Glutathione content of in vivo and in vitro matured canine oocytes collected from different reproductive stages

Glutathione (GSH) concentrations of oocytes are considered as an important marker of the cytoplasmic maturation. The present study was designed to compare GSH concentrations of in vivo and in vitro matured canine oocytes. In vivo matured oocytes were collected 72 hr after ovulation by flushing fallopian tubes after laparotomy. Ovaries were collected from bitches with different reproductive stages, and collected oocytes were divided into 2 groups according to the size viz. < 120 microm and > 120 microm in diameter and cultured for 72 hr in Tissue Culture Medium-199 supplemented with 10% FBS, 2.2 mg/ml sodium bicarbonate, 2.0 microg/ml estrogen, 0.5 microg/ml FSH, 0.03 IU/ml hCG, and 1% penicillin-streptomycin solution in the presence or absence of 50 microM beta-mercaptoethanol. GSH concentrations were determined by the dithionitrobenzoic acid-glutathione disulfide (DTNB-GSSG) reductase recycling assay. GSH concentrations of immature canine oocytes were 2.9 and 3.8, 3.5 and 6.8, and 3.1 and 6.5 pM/oocyte for < 120 microm and > 120 microm in diameter oocyte groups at anestrous, follicular and luteal stage, respectively (P<0.05). In vivo matured oocytes had significantly higher GSH concentrations compared with in vitro matured oocytes. The GSH content was 19.2 pM/oocyte for in vivo matured oocytes, while 4.1 to 8.1 and 5.7 to 13.2 pM/oocyte for in vitro matured oocytes cultured in the absence or presence of beta-mercaptoethanol, respectively (P<0.05). Presence of beta-mercaptoethanol increased GSH synthesis in canine oocytes cultured in vitro, and oocytes collected from follicular and luteal stage was superior to anestrus oocytes.     

厄贝沙坦及其复方制剂中痕量杂质N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸残留方法学研究

采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)建立厄贝沙坦及其复方制剂中N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸(NMBA)的测定方法。采用Waters ACQUITY UPLC○RHSS T3色谱柱进行分离,以0.005 mol/L甲酸铵(用甲酸调pH值至3.0)为流动相A,甲醇为流动相B,梯度洗脱,质谱检测器,流速为0.3 mL/min。结果显示NMBA的线性范围为0.156 6~3.132 6 ng/mL,相关系数r>0.99,方法检出限浓度为0.047 0 ng/mL(相当于样品浓度0.01μg/g),定量限浓度为0.156 6 ng/mL(相当于样品浓度0.03μg/g),样品加标回收率在80%~130%。说明该方法可以快速、简便、灵敏、准确地测定厄贝沙坦及其复方制剂中NMBA含量。     

早开堇菜组织培养及植株再生体系的建立

以野生早开堇菜为材料,研究了不同外植体类型(子叶节、叶片、叶柄)和不同激素配比对其不定芽诱导、愈伤组织诱导和分化的影响,成功建立了早开堇菜组织培养植株再生体系。结果表明,1) 诱导子叶节和叶柄不定芽诱导的最适培养基为 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,叶片不适合作为直接诱导不定芽的外植体。2) 3种外植体均能诱导愈伤组织,子叶节愈伤组织诱导的时间最短,其次为叶柄,叶片最晚。子叶节和叶柄愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D,诱导率分别为98.3%和96.7%;叶片愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.05 mg/L NAA,诱导率可达88.3%。3) 最适愈伤组织分化培养基为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,分化率为100%。4)不定芽增殖的最佳培养基为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.075 mg/L NAA,增殖率为4.68。 5)再生苗移植到添加1.0 mg/L 6-BA的1/2 MS培养基上,生根率92.3%。6)组培苗移栽到珍珠岩∶河沙∶腐殖质(1∶2∶2)的混合基质时,100%成活,且植株长势好。     

