基于专利分析中国番茄产业技术发展研究

以上海知识产权（专利信息）公共服务平台检索系统作为统计源,借助专利情报分析方法,对中国番茄的专利申请量、布局、技术研究重点、申请人情况、主要申请人的研究方向等方面进行分析,揭示中国番茄领域专利技术的分布规律及特征,探究中国番茄领域技术创新能力与技术水平,从而为番茄领域的技术研究提供参考依据。     

Seaweed polysaccharide mitigates intestinal barrier dysfunction induced by enterotoxigenic Escherichia coli through NF-κB pathway suppression in porcine intestinal epithelial cells

This study aimed to investigate the protective effects and underlying mechanism of seaweed polysaccharide (SWP) on intestinal epithelial barrier dysfunction induced by E. coli in an IPEC-J2 model. A preliminary study was done to screen optimum SWP concentrations by cell viability, cytotoxicity, apoptosis and proliferation evaluation. The regular study was conducted to evaluate the protective effects of SWP against E. coli challenge via the analysis of transepithelial electrical resistance (TEER), tight junction proteins, NF-κB signalling pathway, proinflammatory cytokines and the E. coli adhesion and invasion. Our results show that 4 h E. coli challenge down-regulated tight junction proteins expression, decreased TEER, activated NF-κB signalling pathway and increased proinflammatory response, which indicates that the E. coli infection model was well-established. Pre-treatment with 240 μg/ml SWP for 24 h alleviated the 4 h E. coli -induced intestinal epithelial barrier dysfunction, as evidenced by the up-regulated expression of Occludin, Claudin-1 and ZO-1 at both mRNA and protein level and the increased TEER of IPEC-J2 cells. Pre-incubation with 240 μg/ml SWP for 24 h inhibited the activation of the NF-κB signalling pathway by 4 h E. coli challenge, including the decreased mRNA expression of TLR-4, MyD88, IκBα, p-65, as well as the reduced ratio of protein expression of p-p65/p65. Also, pre-treatment with 240 μg/ml SWP for 24 h decreased proinflammatory response (IL-6 and TNF-α) induced by 4 h E. coli challenge and decreased the E. coli adhesion and invasion. In conclusion, SWP mitigated intestinal barrier dysfunction caused by E. coli through NF-κB pathway in IPEC-J2 cells and 240 μg/ml SWP exhibited better effect. Our results also provide a fundamental basis for SWP in reducing post-weaning diarrhoea of weaned piglets, especially under E. coli -infected or in-feed antibiotic-free conditions.     

牦牛CRH基因克隆及其在生殖轴中的表达研究

为了探讨促肾上腺皮质激素释放激素（corticotropin-releasing hormone，CRH）基因在牦牛繁殖中的调控作用，试验分别采集5头成年母牦牛和5头成年母黄牛的下丘脑、脑垂体前叶、输卵管、卵巢和子宫等组织，通过RT-PCR技术及生物信息学软件对牦牛CRH基因编码区进行扩增、克隆及序列分析，并构建系统进化树；采用实时荧光定量PCR法检测CRH基因的组织表达。结果表明，牦牛CRH基因编码区全长573 bp，编码190个氨基酸。牦牛与黄牛、猫、鸡、人、小鼠、大鼠和猪的CRH基因核苷酸同源性分别为99.8%、43.3%、36.1%、46.2%、39.0%、38.5%和56.4%。系统进化树表明，牦牛与黄牛亲缘关系最近，并与其他物种类聚，符合物种进化规律。CRH蛋白分子式为C₉₂₀H₁₅₀₃N₂₇₉O₂₆₃S₃，分子质量为20776.95 u，理论等电点为10.95，其氨基酸组成中亮氨酸（L）、脯氨酸（P）、丙氨酸（A）和精氨酸（R）所占比例较高，分别为15.8%、12.6%、12.1%和10.5%。CRH蛋白为不稳定亲水蛋白，存在信号肽和跨膜结构。CRH蛋白二级结构中α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲分别占41.05%、1.05%、8.42%和49.48%，三级结构分析结果与其相一致。CRH基因mRNA在牦牛下丘脑中表达量最高，显著高于其他组织（P<0.05），在子宫中表达量最低。牦牛脑垂体前叶CRH基因mRNA表达量极显著高于黄牛（P<0.01），在卵巢、输卵管中表达量显著高于黄牛（P<0.05），而两个品种在下丘脑、子宫中的表达量差异不显著（P>0.05）。提示CRH基因在牦牛繁殖调控中具有重要作用。     

