鸡Mx基因的克隆与原核表达

本研究旨在通过克隆鸡Mx全基因序列进而进行该基因的原核表达,获得具有生物学活性的蛋白.利用poly Ⅰ:C诱导鸡胚成纤维细胞Mx基因表达,克隆了Mx基因全长cDNA序列,将开放阅读框(ORF)连接构建于表达质粒pGEX-4t-2中获得重组表达载体pGEX-Mx,转化Rosetta(DE3)菌株,经IPTG诱导后检测.表达产物检测显示该蛋白的相对分子量为75 ku.说明获得了Mx基因的高效表达,为进一步进行Mx基因的活性检测以及利用Mx蛋白进行抗病毒转基因的研究奠定了基础.     

Physiological but not morphological adjustments along latitudinal gradients in a human commensal species,the Eurasian tree sparrow

Human commensal species take advantage of anthropogenic conditions that are less likely to be challenged by the selective pressures of natural environments. Their morphological and physiological phenotypes can therefore dissociate from habitat characteristics. Understanding how these species adjust their morphological and physiological traits across latitudinal gradients is fundamental to uncovering the eco-physiological strategies underlying coping mechanisms. Here, we studied morphological traits in breeding Eurasian tree sparrows (ETSs; Passer montanus) among low-latitude (Yunnan and Hunan) and middle-latitude (Hebei) localities in China. We then compared body mass; lengths of bill, tarsometatarsus, wing, total body, and tail feather; and baseline and capture stress-induced levels of plasma corticosterone (CORT) and the metabolites including glucose (Glu), total triglyceride (TG), free fatty acid (FFA), total protein, and uric acid (UA). None of the measured morphological parameters varied with latitude except in the Hunan population, which demonstrated longer bills than those in other populations. Stress-induced CORT levels significantly exceeded baseline levels and decreased with increasing latitude, but total integrated CORT levels did not vary with latitude. Capture stress-induced significantly increased Glu levels and decreased TG levels, independent of site. However, the Hunan population had significantly higher baseline CORT, baseline and stress-induced FFA levels, but lower UA levels, which differed from other populations. Our results suggest that rather than morphological adjustments, physiological adjustments are mainly involved in coping mechanisms for middle-latitude adaptation in ETSs. It is worth investigating whether other avian species also exhibit such dissociation from external morphological designs while depending on physiological adjustments.     

一株新城疫病毒弱毒株的分离鉴定

于１９９６年８月从长春地区－－养鸡场分离到一株新城疫病毒,该毒株经过鸡胚传代培养,病毒形态学观察,血凝谱测定、鸡胚平均致死时间试验、鸡脑内致病指数试验、脉致病指数试验及１入毒试验等生物学特性结果表明该新城商株为弱毒株。     

Cas9基因编辑技术对巴马小型猪生命体征的影响

为探讨Cas9基因编辑技术应用在小型巴马猪时,在麻醉状态下对其生命体征的影响和重要脏器组织学变化,为基因编辑巴马猪在麻醉手术中的应用提供基础生理数据.使用诱导麻醉配合呼吸麻醉对20头野生型巴马猪和24头Cas9基因编辑型巴马猪进行麻醉,监测麻醉实验动物的呼吸频率、心率、体温和血压等生命体征,比较麻醉后野生型巴马猪和基因...     

色氨酸对猪摄食和生长的调控作用及其机理

回顾1998牟第10版NRC猪营养需要发表以来,猪色氨酸需要量方面的研究进展,并结合本实验室在色氨酸方面的研究工作,讨论了色氨酸对仔猪生长轴IGF-1因子和胃肠调节肽Ghrelin分泌的调控,揭示了色氨酸在仔猪摄食和生长中可能的调控途径及其生物学意义。     

一个山羊Ⅰ型毛角蛋白基因的序列及其在皮肤中的表达

角蛋白家族包含表皮软角蛋白和毛发硬角蛋白，可以分为酸性Ⅰ型和碱性或中性的Ⅱ型角蛋白亚家族。从构建的成年山羊皮肤cDNA文库和ESTs分析中发现了和与绵羊羊毛角蛋白8C1和人Ⅰ型毛发角蛋白相应cDNA序列高度同源的序列，经序列分析证明是一个山羊毛发特异性角蛋白，命名为山羊Ⅰ型毛角蛋白1（gHa1），Gen Bank序列号为AY510110．1。推导的读码框ORF由413氨基酸组成，与绵羊8C1角蛋白的序列一致性为97．8％。原位杂交显示它在皮肤初级和次级毛囊的皮质层有强烈的表达。     

