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参考已发表的番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus, mDRV)的S4序列,自行设计1对扩增σC基因的引物,对mDRV ZJ99株的RNA抽提物进行RT-PCR扩增,成功地获得了843 bp特异性的扩增片段(GenBank: AY619690)。将PCR产物克隆测序,BLASTn比较结果显示, mDRV ZJ99株σC基因与福建MW9710株对应基因的同源性为98%,与法国89026和89330株对应基因的同源性分别为92%和93%; BLASTp比较结果显示, ZJ99株编码的σC蛋白与MW9710、89026和89330株相应蛋白分别具有94%、89%、 89%同一性(identity)和95%、92%、93%相似性(similarity)。进一步将σC基因亚克隆至原核表达载体pET28a, 转化大肠杆菌(Escherichia coli )BL21(DE3),IPTG诱导阳性重组子,SDS-PAGE电泳检测发现, σC蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式高效表达,目的蛋白的表达量可达到细菌总蛋白的22.9%。 相似文献
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猪大肠杆菌病,如仔猪的黄、白痢、水肿病,是由致病性大肠杆菌引起的一种猪的急性传染病,是引起仔猪死亡的重要原因之一,对养猪业造成了较大的威胁和重大的经济损失。大肠杆菌病疫情发生后,临床上常用抗生素进行治疗,尽管疫情能得到一定程度的控制,但细菌的耐药性日益严重,特别是多重耐药性问题突出。 相似文献
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【目的】研究银杏叶提取物(EGB)对断奶仔猪血清生化指标和抗氧化功能的影响。【方法】将160头25日龄的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪随机分为4组,每组4个重复,每重复10头。第1组为对照组,饲喂基础日粮;第2、3、4组分别饲喂在基础日粮中添加质量分数0.1%,0.2%和0.3% EGB的试验日粮。试验期为28 d,分别于第14和28天采集血样,测定断奶仔猪血清生化指标和抗氧化功能指标。【结果】与对照组相比,日粮中添加质量分数0.2%,0.3% EGB可显著降低断奶仔猪血清甘油三酯含量(P<0.05),显著提高血清球蛋白含量(P<0.05);添加质量分数0.1%,0.2% EGB,总体上可显著提高断奶仔猪血清总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性和总抗氧化能力(P<0.05),显著降低血清丙二醛和一氧化氮含量(P<0.05)。另外,与对照组相比,日粮中添加EGB使断奶仔猪血清高密度脂蛋白胆固醇和总蛋白含量呈增加趋势,血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量呈降低趋势。【结论】断奶仔猪日粮中添加质量分数0.2% EGB效果最佳,此时EGB可降低断奶仔猪血脂含量,提高血清球蛋白水平和抗氧化能力。 相似文献
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为了比较国内弓形虫抗体检测试剂盒的质量差异,购买三种国产的弓形虫IgG抗体检测试剂盒,采用酶联免疫吸附试验对80份猪血清样本进行平行检测。结果表明:A、B、C三种弓形虫IgG抗体试剂盒检测的阳性率分别为87.5%、77.5%、83.8%;试剂盒A和B的符合率为87.5%,试剂盒A和C的符合率为93.8%,试剂盒B和C的符合率为88.8%;通过Kappa一致性检验,A和B、A和C、B和C试剂盒的Kappa系数分别为0.57,0.75,0.64,其中试剂盒A和B检测结果一致性强度为中度,试剂盒A和C与试剂盒B和C检测结果一致性强度都为高度。说明在这三种试剂盒中A和C检测效果较为一致,B试剂盒检测效果相对于A和C检测效果较差,但三种试剂盒的检测结果差异不显著(P0.05),三种国产试剂盒在对弓形虫IgG抗体的检测上没有很大差别。 相似文献
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【目的】研究银杏叶提取物(EGB)对断奶仔猪免疫功能的调节作用。【方法】将160头25日龄的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪随机分为4组,每组4个重复,每重复10头。第1组为对照组,饲喂基础日粮;第2、3、4组分别饲喂基础日粮中添加质量分数0.1%,0.2%或0.3%EGB的试验日粮。试验期为28d,分别于第14和28天采集血样,测定断奶仔猪的免疫功能指标。【结果】与对照组相比,日粮中添加质量分数0.2%或0.3%EGB可显著提高断奶仔猪血液红细胞数、淋巴细胞数、血红蛋白质量浓度和淋巴细胞百分率(P<0.05),促进血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA和补体C3、C4的生成以及细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌(P<0.05)。【结论】日粮中添加质量分数0.2%或0.3%EGB可增强断奶仔猪的免疫功能。 相似文献
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为建立检测副猪嗜血杆菌(H.parasuis)抗体方法,本研究以H.parasuis外膜蛋白Omp16为包被抗原建立了检测H.parasuis的间接ELISA方法。反应条件经优化为:抗原包被浓度为1μg/m L,血清稀释度为1:80;血清与抗原最佳作用时间为40 min,二抗稀释10 000倍,与一抗孵育30 min;TMB作用时间为30 min。利用该ELISA方法检测H.parasuis、胸膜肺炎放线杆菌、大肠杆菌和猪链球菌2型等血清,除H.parasuis为阳性外其余均为阴性,表明其特异性强。该ELISA方法可检测到最高稀释度为1∶512的阳性血清,敏感性高。重复性试验显示,其批内和批间的重复试验变异系数(CV)分别在3.62%~8.97%和4.3%~9.50%。该ELISA检测方法与进口ELISA试剂盒的阳性符合率、阴性符合率和总体符合率分别为87.8%,90.7%和88.6%。本研究建立的间接ELISA方法,为H.parasuis血清流行病学调查及疫苗免疫评价等提供了重要手段。 相似文献