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181.
Judith Hübschen Lilo Kling Ulrike Ipach Volker Zinkernagel Nathalie Bosselut Daniel Esmenjaud Derek J.F. Brown Roy Neilson 《European journal of plant pathology / European Foundation for Plant Pathology》2004,110(8):779-788
Xiphinema diversicaudatum and X. index are vector nematode species of economic importance in viticulture regions as they can transmit Arabis Mosaic, Grapevine Fanleaf and Strawberry Latent Ringspot viruses to grapevine. Wang et al. (2003) designed species-specific diagnostic primers from ribosomal genes for both these vector species as well as a vector and a non-vector species X. italiae and X. vuittenezi, respectively. Our study aimed to confirm the specificity and determine the sensitivity and reliability of the primers for the two vector species, X. diversicaudatumand X. indexwhen challenged with closely related longidorid species and general nematode communities typical of vineyard soil. With one exception, no PCR product was observed when the primers were tested against six Longidorus, one Paralongidorus and one Xiphinema non-target species. Occasionally (three out of eight replicate PCR reactions) a weak PCR product was noted when primers for X. index were tested with L. elongatus. Furthermore, when challenged with a range of non-target nematode species comprising the nematode community typical of viticulture soil, no PCR product was amplified. An experimental dilution series of extracted DNA rigorously demonstrated that DNA from an equivalent single specimen of the target virus-vector species, X. diversicaudatum and/or X. index, could be detected amongst 1000 equivalent non-targetX. vuittenezi. Also, extracted DNA from an equivalent single target specimen was detected when added to DNA extracted from the overall soil nematode community. The primers were assessed further by using serial mixtures of actual nematodes rather than extracted DNA to simulate field soil. Using this method, a single target nematode could be detected amongst 200 non-target specimens. Given their specificity, sensitivity and reliability, it appears that these diagnostic primers will be of great benefit to phytosanitary/quarantine services related to the viticulture industry. 相似文献
182.
PRRS ELISA试剂盒检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
利用重组杆状病毒表达的PRRSV核衣壳蛋白作抗原制成ELISA诊断试剂盒,检测人工感染PRRSV猪血清、疫苗免疫抗体和田间血清,并与IDEXX公司生产的试剂盒进行比较。结果表明,该试剂盒在PRRSV感染后8天内就可检出感染性抗体,而用IDEXX公司生产的试剂盒在感染后的18天才检测到感染性抗体,对弱毒疫苗的免疫检测也基本能反映出疫苗的免疫应答状况。对华东地区PRRSV流行病学调查结果表明,PRRSV在国内普遍存在,同时也证明研制的试剂盒,是客观科学调查我国PRRS流行情较理想的检测工具。 相似文献
183.
184.
结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6、CFP10基因的克隆、鉴定及其原核表达 总被引:3,自引:0,他引:3
以人型结核分枝杆菌 H37RV株基因组 DNA为模板 ,应用 PCR法对 ESAT- 6和 CFP10基因进行扩增 ,产物经纯化后与载体 PMD18- T连接、转化及酶切鉴定 ,亚克隆到原核表达载体 PGEX- 6 P- 1,构建原核重组表达质粒 ,转化入大肠杆菌 BL2 1中 ,以 1mmol/L IPTG诱导 ,进行 SDS- PAGE电泳。结果表明 ,ESAT- 6和 CFP10基因表达的融合蛋白相对分子质量分别为 32 0 0 0和 36 0 0 0 ,与实测相符。重组结核杆菌分泌蛋白 ESAT- 6和 CFP10的成功表达为结核病诊断及重组疫苗的构建打下了基础 相似文献
185.
以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接,构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34 kD,与实际预测相符,命名为GST-OMPc.GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测.结果表明:纯化蛋白GST-OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应.OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础. 相似文献
186.
鸭疫里氏杆菌形态特征的电镜观察 总被引:8,自引:0,他引:8
自鸭传染性浆膜炎的病死鸭中分离鉴定的鸭疫里氏杆菌(RA)Ⅰ、Ⅱ型两个菌株,用负染法和超薄切片法制备样品,于透射电镜下进行观察。结果观察到约占1/3的RA具有特殊的形态结构:在细菌的顶端或侧面有1~2个与菌体相连的芽状赘生物,有的也能从菌体上脱落下来。它在超薄切片中的大小约为菌体的1/3~1/5,能观察到其内部也具有类似菌体内部的结构。且具有类似菌体的“细胞壁”,类似于核体部分的结构位于“细胞壁”的一侧。而用相同的方法制作的鸭大肠杆菌(E.cozi)对照样品,却见不到这种特殊的形态结构。说明这种形态特征可能是RA特有的。 相似文献
187.
188.
几种缓释肥的氮释放特性以及对草坪草生长的影响 总被引:6,自引:2,他引:6
实验室内采用水浸泡法对尿素、3种缓效肥和山西省农业科学院土壤肥料研究所研制(自研草坪肥)的缓效肥的初期溶出率和微分溶出率进行了测定.其中尿素的初期溶出率为22.75%,超出了国际上公认的缓/控释肥的初期溶出率小于15%的指标,而微分溶出率为0.22%,也小于国际上公认的缓/控释肥的微分溶出率(0.25%~2.5%)指标.其他几种缓释肥的初期溶出率为8.73%~14.42%,微分溶出率为0.30%~2.11%,符合国际上公认的缓/控释肥的初期溶出率和微分溶出率指标.田间试验比较和研究了尿素、3种缓效肥和山西省农业科学院土壤肥料研究所研制的缓效肥对草坪草的干草产量和养分含量的影响,尿素和包衣尿素处理的草坪草的生长量前期较高,后期产草量较低,呈马鞍型.其他处理的草坪草干草产量则比较平缓,肥料的氮释放特性与草坪草生长趋势相同.不同肥料处理对草坪草的中量、微量元素含量有一定的影响. 相似文献
189.
190.
借鉴发达国家经验完善我国兽药残留控制法规体系 总被引:1,自引:0,他引:1
自20世纪80年代以来.食品安全性问题始终是世界范围内人们关注的焦点。兽药残留是影响动物源食品安全的主要因素之一。美国、欧盟等发达国家重视兽药及其他化学物的残留控制问题.制定了一系列有关兽药残留控制的法律法规.包括兽药的生产、销售和使用。确保动物源性食品的安全。我国这方面的法律法规尚不完善.很难保证动物源食品安全.影响了国内消费者的信心.损害了我国动物源食品在国际贸易中的信誉。 相似文献