发酵花生秧对番鸭生产性能、屠宰性能、血清生化指标及鸭粪常规成分的影响

本研究旨在探究发酵花生秧的营养价值及其对番鸭生产性能、屠宰性能、生化指标及鸭粪污染指标的影响,探讨利用发酵花生秧进行番鸭节粮养殖的可行性。选取15日龄的公番鸭360只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复15只。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组饲喂90%基础日粮+10%发酵花生秧,试验Ⅱ组饲喂85%基础日粮+15%发酵花生秧,试验Ⅲ组饲喂80%基础日粮+20%发酵花生秧,预饲期7 d,正式试验期48 d,测定并计算各组番鸭的生产性能、屠宰性能及各脏器指数,同时采集各组番鸭的血清、肌肉及新鲜粪样,测定血清生化指标及鸭粪常规成分的变化情况。结果表明,①与未发酵的花生秧相比,发酵后的花生秧粗蛋白质、钙水平分别上升31.82%（P<0.01）、97.40%（P<0.01）;粗纤维、磷及水分含量分别下降2.35%（P<0.05）、20.69%（P<0.05）、53.23%（P<0.01）,营养价值得到提升。②与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ组料重比分别下降6.51%（P<0.01）、6.84%（P<0.01）;试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的腿肌率分别上升20.50%（P<0.05）、25.55%（P<0.05）、9.27%（P>0.05）;肝脏指数分别上升9.90%（P>0.05）、12.23%（P<0.05）、3.18%（P>0.05）;肌胃指数分别上升17.70%（P<0.05）、30.82%（P<0.05）、36.66%（P<0.05）;腺胃指数分别上升1.37%（P>0.05）、32.99%（P<0.05）、36.43%（P<0.05）;③发酵花生秧可影响番鸭血清中TP、ALB、GLB、A/G、ALT、AST、AST/ALT、UREA、UA、CRE含量;与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组鸭粪中的总氮、磷、钾、水分含量均呈下降趋势。综上,10%、20%发酵花生秧饲料能显著提高番鸭的生产性能,明显降低增重成本,对番鸭的产肉性能无明显影响,但可能对其肝脏功能、肾脏功能、免疫功能有一定的影响。     

四川省一些实验动物养殖场SPF大鼠和小鼠肠内容物中金黄色葡萄球菌的检测

调查四川省一些实验动物养殖场的实验动物中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)携带情况,找出传播途径和进化规律,分析其污染原因,为保障实验动物质量提供技术支撑。按照GB/T 14926.14-2001《实验动物金黄色葡萄球菌检测方法》对2011年-2017年四川省部分实验动物中SA进行检测,对分离的SA菌株进行PCR耐药基因mecA检测,并应用金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococcus protein A,SPA)和脉冲场电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)进行分子分型。结果显示,2011年-2017年共从7家实验动物养殖场采集并完成370只实验动物中SA的检测,共检出SA 31株,总分离率为12.16%,且均从SPF大鼠中分离所得。31株SA的mecA基因均为阴性。SPA可分成5个型别,其中T2360为优势型别,PFGE型别有10个带型。四川省养殖实验动物中仅SPF大鼠携带SA,不同年份检出SA基因型别基本不同,不同养殖场同一年检出的SA具有相同基因型,说明不同养殖场中的SA可能来自同一污染源,应加强SPF大鼠监控,以确保实验动物的质量。     

四个绵羊品种MHC-DQA1基因exonⅡ多态性分析

为了比较和揭示洼地绵羊、杜泊羊、小尾寒羊及特克赛尔绵羊4个绵羊品种MHC-DQA1基因的遗传多态性,采用PCR-RFLP技术对4个绵羊品种224个样本的MHC-DQA1基因exonⅡ的315 bp片段进行多态性分析;并对基因型频率和等位基因频率进行统计,运用Popgen32软件计算相应的遗传参数.结果表明,AluI-R...     

乳源性益生元(百泰~-A)对西伯利亚鲟(acipenser baerii brandt)生长性能和营养成分消化率的影响

实验研究了不同剂量乳源性益生元(百泰-A)对西伯利亚鲟(Acipenser baerii Brandt)生长性能和营养成分消化率的影响。实验用西伯利亚鲟初始体重为(75±0.1)g,288尾鱼随机分4组,每组4个重复,每个重复18尾,实验周期为8周。基础饲料粗蛋白的含量为36%,粗脂肪为11%,总能为18.50 MJ/kg。实验料在此基础上分别添加0%(G0)、0.4%(G0.4)、0.8%(G0.8)和2%(G2)的百泰-A,各组饲料分别添加0.1%的Y2O3作为指示剂测定饲料营养成分表观消化率。实验结果显示:在饲料中添加百泰-A后各组西伯利亚鲟的增重率没有显著差异(P>0.05),饲料系数随乳源性益生元(百泰-A)的剂量增加而呈降低趋势,且G2组饲料系数显著低于对照组(G0)(P<0.05)。各组饲料干物质(88.2%)和蛋白质(64.8%)的消化率均没有显著影响(P>0.05);G2组总氨基酸(90.5%)的消化率显著高于G0.4组(88.8%)(P<0.05),与其他各组相比没有显著差异(P>0.05);G2组组氨酸(91.4%)、亮氨酸(90.8%)、苏氨酸(85.5%)、缬氨酸(89.5%)和赖氨酸(93.5%)的消化率显著高于对照组(P<0.05)。在西伯利亚鲟饲料中添加2%乳源性益生元(百泰-A)能够提高其对饲料中氨基酸的消化率和饲料利用率。     

