Identification of antigenic epitopes of the SapA protein of Campylobacter fetus using a phage display peptide library

In this study, we immunized mice with prokaryotically expressed recombinant surface layer protein, SapA, of Campylobacter fetus, generated hybridomas secreting mouse monoclonal antibodies (mAb) targeting SapA, and purified the mAb A2D5 from mouse ascites using saturated ammonium sulfate solution. The mAb A2D5, coated onto ELISA plates, was used to screen the phage random 12-peptide library through three rounds of panning. Following panning, 15 phage clones were randomly chosen and tested for reactivity with mAb A2D5 by indirect ELISA. Single-stranded DNA from positive clones was sequenced and compared with the sequence of SapA to predict the key epitope. ELISA and/or Western blot analyses further validated that synthetic peptides and recombinant peptide mimotopes all interact with mAb A2D5. Nine of ten positive phage clones identified by screening were sequenced successfully. Seven clones shared the same sequence HYDRHNYHWWHT; one had the sequence LSKNLPLTALGN; and the final one had the sequence SGMKEPELRSYS. These three sequences shared high homology with SapA J05577 in the region GNEKDFVTKIYSIALGNTSDVDGINYW, in which the underlined amino acids may serve as key residues in the epitope. ELISA and/or Western blot analyses showed that mAb A2D5 not only interacted with the four synthetic peptide mimotopes, but also with 14 prokaryotically expressed recombinant peptide mimotopes. The mimotopes identified in this study will aid future studies into the pathological processes and immune mechanisms of the SapA protein of C. fetus.     

miR-127和miR-136在转基因克隆绵羊胎盘中的表达分析及其靶基因的鉴定

克隆动物胎盘发育缺陷是造成动物克隆效率低下的一个重要原因。目前认为克隆胎盘发育异常通常是由于一些基因表达的异常所致,与表观遗传修饰有关。microRNA是一种重要的表观遗传修饰方式,对动物胚胎发育和胎盘的形成有着重要的调控作用。为研究miR-127和miR-136在克隆动物胎盘中的表达情况及其与克隆动物发育缺陷的关系,本实验运用荧光定量PCR分析了死亡克隆绵羊胎盘和同期普通绵羊胎盘组织中miR-127和miR-136的相对表达量,并鉴定了miR-127和miR-136的靶基因及靶基因在胎盘中的表达情况。结果显示,miR-127和miR-136在克隆绵羊胎盘中的表达量分别增加了3.1和2.8倍。EGFP荧光敲除实验证实,胎盘发育相关基因Rtl1是miR-127和miR-136的靶基因,同时定量PCR分析发现Rtl1基因在克隆绵羊胎盘中的表达量降低了3/5。结果说明,miR-127和miR-136在克隆胎盘中的异常表达可导致Rtl1基因的低表达,这很可能是导致克隆动物死亡的一个重要原因。     

中草药与卵黄抗体复合添加剂对肉鸡禽流感的保护效果

为研究中草药与卵黄抗体复合添加剂的效用，观察不同配比（1：1．1：08．1：0．5．1：0．2）的中草药与即黄抗体复合添加剂在AA肉公鸡日粮中的应用。试验结果表明．预防禽流感保护率达87．5％～97．5%．使用后在肉鸡体内的毒效期为18～21d．对肉鸡日增重、饲料转化效率有一定促进作用，其中．以1：1配比的应用效果最佳。     

汕头市猪场猪瘟和猪禽流感血清学监测报告

为了了解和掌握我市猪场的猪瘟免疫情况及感染高致病性禽流感疫病的可能性，我所分别于2005年2月和4月两次对全市范围内各类型的养猪场免疫猪瘟的猪只采集血清941份，进行猪瘟血清抗体监测和猪高致病性禽流感疫情血清学监测。现将监测结果报告如下。     

在中国奶业协会四届四次理事会暨2005年年会上的工作报告

我代表中国奶业协会秘书处向各位理事、各位代表报告一年来工作情况，并对明年重点工作提出安排意见，请审议。     

伊犁绢蒿荒漠草地围封后的土壤动态

本研究对伊犁绢蒿(Seriphidium transiliense)荒漠草地的土壤理化性质及光谱进行测定,探讨围封对土壤理化性质的影响和草地光谱的响应。结果表明,土壤含水量在各土层随植物生长期呈递减趋势,5月与9月土壤含水量随围封年限的延长总体上呈增加趋势,并对群落光谱和土壤含水量间关系进行建模,R2=0.63;土壤有机质随封育年限增加呈升-降-升的趋势,围栏内外有机质差值在5月随封育年限的增加而增加,封育7年、10年草地有机质差值,植物生长期内呈线性递减。通过室内土壤光谱及野外裸地光谱对土壤有机质进行建模,均取得较好效果,R2分别为0.64与0.38。研究表明,草地土壤含水量及有机质对于草地恢复状况较为敏感,可用于该类草地封育状况的监测。     

不同催情药物对提高母豪猪繁殖性能的影响

为探讨添加不同催情药物对豪猪产仔数、平均初生重等繁殖性能的影响。选取2岁左右、胎次及产仔数相近的母豪猪100头,随机分为5组,每组20头,分别饲喂5种不同的日粮：对照组为基础日粮,试验Ⅰ组为基础日粮＋催情散;试验Ⅱ组为基础目粮＋中草药制剂;试验Ⅲ组为基础日粮＋“牲命1号”;试验Ⅳ组为基础日粮＋胎盘,进行3个月的饲养试验,并跟踪记录受配母豪猪数、产仔母豪猪数、产仔数、平均初生重等繁殖情况。结果表明：在基础日粮中添加中草药制剂对提高豪猪繁殖率优于在日粮中添加催情散、“牲命1号”、胎盘,效果最佳。     

牛气肿疽的诊断及防治措施

牛气肿疽是由气肿疽梭菌引起牛的一种急性、发热性传染病。其特征为肌肉丰满的部位发生炎性气性肿胀,按压有捻发音,并常有跛行。6月龄至4岁的牛容易感染本病,肥壮牛比瘦弱牛更易感染。本病传染源为患病动物,主要传递因素是土壤。本病常呈散发或地方流行性,有一定的地区性和季节性。该病传播迅速,如防制不力,会年复一年地在易感动物中有规律地重复出现,甚至引起大规模的流行,从而造成巨大的经济损失。2007--2008年河池市的东兰县、凤山县、天峨县发生牛气肿疽,2007年发病死亡16头牛,2008年发病死亡27头牛,给群众造成了很大的经济损失。笔者采取及时、有效的防控措施,疫情得以控制,现报告如下。     

猪臭鼻克雷伯氏菌的分离与鉴定

从呼吸系统症状明显、高热、耳朵等薄皮处发绀的病猪血与病死猪的心血、肝、脾中分离到1株细菌，经形态学观察、生化试验鉴定为臭鼻克雷伯氏菌；经人工感染小白鼠试验，表明具有较强的毒性。选用药敏试验筛选的敏感药物——头孢曲松钠治愈了病猪，控制了疫情。