斜纹夜蛾Toll受体基因的全基因组分析及其在杀虫剂抗性中的作用

利用公布的斜纹夜蛾基因组对TLRs基因进行全基因组分析,应用生物信息学工具分析斜纹夜蛾TLRs家族基因成员在鳞翅目害虫TLRs基因家族中的进化关系、组织表达特异性,结合转录组数据对农药反应敏感的TLRs进行基因表达及其调控网络进行分析,分析斜纹夜蛾Toll受体基因在杀虫剂抗性中的作用.结果表明:共分析出了7个TLRs基因,斜纹夜的TLRs家族基因与棉铃虫TLRs家族基因同源性较高.7个基因中的1个基因SLTLR3在肠道中高度表达,有5个TLRs基因对农药处理反应敏感.对农药反应敏感的TLRs进行基因表达和其网络进行分析,只发现了1个TLRs(SLTLR7)和其他30个基因之间的存在共表达关系,这些基因主要涉细胞表面受体信号途径、细胞定位、信号传导、细胞调控过程、生物调控过程.     

包膜甜菜碱与有机铬复合物对夏季奶牛产奶性能和血液生化指标的影响

旨在研究包膜甜菜碱和有机铬复合物对夏季奶牛产奶性能和血液生化指标的影响。选择年龄、胎次、泌乳时间和产奶量相近100头泌乳牛,随机分为对照组和试验组,每组50头,对照组饲喂原奶牛场配方日粮,试验组在每天早晨TMR日粮中添加50 g/d包膜甜菜碱和有机铬复合物。结果:与对照组相比,试验组奶牛采食量显著提高(P<0.05),牛奶中体细胞含量显著降低(P<0.05);奶牛乳酸脱氢酶(LDH)含量显著提高(P<0.05);磷酸肌酸激酶(CPK)含量显著降低(P<0.01),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)含量有上升趋势,丙二醛(MDA)、碱性磷酸酶(ALP)含量有下降趋势,但差异均不显著。试验表明包膜甜菜碱和有机铬具有提高热应激期奶牛采食量、促进代谢和蛋白质合成、缓解奶牛热应激的作用。     

基于高通量测序的技术检测梨树病毒

【目的】 研究运用基于高通量测序的技术检测梨树病毒,为梨树病毒的检测提供新方法。【方法】 于2014年、2017年、2018年4月中旬采集库尔勒香梨花朵若干,分别进行转录组测序,将得到的序列经过转录本拼接、层次聚类和基因功能注释,筛选出注释为植物病毒的序列作为候选病毒序列。利用RT-PCR方法检测随机采集的香梨枝条样品,验证高通量测序结果的可靠性。【结果】 根据3组转录组测序数据的生物信息学分析结果,分别对注释为来源于植物病毒的66、202和921条基因序列进行分析。3种梨树中已报道的病毒,分别是苹果茎痘病毒、苹果茎沟病毒和苹果褪绿叶斑病毒,以及梨树中未报道的芸薹黄化病毒。采用设计的特异性引物,通过RT-PCR技术对筛选出的4种病毒进行扩增验证,结果扩增出苹果茎痘病毒和苹果茎沟病毒的目的片段。【结论】 高通量测序技术可作为检测梨树病毒的一种快速、有效手段。     

全麦粉和小麦粉中烷基间苯二酚同系物组成的对比分析

【目的】 建立全麦粉标记物烷基间苯二酚（ARs）的高效液相检测方法,对全麦粉和小麦粉中ARs同系物组成进行分析,实现全麦粉真伪品质评价。【方法】 探究高效液相条件,建立ARs同系物5-十七烷基间苯二酚（C17:0）、5-十九烷基间苯二酚（C19:0）、5-二十一烷基间苯二酚（C21:0）、5-二十三烷基间苯二酚（C23:0）和5-二十五烷基间苯二酚（C25:0）的高效液相检测方法,并进行方法学评价。以国内外全麦粉、小麦粉及小麦麸皮等共47份样品为研究对象,测定ARs同系物的含量,分析其ARs同系物组成,并进行热图分析和主成分分析。【结果】 选用ZORBAX SB-C18（150 mm×4.6 mm,5 μm,Agilent）色谱柱,流动相选用0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸甲醇溶液进行梯度洗脱,在紫外检测波长280 nm、柱温35℃、流速0.5 mL·min^-1、进样量20 μL条件下,可在35 min内有效分离5种ARs同系物,各个同系物的色谱峰峰形对称,分离度好。经方法学评价,该方法具有良好的精密度和灵敏度,标准曲线线性相关系数均大于0.999,检出限为0.06—0.19 μg·mL ^-1,回收率为81.16%—112.92%,精密度标准偏差为0.02%—4.02%,可作为ARs同系物的测定方法。通过热图聚类分析可知不同检测样品中ARs同系物组成及总量存在显著差异（P<0.05）。麦粉样品ARs同系物组成中C21:0最多,占33%—61%;C19:0次之,占12%—44%;C17:0、C23:0和C25:0的含量占比较小。美国、加拿大全麦粉的ARs同系物组成丰富度和含量相近,国外全麦粉中ARs同系物组成含量高于国内全麦粉。国内全麦粉中的ARs同系物组成比小麦粉中的ARs同系物组成丰富度高,但个别小麦粉除外。小麦麸皮F₁中ARs同系物组成和总含量显著高于全麦粉和小麦粉,其ARs总含量高达1 795.78 μg·g^-1,与其他样品相比差异显著（P<0.05）。经主成分分析得出,麦粉样品间的主要差异指标为ARs同系物组成含量,作为第1主成分,其累积贡献率为98.40%。小麦麸皮与其他麦粉样品的相对分散最远,中国小麦粉的分散度最大。美国全麦粉和加拿大全麦粉几乎重叠,而中国全麦粉和部分小麦粉与美国、加拿大全麦粉部分交叉。【结论】 本研究建立的液相方法能够有效、快速的对全麦粉中ARs同系物进行定量,适用于麦类全谷物产品中ARs同系物含量的测定。同时,通过全麦粉和小麦粉中ARs同系物组成对比分析可知,全麦粉中的ARs同系物组成丰富度优于小麦粉中的ARs同系物组成丰富度。     

