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本试验旨在研究植物提取物白藜芦醇(RES)对牛皮下脂肪细胞凋亡率以及去乙酰化酶1(SIRT1)/腺苷一磷酸激活的蛋白激酶(AMPK)信号通路关键因子的mRNA和蛋白质表达量的影响。选取18月龄鲁西黄牛的皮下前体脂肪细胞,在细胞分化的第0天,更换为RES浓度分别为0(对照)、100、200和400μmol/L的培养液处理48 h,每组设3个重复。应用Hoechst33342染色检测细胞凋亡的形态学变化,流式细胞分析仪检测细胞凋亡率,荧光定量PCR(q PCR)和免疫印迹试验(Western-blot)分别检测SIRT1/AMPK信号通路上的关键因子SIRT1、A MPKα、叉头转录因子1(Fox O1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA和蛋白质表达量,并利用油红O染色鉴定脂肪细胞。结果表明,与对照组相比:不同浓度RES处理后的牛皮下脂肪细胞凋亡率均极显著增高(P0.01);不同浓度RES处理后的SIRT1、AMPKα、caspase-3、Bax的mRNA表达量均显著或极显著提高(P0.05或P0.01),Bcl-2的mRNA表达量极显著降低(P0.01);不同浓度RES处理后的SIRT1、AMPKα、caspase-3的蛋白质表达量均显著或极显著提高(P0.05或P0.01);200和400μmol/L RES处理后,Fox O1的mRNA和蛋白质表达量显著或极显著提高(P0.05或P0.01),Bax的蛋白质表达量极显著提高(P0.01),Bcl-2的蛋白质表达量极显著降低(P0.01)。100μmol/L RES处理后时,Fox O1的mRNA和蛋白质表达量以及Bcl-2、Bax的蛋白质表达量均与对照组差异不显著(P0.05)。由此可见,RES通过激活SIRT1/AM PK信号通路,同时激活通路下游的Fox O1,促进了牛皮下脂肪细胞的凋亡,为通过营养调控技术降低牛皮下脂肪沉积提供了一定的理论基础。 相似文献
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本试验旨在建立肉用杂交犊牛小肠上皮细胞分离培养和鉴定的方法,为研究犊牛小肠上皮细胞营养吸收、免疫调控及肠道屏障功能提供原代细胞培养模型。选用新生未吮乳的肉用杂交犊牛的空肠组织,应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化法对小肠上皮细胞进行分离,应用相差消化法和相差贴壁法对犊牛小肠上皮细胞进行纯化。通过细胞形态学观察、生长曲线、免疫荧光及染色体核型分析等方法来鉴定细胞。结果表明:1)应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化法得到的犊牛小肠上皮细胞生长状况良好,经纯化后得到90%以上纯度的犊牛小肠上皮细胞,并稳定传代至10代以上; 2)犊牛小肠上皮细胞的生长曲线为"S"形,符合细胞增殖规律; 3)免疫荧光鉴定犊牛小肠上皮细胞特异性表达角蛋白13和绒毛蛋白; 4)透射电镜观察发现犊牛小肠上皮细胞边缘有微绒毛结构,细胞与细胞之间的紧密连接结构清晰可见; 5)染色体核型分析显示细胞内含有60条染色体,形态正常,呈二倍体核型。综上所述,应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化及相差贴壁纯化成功得到犊牛小肠上皮细胞,为研究犊牛小肠上皮细胞营养物质吸收、免疫调控和肠道屏障功能提供了细胞素材。 相似文献
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重组猪乳铁蛋白N端多肽对环磷酰胺免疫抑制小鼠免疫功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
研究旨在观察重组猪乳铁蛋白N端多肽(rPLFN)对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响。选用体重18~21g的雄性ICR小鼠40只,按试验要求随机分成4组,即12.5mg/kg rPLFN组、25mg/kgrPLFN组、环磷酰胺组和对照组,每组10只;按设计剂量灌胃给药,在第12天时用环磷酰胺50mg/kg腹腔注射建立小鼠免疫低下模型,至第16天检测各组小鼠脾淋巴细胞增殖反应和血清IL-2、TNF-α、IFN-γ含量。结果表明:25mg/kg rPLFN组能拮抗环磷酰胺对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的抑制作用(P<0.05);25mg/kg rPLFN组血清中IL-2、IFN-γ、TNF-α含量显著高于模型组(P<0.05)。结果表明,rPLFN对环磷酰胺免疫抑制小鼠的免疫功能有一定的恢复和增强作用。 相似文献