不同预处理方式对苦豆子种子萌发及幼苗生长的影响

【目的】苦豆子（Sophora alopecuroides）是一种具有耐干旱、耐盐碱、抗风沙特性的豆科植物, 是水土保持的优质植物资源,为提高苦豆子萌发效果,本文分析了两种打破种子休眠方式的交互处理方法对苦豆子种子萌发及幼苗生长的影响,为苦豆子植物资源利用提供科学依据。【方法】根据硫酸浸种和热水浸种两种常见的打破苦豆子种子休眠的方式,设计交互试验,统计发芽率、发芽势、发芽指数、 活力指数、鲜重、干重、含水率及幼苗生长相关指标。【结果】在 20 个处理组合中,65%×80 ℃ 处理和 85%×20 ℃两种预处理方式在各指标方面均有较好表现。其中 65%×80 ℃ 处理组在发芽率、发芽势、 发芽指数和活力指数方面均为 20 种处理中最高,85%×20 ℃处理组萌发效果次之。在萌发速率与幼苗生长中,65%×80 ℃、85%×20 ℃两组处理下种子萌发时滞较短、萌发速率较快,幼苗生长情况优于其他组别,并与 0×20 ℃组差异显著。按浸种硫酸浓度分组,发芽效果由优到差为：85%＞75%＞65% ＞95%＞0,80 ℃ 热水浸种 20 min 的处理效果优于其他温度浸种。【结论】65%×80 ℃、85%×20 ℃两种预处理方式对加速苦豆子种子萌发、促进幼苗生长具有较优效果。本研究可为苦豆子种子萌发、幼苗建植的相关研究及生产实践提供科学依据。     

羊弓形虫病间接ELISA诊断方法的建立

为比较5种弓形虫抗原的诊断效果,建立实用的羊弓形虫病诊断方法,本研究制备了弓形虫速殖子全虫抗原和4个重组蛋白(GRA1、MIC3、MAG、BAG1),正交试验比较其免疫反应性,从中筛选出相对优势抗原并建立羊弓形虫病间接ELISA(iELISA)诊断方法,用于检测弓形虫特异的IgG抗体。研究结果表明：除BAG1外上述4种抗原均具有较好的免疫反应性,综合考虑选择致密颗粒蛋白1(GRA1)作为诊断抗原建立了GRA1-iELISA,其检测弓形虫抗体灵敏度大于1∶100(血清稀释度),且不与羊莫氏巴贝斯虫、吕氏泰勒虫、捻转血毛线虫阳性血清发生交叉反应,特异性良好;运用建立的方法和改良凝集试验分别对采自山羊屠宰场的80份血清样品进行检测,测得的弓形虫感染阳性率分别为28.75%(23/80)和31.25%(25/80),二者总符合率为82.5%。本研究建立的ELISA检测方法对羊弓形虫病的诊断以及商业化试剂盒的开发具有重要参考价值。     

种牛精液冷冻和保存效果研究进展

随着养牛业的高速发展,牛精液液体保存技术的研究也在逐步深入。人工授精技术降低了养殖成本,加速了肉牛的繁殖改良,同时还促进了育种工作的进程,合理有效的使用人工授精技术能够提高牛的饲养效益。与此同时,优良的种牛精液品质也是改良的关键,有实验结果表明：遗传、气候环境、饲养管理等因素会影响牛的精液品质[1],同时强制运动也是决定种牛精液品质的关键环节[2]。合理的精液冷冻与保存不仅能发挥优良的精液品质,同时也为人工授精技术的发展提供保障。本文从牛精液新型冷冻保护剂和损伤修复、牛精液冷冻保存添加剂、牛冷冻精在人工受精中的应用、冷冻保存的发展前景等方面总结了我国牛精液冷冻保存技术的研究和发展,以期对今后种牛精液冷冻和保存技术发展有所帮助、提供参考。