基因芯片检测5种动物冠状病毒的初步研究

采用蔗糖密度梯度离心,纯化浓缩犬冠状病毒(CCV)、猫冠状病毒(FCV)、猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)的细胞培养物,分别设计7,17,11,10和4对引物,构建了49个基因片段的克隆。煮沸裂解法制备质粒DNA,回收PCR扩增产物,点制冠状病毒基因芯片。抽提病毒总RNA,利用Cy3-dCTP随机渗入反转录PCR标记,与芯片进行杂交检测,淘汰交叉的克隆片段。结果表明:克隆CCV1,CCV2,CCV5和CCV7可特异诊断CCV,克隆FCV6,FCV7,FCV8和FCV9可特异诊断FCV,克隆FIPV2,FIPV7,FIPV8和FIPV9可特异诊断FIPV,克隆PRCV1,PRCV2和PRCV3可特异诊断PRCV,克隆TGEV3,TGEV4,TGEV5和TGEV6可特异诊断TGEV。将这些特异克隆扩增片段重新点制基因芯片,与病毒PCR产物杂交,未发现交叉现象。基因芯片检测比传统PCR敏感1000倍,可有效应用于这5种动物冠状病毒的检测与区分。     

EQ6110客车电动AMT换挡策略

分析了客车换挡特点和原型车及C220发动机的特性，基于AVL Cruise软件建立了客车仿真模型，提出了适合于该客车电动式机械自动变速器换挡策略。仿真结果表明，在不降低原车动力性的条件下，设计的双参数换挡策略与单参数换挡相比可降低油耗2．4L／（100km），节油率达6．7％。单参数速度换挡仿真结果与试验结果基本一致，证明换挡策略是可信的。     

基于道路自动识别ABS模糊控制系统的研究

道路状况自动识别是保证车辆防抱制动系统（ABS）正常工作的前提，本文提根据制动压力，滑移率和车轮减速度进行道路自动识别的方法，并依此设计了ABS模糊控制器，结合7自由度车辆模型，考虑悬架和轮胎的非线性影响，对单一附着系数路变附着系数路面进行了ABS制动模拟试验，试验结果表明，基于路面自动识别ABS模糊控制系统能准确判断出路面状况的变化，据此调整控制策略，使车辆获得最大地面制动力和较好的横向稳定性，对比试验证明它优于传统PID控制，且具有较强的鲁棒性。     

车辆AMT离合器离散变结构控制

以车圆舞曲机械式自动变速系统（AMT）的离合器液压执行机构为研究对象，建立系统非线性动力学模型。进一步应用基于微分几何的反馈线性化方法，将原非线性系统等价为完全可控型线性化模型。在此基础上设计了离散变结构控制器，并且证明了离散变结构系统的稳定性，实验结果证明，这一控制器跟踪精度高，并且对系统的非线性和不确定性表现出很强的鲁棒性。     

棉花苗床管理把5关

一是开沟排水关及时开沟排水,防渍涝死苗.我省4月、5月寒潮频繁,阴雨天气多,对棉苗生长极为不利.播种后,苗床四周要及时开好排水沟,保持苗床雨天无渍水,爽土通气.     

稻鸭鱼共生模式及技术

稻田养鸭、养鱼把传统的靠化肥、农药种植水稻的单一模式，调整为“稻 鸭 鱼”的复合种养模式。该模式实现产品无公害、绿色化，是一种稳粮增效的稻田高效种植新模式。介绍了该模式的生产特色与技术要点。     

猪源牛病毒性腹泻病毒套式PCR检测方法的建立

根据GenBank中BVDV-1、BVDV-2、CSFV及新出现瘟病毒的基因序列,设计2对特异引物,建立了能鉴别诊断BVDV与CSFV的Nested-PCR检测方法;确定其方法的特异性、敏感性、稳定性。建立的Nested-PCR能从BVDV标准毒株、猪源BVDV毒株中扩增198bp特异性片段,对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒检测结果为阴性。结果表明,该方法具有较好特异性;其敏感性可检测到0.195fg RNA模板量;经重复性试验表明该方法具有良好稳定性。初步应用检测表明,猪BVDV阳性率较高,达36.0%;牛血清及其制品、猪瘟活疫苗BVDV污染严重。本试验建立的Nested-PCR具有敏感、特异和稳定等特点,可用于临床诊断和流行病学调查。     

油菜高产优质栽培配套技术(下)

2.棉花油菜套栽技术 棉花-优质油菜种植模式主要推广棉花、油菜套栽技术.棉地畦宽2米(包沟),棉花2组4行.中间宽行70厘米,两边窄行30厘米.油菜于10月上旬移栽于棉地预留行间.在宽行内栽2行油菜,窄行内栽1行油菜,株距20厘米,保证每667平方米栽6000株～7000株.因棉地较肥沃,油菜密度较小.所以基肥用量可比稻田适当减少.棉花扯秆后,及时中耕除草、灭茬填穴、清沟排渍.     

油—瓜—稻两高一优配套生产技术

油菜套栽无籽西瓜连作晚稻三熟制的耕作模式，近年在澧县发展很快。2000年全县仅1，95万亩．2003年扩大到12万亩。据调查，该模式一般每亩产油菜籽90公斤。产值198元，无籽西瓜1800～2300公斤．产值1000～1380元，晚稻450公斤．产值595元，三熟产值达1793～2173元，扣除直接生产成本575元后，