鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FliC的原核表达及纯化

对鼠伤寒沙门氏菌的鞭毛蛋白FliC的基因进行克隆、鉴定和原核表达,为鞭毛蛋白佐剂作用的研究奠定基础。以鼠伤寒沙门氏菌8014菌株基因组DNA为模板,PCR扩增Flic基因,产物与T载体连接,经测序鉴定正确后与表达载体pQE30(+)连接构建重组表达质粒Flic-pQE30,将此重组质粒转化入表达宿主E.coli XL1-Blue菌株内抽提质粒,酶切鉴定正确后对转化菌株以IPTG进行诱导后,表达产物经镍离子亲和层析柱纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。测序结果显示,FliC为完整的编码区基因1 485 bp,编码495个氨基酸残基,蛋白相对分子质量约为56 kDa。经SDS-PAGE分析表明,以37℃、1 mM的IPTG诱导5 h,表达效果最好,诱导产物是与理论值相符的56 kDa的融合蛋白。经western-blotting检测,表达的重组蛋白FliC可与小鼠抗鼠伤寒沙门氏菌全菌体多抗血清反应得到清晰的目的条带,表明表达的重组蛋白具有良好的反应原性。成功进行了鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白Flic基因的克隆表达,为进一步研究其免疫佐剂作用奠定了基础。     

牛传染性鼻气管炎的分离鉴定和灭活条件的优化

从疑似牛传染性鼻气管炎病毒感染的牛鼻腔中分离出1株病毒,通过PCR方法和MDBK细胞病变观察对其进行鉴定,确定该分离株为牛传染性鼻气管炎毒株。通过对该毒株的增殖条件和甲醛灭活条件的优化研究,为制备牛传染性鼻气管炎细胞源灭活疫苗提供参考依据。结果表明该毒株接毒18h后病变细胞达70％开始收毒,病毒液在0．2％的甲醛37℃灭活36h灭活效果最好。     

牛多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H的表达与纯化

试验对多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H(OmpH)基因进行克隆、鉴定,并在原核系统中表达。以多杀性巴氏杆菌(CVCC448)强毒株基因组为模板,扩增OmpH基因,连接T载体,经测序鉴定正确后与表达载体pET-28a连接构建重组表达质粒OmpH-pET28a,将此重组质粒转化入表达宿主E.coli BL21菌株内,抽提质粒,酶切鉴定正确后对转化菌株以IPTG进行诱导,表达产物通过镍离子亲和层析纯化,之后进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果显示,OmpH基因的编码区为978 bp,编码326 个氨基酸残基,融合蛋白分子质量约为37 ku。Western blotting检测结果显示,表达的重组蛋白OmpH可与鼠抗多杀性巴氏杆菌全菌体多抗血清反应得到清晰的目的条带,表明表达的重组蛋白具有良好的免疫原性。多杀性巴氏杆菌OmpH基因的成功表达,为进一步研究其免疫作用奠定了基础。     

浅论“环境问题”对畜牧业发展的影响

自从2008年我国现代畜牧业发展进入新常态发展初级阶段以来,环境污染问题已经逐渐成为严重制约推动我国现代畜牧业健康发展的一个重要决定因素。截止到目前,很多的畜牧养殖都不再追求养殖数目的增加,而是将畜牧养殖与土地资源、环境建设、生态结合起来,从而达到促进畜牧养殖业发展的目标。本文主要是通过对环境条件对我国畜牧业的影响进行分析,找到了促进我国畜牧业与其生态环境健康可持续发展的途径与方法。     

鼠伤寒沙门氏茵鞭毛蛋白FIiC的原核表达及纯化

对鼠伤寒沙门氏菌的鞭毛蛋白FliC的基因进行克隆、鉴定和原核表达,为鞭毛蛋白佐剂作用的研究奠定基础。以鼠伤寒沙门氏菌8014菌株基因组DNA为模板,PCR扩增Flic基因,产物与T载体连接,经测序鉴定正确后与表达载体pQE30（＋）连接构建重组表达质粒Flic—pQE30,将此重组质粒转化人表达宿主E．coliXLI—Blue菌株内抽提质粒,酶切鉴定正确后对转化菌株以1PTG进行诱导后,表达产物经镍离子亲和层析柱纯化后,进行SDS—PAGE和Westernblot分析。测序结果显示,FliC为完整的编码区基因1485bp,编码495个氨基酸残基,蛋白相对分子质量约为56kDa。经SDS—PAGE分析表明,以37℃、1mM的IPTG诱导5h,表达效果最好,诱导产物是与理论值相符的56kDa的融合蛋白。经western—blotting检测,表达的重组蛋白FliC可与小鼠抗鼠伤寒沙门氏菌全菌体多抗血清反应得到清晰的目的条带,表明表达的重组蛋白具有良好的反应原性。成功进行了鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白nic基因的克隆表达,为进一步研究其免疫佐剂作用奠定了基础。     

禽白血病的研究进展

禽白血病是由禽白血病病毒和禽肉瘤病毒引起的以禽类造血组织中某些细胞成分增生为主的肿瘤性传染病的统称。禽白血病ALV感染鸡的主要表现是发育迟缓、多组织肿瘤、免疫抑制、生产性能下降、间接的免疫失败、严重的造成病鸡的死亡,在我国被列为二类动物疫病。文章就禽白血病的病原、流行特点、检测方法及防控措施等方面的研究进行综述。     

我国肉羊的生产现状及对策

<正>我国人口众多,但对羊肉的消费能力普遍不高,随着经济快速发展,人们生活水平不断提高,消费能力逐渐见长,羊肉出现在人们的视野,人们对羊肉的喜爱加快了羊肉产业的发展。相比之下,我国肉羊生产略显落后,粗放的养殖方式,普遍较小的养殖规模,较为缓慢的产业化进程,受到一定程度的影响,羊肉市场的供求趋势略显紧张。受到这一态势的变化影响,近几年来羊肉价格不断提高,是猪肉、鸡肉、牛肉等普通肉类价格的几倍,价格居高不低。     

地方黑羽鸡禽白血病与鸡白痢净化效果研究

为客观评价对地方黑羽鸡实施净化管理的效果。该研究对2500只同批次1日龄白城地方黑羽雏鸡以禽白血病和鸡白痢为净化病种筛选鸡群,进而各选取250只母鸡和25只公鸡分别组建净化组与非净化组,试验探究其在死淘、产蛋性能、种蛋孵化及后代生长性能等方面的差异。结果显示,非净化鸡群的死淘率、料蛋比分别比净化组高出2.6和0.49个百分点;非净化组6~11月龄间月均产蛋率及其种蛋在合格率、受精率、出雏率和健雏率分别较净化组低出6.82、3.28、3.27、8.37和4.13个百分点;同时,与非净化组相比,净化组后代的平均日增重也有所提高。可见,通过净化鸡群禽白血病和鸡白痢,可显著提高地方黑羽鸡的生产性能和繁殖性能,增加经济效益。     

过瘤胃脂肪酸对羊肉脂肪酸含量的影响

为研究过瘤胃脂肪酸对羊肉中脂肪酸含量的影响及影响因素分析,本试验采用正交试验设计,设定不饱和脂肪酸种类、过瘤胃处理方式、添加量3个试验因子,以羊肉中含有的不饱和脂肪酸含量(UFA)作为评价指标,结果显示,过瘤胃处理方式对羊肉中脂肪酸含量及比例的影响最大,最优组合为A3B3C2,即添加2%亚麻酸钙时,羊肉中不饱和脂肪酸含量及比例最佳,羊肉品质最好。