斑节对虾性腺组织、细胞的原代培养条件优化

通过观察不同成分培养基及不同培养方法培养的斑节对虾性腺组织及细胞原代培养生长情况,分析细胞活力及生长相关基因表达情况,判断3种改良培养基的适用条件,为进一步细胞培养试验提供支持。试验结果表明,以L-15培养基为基础培养基,不同配方的培养效果差距较大,其中机械分离法可成功培养离体斑节对虾性腺组织,而酶解法与3号培养基结合效果较好;在培养过程中可见离体卵母细胞多呈悬浮生长,部分可见分裂相,离体精原细胞多呈贴壁生长,1号、2号培养基中的细胞可维持良好生长状态达一周以上;CCK测试结果表明,机械分离的性腺组织和酶解法分离的性腺细胞分别在1号、3号培养基中有更高的细胞活力,而2号培养基中的性腺组织及细胞在两种培养方法下的活力差别不大。进一步的荧光定量PCR检测了离体培养过程中MAPK信号通路相关基因的表达变化情况,结果表明,Ras、c-Mos、MEK1、ERK基因在卵母细胞中表达变化更显著,且c-Mos基因与离体细胞生长发育情况呈正相关。本试验系统性地筛选了适宜斑节对虾性腺组织、细胞的原代培养方法,为了解培养过程中的生理过程变化提供了相关参考数据。     

鲮生长激素的重组表达及其多克隆抗体的制备

IPTG诱导含有鲮（Cirrhinus molitorella）生长激素基因（growth hormone,GH）的工程菌M15（pQE30-GH）重组表达鲮生长激素蛋白。SDS-PAGE凝胶电泳结果表明,在24.5kDa处有1条重组表达鲮生长激素条带,经分离纯化、复性和浓缩后得到有活性的重组鲮生长激素蛋白。以复性浓缩后的重组鲮生长激素蛋白为抗原,采用改进的方法对新西兰大白兔进行皮下多点免疫注射,获得兔抗鲮生长激素多克隆抗体。经ELISA检测该免疫血清的滴度为12800。以该多抗为一抗,Western blotting可以检测到10ng的抗原量;并且在鲮垂体组织提取液中和血清中检测到一种能与该血清作用的大小约为21.5kDa的蛋白条带。说明该试验所制备的兔抗鲮生长激素多克隆抗体具有较好的免疫活性。     

水电站渣场松散堆积物边坡植物措施防治灌草种选择研究

指出了植物品种选择是工程边坡植物防护措施关键,应从生态适应性、功能综合性、抗逆性等方面考虑选择。以金安桥水电站同时具有明挖和洞挖弃渣的渣场为研究对象,通过植被分析及灌草种适应性分析确定了适宜灌草种。灌草种发芽播种实验结果表明：选择的10种参试灌草种自然发芽率最高的为高羊茅80．89％,除火棘外其余9种灌草种自然发芽率均大于75％;洞挖弃渣块石过多,灌草种保存率均低于30％,覆土后进行植物措施;明挖弃渣和弃渣覆土发芽率均大于60％且其56d苗木保存率均大于60％的5种灌草种为：紫羊茅、白三叶、黑麦草、高羊茅、白三叶,其播种后6个月苗木生长高度也较好。选择以上5种灌木、草本植物,可满足渣场边坡的防护要求。     

杂交水稻整精米率的遗传相关分析

本文用6个不育系与6个恢复系，组成6×6的不完全双列杂交，对杂交稻整精米率进行了遗传相关分析．结果表明：整精米率以加性基因效应起主导作用，且不育系的作用大于恢复系的作用．其广义遗传力和狭义遗传力，分别为65.23％和45．88％。整精米率的杂种优势居于双亲之间，偏向低值亲本。相关分析结果，整精米率与垩白率和粒长呈极显著的负相关；与出糙率呈显著的正相关．与精米率和其它外观品种质性状相关不显著．通径分析表明，垩白率、粒长和出糙率对整精米率的直接通径系数分别为-0．7548、－0．6967和0．4260．文中提出了提高杂交水稻整精米率的途径．     