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【目的】旨在探讨饲粮中不同油菜籽添加水平对肉牛生长性能、瘤胃发酵及血液生化指标的影响,从而为肉牛育肥过程中合理使用油菜籽提供依据。【方法】试验采用单因子完全随机设计,选取18月龄、平均初始体重为(447±35.67)kg的西门塔尔杂交公牛40头,依据饲粮中油菜籽含量随机分为对照组(0%)、低菜籽组(8.7%)、中菜籽组(17.4%)、高菜籽组(26.0%),预饲期10 d,正试期90 d。试验结束后称重,计算饲料成本,并采集瘤胃液和血液分别用气相色谱法、比色法和放射免疫法测定瘤胃液挥发性脂肪酸、氨态氮和血清中三碘甲状腺原氨酸酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺素(TSH)。用SAS9.2软件中一般线性模型对试验数据进行方差分析。【结果】试验结束各组牛末重之间差异不显著(P>0.05),中菜籽组日增重最高,为1.33 kg•d-1,显著高于高菜籽组(P<0.05),比对照组和低菜籽组分别高6.40%和7.25%;高菜籽组干物质采食量最高,对照组最低,但各组之间差异不显著(P>0.05)。随油菜籽添加水平的提高,饲料成本降低(P>0.05);中菜籽组料重比最低,高菜籽组最高,各组之间差异不显著(P>0.05);不同油菜籽添加水平不显著影响瘤胃液pH、氨态氮以及挥发性脂肪酸的含量(P>0.05),但随油菜籽添加水平的提高瘤胃液中氨态氮、丁酸和乙酸/丙酸的含量呈降低的趋势,丙酸呈上升趋势,总的挥发性脂肪酸先上升后降低;血清中三碘甲腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4)各组之间差异不显著(P>0.05),中菜籽组和高菜籽组血清中促甲状腺素(TSH)显著低于对照组(P<0.05),与低菜籽组差异不显著(P>0.05)。饲粮油菜籽添加水平对血清中谷丙转氨酶、肌酐、胆固醇含量影响差异不显著(P>0.05),对照组和低菜籽组的谷草转氨酶活性显著低于中菜籽组和高菜籽组(P<0.05),中菜籽组尿素氮水平显著低于对照组(P<0.05),与其它各组差异不显著(P>0.05)。【结论】添加不同水平的油菜籽对瘤胃发酵参数无显著影响,肉牛育肥期间饲粮油菜籽添加到17.4%时日增重不受影响,饲粮中添加油菜籽可加重甲状腺和肝脏的代谢负担。 相似文献
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抗菌肽与抗生素对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的体外协同抗菌效果研究 总被引:2,自引:1,他引:1
本试验旨在研究抗菌肽与抗生素联合使用对革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌的作用效果.通过最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)测定,联合药敏试验,研究牛乳铁蛋白肽(Lactoferricin B,LFcin B)、天蚕素A(Cecropin A)及金霉素、新霉素对大肠杆菌(Escherichia coli ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(Staphylo-coccus aureus ATCC25923)、猪霍乱沙门氏菌(Salmonella choleraesuis CMCC50013)、铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa CMCC10014)的体外协同抗菌效应.结果表明:Cecropin A与LFcin B联合使用对所试革兰氏阴性菌均表现为协同作用,两者联用时的MIC分别是单用时的1/4和1/8~1/4;金霉素与LFcin B联合使用对革兰氏阴性菌和阳性菌表现为协同作用,两者联用时的MIC是单用时的1/8~1/4;另外,Cecropin A与金霉素联合使用对革兰氏阴性菌也表现为协同作用.4种药物的两两合用对受试菌株均不表现拮抗作用.结果提示,LFcin B、Cecropin A及金霉素联合使用对革兰氏阴性菌及阳性菌具有协同作用. 相似文献
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试验选取40头体况良好、平均初始体重为(335±25.67)kg的奶牛公犊,随机分为4组(Ⅰ组,Ⅱ组,Ⅲ组和Ⅳ组),每组10头牛,分别饲喂由玉米、小麦、白酒糟和棉粕四种原料按不同比例组成的4种不同组合的日粮,以研究小麦作为主要原料时,添加不同水平酒糟和DDGS时,饲料的组合效应。预饲期10d,正式期90d。结果表明,不同处理对牛增重1kg饲料成本有显著影响(P0.05),Ⅰ组最低为12.69元/kg,比Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组分别降低16.34%、15.03%和12.84%。试验牛的宰前活重以Ⅲ组最高为548.60kg,Ⅱ组最低为527.40kg,各组间宰前活重无显著差异(P0.05)。胴体重和屠宰率Ⅰ组显著高于Ⅳ组(P0.05),与其它两组之间差异不显著(P0.05)。在奶公犊日粮中添加小麦作为饲料原料时,适当的增加白酒糟和DDGS的用量,会出现比较满意日粮组合效应。 相似文献
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为提高肉牛生长性能、大幅度降低肉牛的饲养成本,本试验研究了添加不同量大麦的发酵酒糟对延边黄牛育肥性能的影响,以期为开发大麦和白酒糟混合发酵的新型饲料资源提供依据。本试验选择40头体重(453.6±36.0)kg、健康且体况毛色一致的延边黄牛,根据体重相近原则,分为4个处理组(纯酒糟组、17%大麦组、34%大麦组、51%大麦组),分别饲喂相应的发酵酒糟。结果表明:在0~90 d试验期内,黄牛体重增重和平均日增重均以34%大麦组最高,在血液生化指标方面,碱性磷酸酶、葡萄糖、甘油三酯、总蛋白、白蛋白含量同样以34%大麦组最高,且上述指标均以纯酒糟组最低。综上所述,添加34%大麦的发酵酒糟对肉牛育肥效果最显著。 相似文献
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