透气型砂栽培研究进展与前景分析

透气型砂栽培（Sandponics）是生态环保、低成本、低技术的无土栽培技术,符合当前中国国情和世界无土栽培发展趋势。阐明透气型砂栽培系统的组成结构,提出透气型砂栽培基质的粒径、含盐量、含泥量和酸碱度等理化指标,探讨砂栽培营养液元素种类和要求,分析透气型砂栽培生产可持续性理论基础,建立透气型砂栽培技术标准,为透气型砂栽培的进一步研究和生产实践提供参考。分析透气型砂栽培蔬菜产品的含糖量、亚硝酸盐含量、重金属含量等营养品质。总结透气型砂栽培的特点和所具备的生态意义、社会意义,分析透气型砂栽培在都市农业和南海岛屿蔬菜生产实践中的应用前景。     

超高效液相色谱串联质谱非衍生化法测定土壤中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸含量

为了建立土壤中草甘膦(Glyphosate）及其主要代谢物氨甲基膦酸(AMPA)残留的定量分析方法,采用固相萃取结合液相色谱串联质谱技术,样品以磷酸钠和柠檬酸三钠混合溶液提取,经固相萃取柱净化,采用正向亲水性液相色谱柱(Hilic)梯度洗脱,通过质谱的多反应监测(MRM)负离子模式扫描进行测定,外标法定量。结果表明:草甘膦、氨甲基膦酸的线性范围为0.02~0.2 μg/mL,相关系数(R²)分别为0.9995、0.9998,检出限分别为0.5 μg/kg和0.6 μg/kg,定量限分别为1.6 μg/kg和2.0 μg/kg;3个加标水平草甘膦的回收率在79.67%~96.17%之间,AMPA回收率在77.83%~99.47%之间,RSD值分别为3.95%~7.49%、1.96%~3.89%。与传统的柱前衍生方法相比,具有前处理简单、检出限低、灵敏度高的优点,完全可以适用于土壤中草甘膦的分析。     

马尾松人工幼林营养综合诊断

采用 DRIS 诊断法对广西 6~8 a 生马尾松 Pinus massoniana 人工幼林高、低产组针叶进行营 养诊断，测定 10 种矿质营养元素 (N、P、K、Ca、Mg、Zn、Fe、Cu、Mn 和 B) 的含量，探讨马尾松人 工幼林养分需求规律，制定马尾松人工幼林养分平衡诊断标准。结果表明：广西马尾松人工幼林的需肥 顺序为 P ＞ B ＞ K ＞ Zn ＞ N ＞ Mn ＞ Mg ＞ Fe ＞ Ca ＞ Cu，最缺乏的元素是 P，其次是 B、K、N、 Zn，最不缺乏的是 Ca、Cu。针叶 N、P、K 元素浓度比值范围为 N/P = 12.81 ±3.75、N/K = 2.62±0.30、 P/K=0.22±0.08。 马 尾 松 工 幼 林 叶 片 养 分 适 宜 范 围 为：N 9.36~15.44、P 0.72~1.29、K 3.84~5.63、Ga 3.65~5.63、Mg 0.31~1.53 g · kg-1、Cu 2.14~3.01、Zn 20.66~66.42、Fe 30.26~203.19、Mn 330.02~561.38、 B1.13~15.71 mg · kg-1。根据该诊断标准可有效诊断马尾松针叶营养元素丰缺程度，指导林农“对症下 药”，实现精准施肥。