斑节对虾谷氨酰胺合成酶基因的克隆及氨氮胁迫对其时空表达的影响

根据本实验室构建的斑节对虾(Penaeus monodon)c DNA文库得到的EST序列,利用RACE技术获得了斑节对虾谷氨酰胺合成酶基因(Pm GS)的c DNA全长序列,进行了相关生物信息学分析,在此基础上采用荧光定量的方法研究了Pm GS基因在斑节对虾不同组织、氨氮胁迫过程中差异表达情况。该序列全长1 420bp,开放阅读框(ORF)为1 086 bp,3'非编码区(UTR)为294 bp,包括含有27个碱基的poly(A)尾,5'非编码区(UTR)为40 bp。ORF可编码361个氨基酸,预测分子量为40.423 ku,理论等电点为6.19。序列含有一个谷氨酰胺结合结构域(Gln-synt_C),8个磷酸化位点,2个糖基化位点。斑节对虾和中国明对虾的GS基因的相似性最高,达99%。Pm GS-mRNA在斑节对虾各组织中都有表达,在淋巴组织中表达量最高,其次为鳃组织,在胸神经中的表达量最低。96 h高浓度氨氮胁迫后,Pm GS-mRNA在肝胰腺中的表达水平显著高于对照组,但在鳃中的表达水平显著低于对照组(P0.05)。以上结果暗示,Pm GS在氨氮代谢方面具有重要的作用,可能参与了斑节对虾机体的急性氨氮胁迫应答反应。     

一个未知的卷叶基因的识别和定位

利用籼稻窄叶青８号和粳稻京系１７的杂交Ｆ１以及衍生的ＤＨ系,对水稻籼粳交的卷叶性状进行遗传分析;结果表明,叶片平展对卷曲为显性,卷叶植株受两对隐性基因控制。应用ＤＨ系已构建的分子图谱将这两对卷叶基因定位于第１染色体的Ｃ９４９—Ｇ３７０和第５染色体的ＲＧ１３—ＲＧ５７之间,其中第１染色体的卷叶位点,与经典遗传图谱已定的ｒｌ－１位于同一区段,本研究沿用该名。第５染色体上的卷叶基因是一个未定位的新基因,暂定名为ｒｌ－７,且这两对基因存在基因互补作用。     

牦牛肝片吸虫分泌排泄抗原的生化特性和免疫印迹分析

肝片吸虫的分泌排泄抗原（ＥＳ抗原）在诊断及诱导机体产生抗体方面具有重要作用。本文对寄生于牦牛的肝片吸虫ＥＳ抗原的蛋白质组成及其生化特性进行了分析。ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳显示ＥＳ抗原共有９条带，主要由１２－２６ＫＤ的小分子量蛋白质组成；糖蛋白及脂蛋白染色后发现ＥＳ抗原中糖蛋白极少，而含有较多的脂蛋白；等电聚焦电泳结果显示ＥＳ抗原有２２条带，几乎全部是酸性蛋白，ｐＩ主要集中在４．２５～５．２５范围内；双向电泳共检出３０个多肽，主要分布在ｐＩ４．５～７．０之间；免疫印迹分析结果表明：ＥＳ抗原中分子量为１６．２ＫＤ～１８．６ＫＤ的蛋白质是主要的抗原成分，其中１７．２ＫＤ多肽具有最强的免疫原性。     

Identification of a chitinase-producing bacterium C4 and histopathologic study on locusts

In order to develop the potential of chitinase-producing micro-organisms as biocontrol agents for insect pests, five chitinase-producing bacterial strains (C1, C2, C3, C4 and C5) previously isolated from soil samples were chosen to infect grassland locusts. The data showed that the mortality rate of locusts fed with strain C4 was significantly higher than that of other groups, and its pathogenicity was confirmed by Koch's law. Midgut tissues of locusts infected with C4 were examined with a light microscope. Apparent histopathologic changes in midgut cells partly explained the pathogenesis of locusts. Therefore, strain C4 was considered to be a potential biocontrol agent. To determine the taxonomic position of C4, physiological and biochemical characteristics were determined and molecular identification was performed. The 16S rDNA gene of C4 was amplified, cloned and sequenced. Comparative sequence analysis demonstrated that C4 corresponded to the genera Sanguibacter, Oerskovia and Cellulomonas. On the basis of phenotypic characterization and sequence similarity analysis, strain C4 was more closely related to the genus Sanguibacter. This chitinase-producing strain C4, which closely corresponds to the species of the genus Sanguibacter and is pathogenic to locusts, is here reported for the first time.     

高产杂交水稻新品种川农优528的选育

川农优528是四川农业大学水稻研究所和重庆三峡农业科学研究所种子开发公司用恢复系蜀恢528与不育系Ⅱ-32A配组育成的中籼三系杂交水稻新组合。该组合具有产量高、稳产性好、抗性强、综合性状好、制种产量高等特点,2005～2006年参加重庆市区试,平均单产8.53 t/hm2,较对照Ⅱ优838增产7.24%。2007年通过重庆市农作物品种审定委员会审定(渝审稻2007003)。该组合适宜重庆及相同生态区域海拔800m以下稻区作中稻种植。     

安徽省沿江地区单季稻病虫害发生概况及防治

总结了近年来安徽省枞阳县老洲镇单季稻病虫害发生演变特点,提出了综合防治措施和明确主攻目标,抓主带次的总体防治策略与技术.