺相关病毒介导的小鼠prnp基因打靶载体构建

利用三重融合PCR方法构建了小鼠prnp基因敲除载体。提取129小鼠基因组,设计引物扩增打靶载体同源臂,把两同源臂与neo基因三元件PCR扩增成一条融合基因。融合基因与AAV载体酶切后的载体骨架通过NotI酶切位点相连接,构建重组质粒载体rAAV。     

蓖麻毒素B链(RTB)酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测

采用PCR技术扩增蓖麻毒素B链基因,并克隆入诱饵载体pSos中,成功地构建了酵母双杂交诱饵载体pSos-RTB。将重组质粒与对照质粒共转化入酵母菌cdc25H。结果表明:该段基因表达的蛋白对酵母菌cdc25H无毒性和无自激活作用,且在酵母细胞中定位正确。     

PrP~C蛋白对小鼠学习与记忆能力的影响

利用本实验室构建的C57BL/6背景下的PRNP基因敲除小鼠模型与C57BL/6野生型小鼠,通过避暗试验以及Morris水迷宫试验观察小鼠的行为。以此来研究PrPC蛋白的缺失对于小鼠学习与记忆能力影响,进而反映PrPC蛋白对于神经系统功能的影响。结果显示,PRNP敲除小鼠在避暗试验中对于电刺激的记忆比野生型小鼠强,且在第3天差异显著（P〈0.05）。在Morris水迷宫定位航行试验中,敲除鼠的逃避潜伏期明显长于野生小鼠,第3、5、6天差异显著（P〈0.05）。空间探索试验中,PRNP敲除鼠与野生小鼠相比较,首次穿越虚拟平台的时间以及穿越平台的次数差异并不显著。研究表明,PrPC蛋白缺失对于小鼠主动回避伤害的记忆能力有所提高,但是对于空间立体学习和记忆能力损害很大。     

猪场环境中细菌分布情况及耐药性分析

从吉林省4家种猪场空气、粪便中分离到细菌296株,利用MALDI-TOF质谱对分离株进行鉴定,结果显示革兰氏阳性菌占细菌总数的76.7%,革兰氏阴性菌占23.3%。利用Vitek-32系统进行耐药性检测,结果显示凝固酶阴性葡萄球菌耐药情况严重,对青霉素类、四环素、红霉素等抗生素具有很高的耐药率。革兰氏阴性菌中94%的大肠埃希菌表现为多重耐药,其中29.4%为产ESBL菌株,仅有头霉素类、碳青霉烯类和部分复方制剂对其具有抑制作用。非发酵菌对氨苄西林、复方新诺明耐药率已达到35%以上。结果表明,吉林省某些猪场可能存在条件性病原菌及耐药菌株的污染和威胁,定期加强调查监测,对科学使用抗生素、防止耐药株的传播扩散具有重要的现实意义。     

表面等离子共振检测蓖麻毒素

采用氨基偶联的方法,分别将RT抗体分子和RT分子交联固定于葡聚糖表面,进行直接和间接检测溶液中RT的含量,建立了SPR检测蓖麻毒素方法。在0～2 000μg/L范围内,线性相关系数R2=0.988 7,最低检测浓度为0.05μg/L,检测时间为18min。结果显示,RT与其单抗具有良好的特异性和敏感性,能够满足RT快速检测的需求。     

Vitek32自动化微生物分析系统检测耐甲氧西林凝固酶阴性萄萄球菌方法的评估

为了评估自动化系统检测耐药性的可靠性,研究以纸片法为参考方法采用头孢西丁纸片法和Vitek32自动化微生物分析系统对95株凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)进行苯唑西林敏感性的测定.结果表明:两种方法的一致性达84.2%;Vitek32自动化微生物分析系统可在8 h之内检测出耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCoNS),其...     

转基因小鼠中应用RNAi的初步探讨

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是通过双链RNA介导,特异性地降解相应序列的mRNA,从而导致转录后水平的基因沉默。近年来,利用小分子RNA(small interfering RNA,siRNA)介导的RNAi技术已越来越多的应用于哺乳动物细胞中。同时,在活体中利用RNAi研究多种生物基因功能也成为一种有效的手段。文章旨在介绍在转基因小鼠中RNAi的应用。