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1.
本研究旨在获得鸡胚胎外胚层发育(embryonic ectoderm development,EED)原核表达蛋白,并利用生物信息学方法探索其潜在生物学功能。以提取的3日龄雏鸡脾脏总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增鸡EED基因,将其克隆至pET-32a (+)载体,构建重组表达载体pET-32a-EED,转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中进行IPTG诱导表达;Western blotting检测经镍离子亲和层析法纯化的鸡EED蛋白,并利用在线软件对其进行生物信息学分析。结果显示,鸡EED基因序列全长1 341 bp,与参考序列(GenBank登录号:NM_001031376.1)相似性为99.85%;当诱导温度为28 ℃,加入终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导剂诱导表达7 h时,可在重组菌裂解上清中纯化得到分子质量约70 ku的鸡EED融合蛋白。在线软件分析表明,鸡EED蛋白相对分子质量为50 377.92,理论等电点(pI)为6.54,为亲水蛋白,无跨膜结构域和信号肽序列,该蛋白序列与人多疏蛋白EED三级结构模板序列(6c23.1)相似,同样具有肿瘤靶点WD40结构域。结果表明,本研究成功获得大肠杆菌表达的鸡EED可溶性蛋白,且该蛋白具有重要的功能元件,可为深入探索鸡EED蛋白的生物学功能与调控机理提供材料。  相似文献   
2.
近些年来,随着社会经济的快速发展和人民生活水平的不断提升,我国宠物事业得到了可持续发展的重要契机与良好的社会环境。宠物越来越频繁地出现在人们的生活中,随之而来的宠物源性人畜共患病也相应增多,宠物疫病的控制已经成为社会共同关注的话题。  相似文献   
3.
弓形虫病属于一种分布范围非常广泛的人畜共患原虫病,幼犬、猫的发病率比较高。弓形虫宿主非常广泛,目前国内对弓形虫病的研究以家禽为主要研究对象,针对宠物犬弓形虫病诊疗及流行病学进行探讨对人类健康也有积极意义。  相似文献   
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