5-烯醇式丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)基因AM79 aroA的活性位点分析

AM79 aro A(WO/2009/059485)基因是从草甘膦高度污染的土壤中克隆的、具有我国自主知识产权的新型草甘膦抗性基因,具有重要应用价值。为进一步解析AM79 EPSPS蛋白的作用机制,本研究对此蛋白的活性位点进行了研究。进化树分析显示AM79 EPSPS属于Ⅰ型EPSPS。序列比对结果表明AM79 EPSPS中第107位的丙氨酸(Ala),第114位的苯丙氨酸(Phe),第355位的Ala和第356位的组氨酸(His)是特异的。采用重叠延伸PCR介导的核苷酸定点突变技术,对这些保守的氨基酸位点进行定点突变。将AM79 aro A及其突变基因转入大肠杆菌(Escherichia coli)aro A缺陷型菌株ER2799中,并进行草甘膦抗性鉴定。结果显示,Phe114、Ala355和His356等氨基酸的突变,使AM79 EPSPS蛋白的草甘膦抗性降低,表明这些氨基酸位点对于维持AM79 EPSPS高抗草甘膦的能力是必需的。同源建模结果表明,这些保守氨基酸位点的突变,使AM79 EPSPS蛋白的结构发生变化,这可能是导致突变蛋白草甘膦抗性能力降低的原因。两个Ⅰ型EPSPS(荧光假单杆菌(Pseudomonas fluorescens)G2EPSPS和拟南芥(Arabidopsis thaliana)EPSPS)对应氨基酸突变后,其草甘膦抗性没有明显变化,表明AM79 EPSPS中几个特异的氨基酸位点的功能在Ⅰ型EPSPS中并不是保守的。本研究结果为解析AM79 EPSPS高抗草甘膦的作用机理及对AM79 EPSPS进行定向进化提供了理论依据。     

贵州蕨类植物模式标本种的整理研究

经查阅文献,搜集并整理得到模式标本采自贵州的蕨类植物19科、46属、126种.模式产地涉及除六盘水地区外的贵州各地区,黔南地区51种＞安顺地区18种＞贵阳地区17种＞黔西南地区7种、铜仁地区7种、遵义地区7种＞毕节地区4种＞黔东南地区1种,产地不祥的14种.种数较多的科依次是鳞毛蕨科40种＞金星蕨科16种＞蹄盖蕨科15种＞水龙骨科10种.种数较多的属是耳蕨属11种,其次是贯众属10种.生长环境具有多样性,生长种数较多的生境依次是林下生长种类94种＞石上或石隙生长种类62种＞溪沟边生长种类41种＞阴湿环境生长种类30种＞河谷或峡谷生长种类23种.     

厚皮甜瓜新品种红宝玉的选育

红宝玉是以10R15 为母本、10R8 为父本选育而成的中熟厚皮甜瓜一代杂种。植株长势稳健，抗病抗逆性强。全生育期95～110 d（天），果实发育期30～35 d（天）。果实短椭圆形，成熟后果面乳白色，单果质量约1.5 kg，果肉橘红色，肉厚3.5～4.0 cm，腔小不发酵，中心可溶性固形物含量17.5%，肉质紧脆，不脱蒂，耐贮耐运。平均每667 m²产量3 600 kg 左右。适宜在山东、河北、陕西、安徽等地春季保护地设施栽培。     

诱导Paracin1.7生成的刺激因子的分离与纯化

旨在分离纯化枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中能够诱导细菌素Paracin1.7分泌的刺激因子,并探明其对副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei) HD1.7细菌素生成量及群体感应相关基因luxS表达的影响。本研究通过60%硫酸铵沉淀、CM Sepharose Fast Flow弱阳离子交换柱层析中度纯化及Superdex 75凝胶层析精度纯化,将获得的层析分离物与L. paracasei HD1.7共培养,检测共培养发酵液的抑菌活性及luxS基因的转录水平,并用SDS-PAGE与Native-PAGE检测分离物质。结果表明L. paracasei HD1.7抑菌活性为126.68%;luxS基因上调表达,为对照菌株的2.43倍;刺激因子的表观分子量约为30 kDa。本研究利用三步法初步分离纯化出诱导Paracin1.7生成的刺激因子,明确该刺激因子可以启动种间群体感应相关基因luxS,为L. paracasei HD1.7的群体感应研究奠定了理论和技术基础。     

