诺如病毒和轮状病毒多重荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

诺如病毒和轮状病毒感染可引起临床高发且症状相似的胃肠炎，急需能够快速准确鉴定两种病毒的方法。用基因保守区域设计特异性引物和探针，通过引物优化、温度调整、性能评估等建立从粪便中特异性检出诺如病毒(GⅠ、GⅡ型)和A组轮状病毒试剂盒。结果显示，最低检测下限为1.0×10³ copies/mL,与当前交叉流行的其他16种病原均不发生特异性反应；组内及组间重复性良好，预混液在不同储存条件下，其检测能力与未处理组无差异。临床收集的276份腹泻样品，共检出诺如病毒GⅠ型15份，GⅡ型74份，A组轮状病毒45份，其检测结果与单一PCR检测结果一致。以上结果表明建立的三重荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、性能稳定等特点，将为2种3个型病毒的特异性检测和疫情防控提供技术支持。