猪瘟兔化弱毒疫苗株TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

为建立一种快速鉴定猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)的方法,本研究根据GenBank中登录的HCLV株基因组序列,在Erns基因序列区内设计一对引物和一条TaqMan探针,建立了检测HCLV的荧光定量RT-PCR(FQRT-PCR)方法。该方法检测的灵敏度可达3.84拷贝/μL;而对猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、牛病毒性腹泻病毒基因组扩增结果均为阴性。实验组批内变异系数为1.05%～1.84%,批间变异系数为3.70%～5.43%。通过对32批HCLV半成品抗原和9批成品疫苗,分别用经典的兔检法测定兔体感染量(RID)和新建立的FQRT-PCR方法进行检测比较,两者有较好的相关性。结果表明,该方法具有快速、敏感、特异性强、稳定性好等优点,对HCLV生产配制及成品检验具有指导作用。     

C型利钠肽及其受体在水牛卵泡中的表达分析

为了探明C型利钠肽（C-type natriuretic peptide,CNP）及其受体（natriuretic peptide receptor,NPR）在水牛卵泡中的表达模式,本研究首先采用实时荧光定量PCR技术检测水牛卵巢中利钠肽家族主要成员A型、B型、C型利钠肽（ANP、BNP、CNP）及其Ⅰ型、Ⅱ型受体（NPR1、NPR2）的mRNA表达情况,然后利用免疫组化技术对水牛卵泡中CNP及NPR2蛋白进行定位,最后利用实时荧光定量PCR技术检测颗粒细胞和卵丘细胞中CNP及NPR2的mRNA表达规律。结果显示,水牛卵巢主要表达CNP及NPR2,且在各级卵泡中均有表达,其中,CNP主要在壁层颗粒细胞中表达,NPR2主要在卵丘细胞中表达;颗粒细胞上CNP mRNA表达水平显著高于卵母细胞周围的卵丘细胞（P<0.05）,而卵丘细胞上NPR2 mRNA表达水平显著高于颗粒细胞（P<0.05）。综上所述,在利钠肽主要家族成员和受体中,CNP和NPR2在水牛卵巢中呈现强表达,CNP主要在壁层颗粒细胞中表达,而NPR2主要在卵母细胞周围的卵丘细胞中表达。     

猪传染性胃肠炎病毒分子生物学研究进展

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)基因组为不分段的单股正链RNA,其编码4种结构蛋白和3种非结构蛋白。TGEV S蛋白是基因工程研究的重点,近年来,S蛋白在大肠埃希菌、沙门菌、腺病毒等中得到了高效表达。将传染性胃肠炎病毒的基因组人工改造成为感染性cDNA的表达载体,此载体可在ORF3处插入外源基因,异源基因绿荧光蛋白可稳定、高效地表达。TGEV基因1和其他冠状病毒相比保守性很强,所以对TGEV聚合酶的研究,特别是其中保守酶的研究,对于抗TGEV及其他冠状病毒药物的研究有着重要的意义。     

川北地区氮不同施用量对饲草玉米生产性能的影响

采用小区试验方法,在管理一致、播种密度一致的条件下,对科饲1号和玉草2号2个饲草玉米品种在追施纯氮300kg/hm2、375 kg/hm2、450 kg/hm2、525 kg/hm2水平下的产草量进行了研究,结果表明:科饲1号的处理4产量最高,处理4和处理3产量差异不显著,但与处理2和处理1(对照)差异显著.玉草2号也是处理4产量最高,与处理3产量差异不显著,与处理1(对照)和处理2产量差异显著.从总体上来看,不同品种之间产量差异显著.饲草玉米各品种处理的经济效益不同,玉草2号处理3的经济效益最高,比经济效益最低的科饲1号处理1高260.6%;相同品种内不同处理中均以处理3经济效益最高,其次为处理4,最低为处理1(对照).