ABA、H_2O_2与NO供体硝普钠对基因表达以及枣果发育的影响

枣在成熟期间遇到连阴雨天气会发生严重的裂果现象,这种基于基因表达的生理病害的发生与非生物或生物胁迫有关。以吕梁当地木枣为试材,在木枣成熟期,采用改良CTAB法检测组织中DNA纯度及含量的变化,研究ABA、H2O2与NO供体硝普钠(SNP)在枣果发育中对基因表达的影响。结果表明:ABA、H2O2与NO供体硝普纳(SNP)对枣果发育中DNA纯度及含量的影响不一,差异较为明显。其中不同浓度的ABA处理枣果组织中DNA的OD260/OD280比值基本不在1.700~1.900范围内,DNA纯度差异明显。但样品DNA含量较高,其值在1 200ng/μL左右;H2O2和SNP处理样品DNA的OD260/OD280比值基本上在1.700~1.900之间,DNA纯度较高。样品DNA含量基本上小于或在1 000ng/μL左右。外源ABA较为明显地干扰了基因表达,诱导了新蛋白质、RNA和酚类物质等的生物合成,有促进木枣果发育的趋势;而H2O2和NO供体硝普钠(SNP)对基因表达或枣果发育的影响不十分明显。     

文山州出口烟叶质量特点及可用性综述

阐述了英美烟草公司(BAT)与云南省文山州烟草合作历程,从烟叶物理质量特征、化学成分、感官评吸质量、安全性等方面介绍了文山州出口烟叶的质量特点及其等级与可用性,以供参考。     

王家沟小流域50a土地利用动态变化分析

以经过50多a水土保持综合治理的王家沟小流域为研究对象,利用其1959—2008年土地利用数据,对该流域土地利用动态变化进行分析。结果表明,调整土地利用结构是王家沟小流域水土保持综合治理的一项关键性措施。     

长杂2号在襄垣县的表现与高产栽培技术

对优质、高产谷子杂交种长杂2号的特征特性及其在襄垣地区的表现进行了分析,结果表明,该杂交种丰产、稳产、抗逆性强。针对其特点提出了相应的优质高产栽培措施:适时播种、适时喷除草剂并间苗、公顷留苗不应超过30万株、综合防治病虫害、及时抢收,为该品种大面积种植提供技术指导。     

高校图书馆人才危机及其对策

随着信息技术的发展和人们信息需求水平的提高,高校图书馆的人才危机也发生了变化,主要体现为高校图书馆馆员有限的能力与读者日益提高的信息需求水平的矛盾。这是由于高校图书馆馆员偏低的学历层次、不合理的学科结构以及较低的工作积极性所造成的。对此,提出了诸如建立有效的交流机制、激励机制、人员流动机制以及提升馆员学历层次等办法及建议,来缓和这一矛盾。     

吉林省国有林场职工社会保险问题调查报告

通过对吉林省国有林场职工参加基本养老保险、基本医疗保险等五险情况的调查,指出其存在参保比率低、缴费标准低、欠费额度大、待遇不一致和地区间不平衡等问题。到2013年底,全省国有林场已参加社会保险单位累计欠缴基本养老保险保费15.2亿元,未参保职工若全部纳入保险范围,尚需补缴保费63.2亿元,数额十分巨大。建议国家尽快出台政策解决企事业单位参保待遇不同问题,同时省级财政和中央财政资金补助要保障最低线,对按社会平均工资60%下限标准缴费部分要全额保障。