伽氏疏螺旋体尚志株P66基因的原核表达与鉴定

为获得伽氏疏螺旋体尚志株（B. garinii SZ）的P66蛋白,本研究从培养的螺旋体菌液中提取总RNA,反转录合成第一链cDNA,利用PCR扩增P66基因。将目的片段连接表达载体pET-30a（+）,并转化大肠杆菌表达菌BL21（DE3）,经PCR、双酶切及测序验证正确后,进行IPTG诱导表达和纯化,然后将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。SDS-PAGE结果显示,获得约70 ku的表达产物;Western blotting分析表明,表达产物与抗His标签的小鼠单克隆抗体、螺旋体鼠源阳性血清、兔抗P66多克隆抗体均能发生反应,获得的多克隆抗体也可识别天然蛋白。本试验成功表达了B. garinii SZ株P66蛋白,并制备了多克隆抗体,为后续B. garinii SZ株P66蛋白的功能研究奠定了基础。     

利用BrdU在CEF(TK~ )细胞中筛选TK~-重组鸡痘病毒

将新城疫病毒 (NDV)四平株 HN基因 ,插入不含报告基因、以 TK为侧翼的鸡痘病毒表达载体 p UTA- 2中的复合启动子下游 ,获得重组表达质粒 p UTA- 2 HN。将重组表达质粒转染鸡痘病毒 (FPV)感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,培养、收获病毒后 ,用含 40 m g/ L 5 -溴 - 2 -脱氧尿嘧啶 (Brd U )的培养液 ,在 CEF(TK )细胞中筛选培养 2代 ,然后用不含 Brd U的培养液进行病毒蚀斑纯化 ,成功筛选出表达 NDV HN蛋白的 TK-重组鸡痘病毒     

RT-PCR结合限制性内切酶分析法区分NDV强弱毒株

通过设计的特异引物，采用RT-PCR对1996年以来分离的45株国内新城疫病毒分离株进行鉴定和分析，并与其MDT实验结果进行比较，建立了RT-PCR结合BglⅠ内切酶分析区分新城疫强弱毒的方法。此方法操作简便、迅速，不仅能区分新城疫的强弱毒株，还可诊断AMPV-1引起的其他禽类的感染。     

新西兰鹿的福利及实施措施

新西兰鹿业协会为加大鹿及鹿产品在国际市场上的竞争力,积极实施鹿福利制度。文中主要介绍了新西兰在鹿的运输、锯茸及饲养管理等方面所实施的具体福利措施。     

日本结缕草叶斑病病原鉴定及其生物学特性研究

从日本结缕草Zoysia japonica发病叶片上分离得到病原菌,对病原菌进行形态特征观察、致病性测定及其生物学特性研究.结果表明,该病原菌为Bipolaris hawaiiensis.该菌能利用多种碳源和氮源,其中以蔗糖为最适碳源,以KNO3为最适氮源;菌丝生长最适温度为25～30 ℃;最适pH值7～9.菌丝的致死温度为70℃/15 min.PDA平板药剂筛选结果表明,30%爱苗的抑菌效果最好,15%三唑酮的效果最差.     

降低生长肥育猪饲料中磷酸氢钙水平的研究

分30-60kgBW、60～100kgBW和30～100kgBW三个阶段研究了降低饲料中磷酸氢钙水平及降低磷酸氲钙的同时添加植酸酶对猪生长性能的影响。结果表明：磷酸氢钙添加水平在生长猪（30～60kgBW）饲料中由对照组的0．920％降低到0．552％、肥育猪（60-100kgBW）饲料中由对照组的0．760％降低到0．380％时都没有显著降低猪的生长性能（P〉0．05），降低磷酸氢钙的同时添加植酸酶虽没有显著提高猪的生长速度（P〉0．05），但能降低料肉比，其中在全阶段（30～100kgBW）的作用显著（P〈0．05）。     

鹿血清蛋白抗氧化肽体外抗氧化性及其机理研究

在碱性蛋白酶最适条件下水解鹿血清蛋白,水解时间为0~5 h,鹿血清蛋白抗氧化肽的水解度(DH)随着水解时间增加而增加(P0.05),鹿血清蛋白抗氧化肽还原能力、清除自由基的作用和Cu2+螯合能力随着水解时间的增加而显著提高(P0.05),鹿血清蛋白抗氧化肽能有效抑制硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)生成(P0.05)。结果表明,鹿血清蛋白抗氧化肽的抗氧化活性取决水解时间,鹿血清蛋白抗氧化肽是有效的抗氧化剂。     

青海血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选和阳性克隆的鉴定

为获得抗青海血蜱免疫原基因，用免抗青海血蜱差异蛋白阳性血清和兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清对青海血蜱cDNA表达文库进行了免疫学筛选，经过初筛和复筛共获得58个阳性信号。用所得阳性噬菌体转染宿主菌BM25．8使之自动亚克隆为重组质粒，用此亚克隆质粒转化宿主菌JM109并从中提取重组质粒进行PCR、酶切和测序分析。序列分析表明：共获得新cDNA序列21个。将前5个cDNA登录GenBank／ncbi，获取登录号。所获阳性克隆为青海血蜱保护性抗原的筛选奠定了基础。     

利用广义线性模型预测家畜离散性状育种值

将广义线性混合模型(GLMM)引入动物离散性状的遗传分析及个体的遗传评定,初步比较了GLMM方法与一般线性方法(LM)的估计效果。模拟研究的性状为单阈值二项分类性状,选用的连接函数为对数连接μi=eη/(1+eη),方差函数为V(μi)=μ(i1-μi)/n,试验设计为全同胞-半同胞混合家系,参数估计采用Fisher迹法。结果表明:GLMM方法能较准确地估计公畜的个体育种值,在个体的遗传评定效果方面要明显优于常规的线性方法,其预测的育种值排序结果与真实育种值的排序之间存在极显著的相关性(P<0.001)。     

猪繁殖-呼吸综合征活疫苗对仔猪的安全性试验

本试验用猪繁殖-呼吸综合征（PRRS）活疫苗和国内分离的PRRS强毒CH—1a株接种PRRS阴性的断奶仔猪，分别在接种后的3、7、14d各剖杀1头，取各脏器分别做冰冻切片和病理切片观察。用间接免疫荧光法检测各脏器PRRS病毒的分布。结果表明，PRRS活疫苗在免疫初期，抗原主要分布在脾脏、淋巴结，其次是肾脏和肺脏，少见于肝脏和心脏，第14d时在脾、淋巴结和肾脏有一定量的抗原，而肺脏相比则数量很少，肝脏和心脏未检到PRRS病毒抗原的存在，表明接种PRRS活疫苗随着时间的推移抗原分布呈下降趋势。而强毒抗原分布以脾脏最多，依次是肾脏、肺脏、淋巴结、肝脏、心脏，接种后第14d仍能在各脏器检到PRRS病毒抗原。病理组织学检测结果表明，活疫苗产生以下颌淋巴结、脾脏增生为特征的免疫应答，组织损伤轻微，对肺的病变较少，且仔猪生长良好。强毒则引起以大面积的肺泡隔增宽为特点的间质性肺炎和微循环障碍的病理变化，淋巴小结、脾脏滤泡发生崩解与周围界限不清，个别淋巴细胞核浓缩，组织损伤严重。本试验表明弱毒疫苗对仔猪是安全的。