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【目的】磷是植物生长发育所必需的大量营养元素,研究无机磷酸盐(inorganic phosphate,Pi)胁迫下羊草的响应,筛选不同浓度Pi胁迫下的内参基因,并分析Pi响应相关基因的表达,为羊草Pi胁迫响应的分子机制研究提供基础数据。【方法】以羊草幼苗为材料,进行不同浓度Pi处理培养,对羊草的株高和根长进行检测,利用钒钼黄比色法检测羊草植株中Pi的含量。根据羊草转录组数据选取7个候选内参基因,从NCBI核酸序列数据库选取1个候选内参基因,对羊草不同处理材料进行总RNA提取和cDNA合成,利用qRT-PCR对候选内参基因的表达进行检测,并通过geNorm、NormFinder和Bestkeeper软件对其稳定性进行评估。根据筛选获得的较稳定内参基因,对Pi响应基因的qRT-PCR检测数据进行相对定量分析。【结果】表型观测结果显示,无论是低Pi还是高Pi胁迫都使得羊草的生长减缓;株高对低Pi或缺Pi胁迫较为敏感,根长对高Pi胁迫较为敏感;并随着处理浓度的增加羊草中Pi的含量也增加。qRT-PCR溶解曲线分析显示8个候选内参基因均具有单一的溶解峰,基因表达谱分析表明8个候选内参基因的CT值范围是17.16—26.61,其中,LcGAPDH的表达丰度最高为17.16—20.22,Lc18SrRNA的表达丰度最低为23.28—26.61,CT值变异系数最小的为LcARPT(2.09%),最大的为LcTUA(6.8%)。综合geNorm、NormFinder和Bestkeeper稳定性排名,通过计算几何平均数,获得8个候选内参基因综合稳定性排名,其中排名靠前的3个基因分别为Lc18SrRNA、LcCAP和LcEF1α,排名最后的2个基因为LcTUA和LcTUB。分别以Lc18SrRNA、LcCAP和LcEF1α作为内参基因,qRT-PCR相对定量表达分析结果显示,与对照相比,LcPHO1-2的表达受低Pi或者缺Pi诱导;LcPAP2的表达受高Pi诱导;而LcPAP27的表达同时受低Pi和高Pi下调。【结论】低Pi和高Pi胁迫均使羊草生长受阻,羊草地上组织与地下组织对Pi胁迫响应的模式不同。筛选出3个表达较为稳定的内参基因Lc18SrRNA、LcCAP和LcEF1α。LcPHO1-2和LcPAP2分别参与了羊草对低Pi和高Pi的应答响应,LcPAP27同时参与了羊草对低Pi和高Pi的响应进程。 相似文献
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制种玉米多功能复混肥适宜用量与肥效的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
在甘肃河西内陆灌区的制种玉米田内,通过田间试验,系统研究了制种玉米多功能复混肥的适宜用量及肥效,结果表明:随着多功能复混肥施用量的增加,制种玉米经济性状和产量在增加,但增产量、边际产量、边际利润、肥料投资效率则随着施用量的增加而递减。多功能复混肥施用量与制种玉米产量间的肥料效应回归方程是:y=373.01+2.089x-0.00518x2。多功能复混肥适宜用量为80.02 kg,制种玉米的理论亩产量为573.28 kg,与田间试验处理5的结果基本吻合。在氮、磷纯养分投入量相等的条件下,不同种类肥料的肥效是:多功能复混肥尿素+磷二铵。 相似文献
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两种克伦特罗ELISA试剂盒的比对试验 总被引:1,自引:0,他引:1
应用意大利Tecna公司和德国r-B iopharm公司的克伦特罗酶联免疫(ELISA)试剂盒检测猪尿样和猪肝样品,并对两者的标准曲线线性范围、斜率和B/B0抑制浓度、板内和板间变异系数、阳性检出率、回收率等进行了比对。结果表明,当阳性判定阈值设定在1.0~5.0 ng/mL范围时,2种试剂盒均能满足分析要求,对尿样检测Tecna试剂盒比r-B iopharm试剂盒的检测时间要短;但在检测低浓度克伦特罗的尿样时,r-B iop-harm试剂盒更好,对肝样检测Tecna试剂盒有优势。 相似文献
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布特火鸡新城疫母源抗体水平动态监测 总被引:2,自引:0,他引:2
布特火鸡是由英国布特(BUT)公司在90年代末期培育成功的肉用型品种。辽宁丹东地区于1999年引进该品种,并由我院动物科学系立项研究。鸡新城疫(ND)是火鸡与鸡的共患烈性传染病,但两者的母源抗体水平动态变化规律不尽相同。掌握火鸡的母源抗体水平动态变化规律,避开母源抗体水平对疫苗的干扰作用,是确保接种免疫成功的重要条件。目前鸡、鸵鸟的母源抗体水平动态监测已有报道,但火鸡的母源抗体变化规律仍是空白。笔者于2002年6月开始对我院种禽基地饲养的英国布特火鸡初生至成年的母源抗体水平进行研究,为制定肉用火鸡新城疫免疫程序提供了参考依据,现将测定结果报告如下。 相似文献
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