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为了选育一种非抗性、高产出、遗传稳定性好、低生产成本的L-赖氨酸生产菌株,以辣椒花药和枯草芽孢杆菌为试验材料,以穿梭表达载体pHT43和基因敲除载体pK18mobsacB为媒介,将辣椒花药中的高赖氨酸基因CFLR转化到枯草芽孢杆菌中。经过2次细胞内同源交换和培养基筛选,最终获得不带质粒抗性标记的高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株CMCC(B)63501/pK18mobsacB-ΔALA::CFLR,该菌株连续传代20次后仍具有明显高于野生型的CFLR基因拷贝数,经HPLC验证,重组菌株L-赖氨酸含量比野生菌株提高了64.89%。结果表明,本研究所构建的非抗性高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株产量高、遗传稳定性好、低纯化成本,具有良好的应用潜力。 相似文献
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试验旨在研究猪腺病毒3型(PADV3) Protease蛋白在大肠杆菌中的表达,并制备该蛋白的多克隆抗体。利用PCR扩增PADV3 Protease基因,构建重组原核表达载体pET28a-PADV3-Protease和真核表达载体pEGFP-PADV3-Protease,采用双酶切和测序鉴定;将原核表达载体pET28a-PADV3-Protease转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞得到重组原核表达菌株,经IPTG诱导收集蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting鉴定,将目的蛋白纯化后与佐剂乳化制备免疫原免疫家兔,制备Protease蛋白多克隆抗体;将真核表达载体pEGFP-PADV3-Protease转染HEK293细胞经G418筛选建立稳定表达EGFP-Protease融合蛋白的细胞系,以该稳定表达细胞系为包被抗原,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测抗体的免疫活性与抗体滴度。结果显示,Protease基因开放阅读框(ORF)为615 bp,原核表达系统中Protease蛋白以包涵体形式存在,分子质量大小为23 ku,与真核细胞表达的Protease蛋白分子质量一致,该蛋白在细胞核与细胞质中均有分布,制备的Protease蛋白多克隆抗体能与EGFP-Protease融合蛋白稳定表达真核细胞系发生特异性的反应,与对照细胞无反应。本试验构建了Protease蛋白原核表达菌株和真核表达细胞株,制备的PADV3-Protease蛋白多克隆抗体免疫活性良好,为进一步研究Protease蛋白的生物学功能和PADV3的血清学诊断提供了基础材料。 相似文献
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经过静电处理的紫穗槐种子活力指标:电导率、呼吸强度、活力指数、脱氢酶活性及ATP含量分别为对照的91.7,112.7,129.7,128.7,107.5%;苗高、地径、合格苗产量、单株生物量分别比对照提高14.1,17.8,18.4,4.81%。 相似文献
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蜜蜂族Apini的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
本研究根据5种野生蜜蜂的地理分布重叠、形态、生态、生化上的差异,确立了现今世界上有6种蜜蜂,较原记载4种增加了2种。根据被子植物的起源、地球史(大陆板块学说)以及现存5种野生蜜蜂集中分布于横断山脉南端的事实,提出了蜜蜂族起源于中国喜马拉雅和横断山脉地区的新理论。 相似文献
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影响猪肉质因素的探讨 总被引:9,自引:0,他引:9
利用60头杂交组合试验猪从遗传和环境两方面探讨影响肉质的因素,结果表明,75-85V,2400-3000HZ的电击昏明显优于220V、50HZ,且对肉质无显著影响,肌肉温度若高于40℃,则对了长肌的PH值有显著影响;遗传材料不同,肌肉品质各异,因此,规范化的宰前处理和屠宰条件是正确评判肉质的前提,遗传材料是影响肉质的主要因素。 相似文献
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