仔猪副伤寒血清抗体水平与其保护力的相关性研究

用已经建立的检测仔猪副伤寒血清抗体的Dot—PPA—ELISA，对不同仔猪副伤寒抗体水平试验组14头仔猪和对照组4头仔猪进行了血清抗体效价测定，并以沙门菌强毒攻击受试猪，测定血清抗体效价与保护力的关系。试验结果表明，以Dot—PPA—ELISA检测的仔猪副伤寒血清抗体几何平均效价不低于28^8.2时，85．7％的猪能够抵抗沙门菌强毒的攻击。试验初步确定以Dot—PPA—ELISA进行猪群免疫监测时，血清抗体的几何平均效价2^8.0。为仔猪副伤寒的保护临界标准，该标准的确定为集约化猪场用Dot—PPA—ELISA检测仔猪副伤寒血清抗体，进行仔猪副伤寒的诊断、免疫监测及流行病学调查提供了科学依据。     

新城疫病毒单克隆抗体的制备及与不同分离株的反应性

以纯化的新城疫病毒(Newcastle dis-ease virus,NDV)弱毒株La Sota为免疫原,接种6周龄~8周龄Balb/c小鼠。最后一次加强免疫后3 d,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合。以纯化的NDV建立了筛选单抗的间接ELISA,经多次检测,3次亚克隆,共获得5株NDV特异性单抗,这5株单抗与NDV不同分离株的反应性存在差异,表明部分NDV毒株抗原性发生了变异。     

联合检测兔巴氏杆菌和波氏杆菌病血清抗体的Dot-ELISA方法研究

兔多杀性巴氏杆菌病(Pm)和兔支气管败血波氏杆菌病(Bb)是家兔的两种主要细菌性传染病。兔波氏杆菌病可引起家兔的慢性鼻炎,兔巴氏杆菌病也可引起包括呼吸道在内的多种疾病。试验旨在建立一种简便、快速、经济、准确的联合检测Pm和Bb抗体水平的方法,可用于这两种疾病的免疫监测及流行病学调查。1材料1.1菌种兔巴氏杆菌Pm90株、兔支气管败血波氏杆菌Bb82株,为山东省农业科学院畜牧兽医研究所分离保存[1]。1.2血清大肠杆菌多因子血清、沙门菌多因子血清,购自中国兽药监察所;魏氏梭菌、兔瘟、Pm和Bb阳性血清,山东省农业科学院畜牧兽医研究所…     

猪瘟疫苗乳前免疫法及其在国内的应用

猪瘟 (Hog cholera)是由猪瘟病毒引起的猪的一种高热败血性传染病。该病在世界各养猪国家都有不同程度的流行 ,对养猪业的危害很大 ,是国际兽医卫生组织 (OIE)法定必检的 A类 16种传染病之一。猪瘟在我国曾有广泛流行 ,2 0世纪 5 0年代后期使用猪瘟兔化弱毒苗后 ,该病的发生曾得到一定的控制。但近 2 0年来 ,非典型性猪瘟发病增多 ,仔猪发病的报道也趋多见。免疫接种一直是猪瘟防制中的重要环节。随着各种抗体监测方法的建立 ,规模化猪场已科学的制定适合本场的猪瘟免疫程序。本文就猪瘟的乳前免疫及其在国内的应用作一介绍。1　乳前免疫…     

利用沙冬青抗寒基因AmEBP1 转化杏的研究

 利用花粉管导入法,将沙冬青抗寒基因AmEBP1 转化到‘大果’杏幼胚中,在改良WPM 培 养基上经卡那霉素筛选,PCR、Southern 检测,结果得到5 个转基因阳性株系;组培苗抗寒试验结果表明, 相同低温（–4 和–8 ℃）条件下,转基因植株均比对照表现出较高的成活率;随着处理温度的降低,转 基因株系REC 与MDA 含量始终低于对照植株;转基因植株的低温半致死温度（LT50）比未转基因对照 低2.13 ℃。试验结果表明导入的AmEBP1 基因提高了‘大果’杏的抗寒性。     

海南省畜禽养殖环境承载力及有机肥替代化肥潜力分析

为评价海南省各地区农用地环境污染风险程度,分析海南省有机养分替代化肥潜力,基于海南省2017年养殖数据,采用排泄系数法和农作物籽粒比,计算海南省畜禽粪尿和秸秆中氮磷钾养分总量;分析海南省各市县畜禽养殖承载力和环境污染风险系数,计算不同还田比例有机养分替代化肥潜力。结果表明:海南省2017年畜禽粪尿总量为1 110.9万t。畜禽粪便全部还田时,海南省养殖承载力为6 751.5万头猪当量。定安县和海口市农用地污染风险较大,分别为0.98和0.81;海南省秸秆和畜禽粪便氮磷钾养分总量为14.5万t,当还田比例分别为1/3、2/3和100%,有机肥替代潜力分别为4.2%、7.1%和14.1%。研究表明,海南省大部分地区暂无污染风险,且具有较大养殖空间和替代化肥潜力。     

黄山栾快繁体系建立优化培养方案研究

以黄山栾优良单株繁殖的种子为外植体,采用L9(34)正交试验设计方法,探索建立黄山栾快繁体系。通过实验,找到适合黄山栾种子无菌体建立的方法是:酒精消毒1min,升汞消毒10min;把消毒后种子放在湿润的无菌滤纸上可快速培养无菌苗;试验结果得出:适合侧芽生长的培养基是:MS+6-BA1.2mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.01mg/L;适合侧芽伸长生长的培养基组合是:MS+6-BA1.2mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.01mg/L;适合茎段愈伤组织增殖的培养基是:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.03mg/L;适合诱导茎段再生芽生长的培养基是MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.05mg/L。     

鸡肾型IBV山东分离株核蛋白基因的遗传变异分析

应用RT-PCR方法扩增到了山东省2006-2007年分离的10株肾型IBV核蛋白(N)基因片段,并将其进行了克隆、序列测定及分析.结果发现,10株肾型IBV分离株核蛋白基因均含有1个长1 230 bp的ORF,编码由409个氨基酸残基组成的多肽,未发现碱基的插入和缺失.与GenBank中的20个IBV参考毒株核蛋白基因序列进行比较和分析,发现10株肾型IBV分离株主要分布于2个群中.第Ⅰ群与弱毒疫苗株H120和参考毒株D41、D1466的亲缘关系较近,第Ⅱ群与参考毒株LX4、GDS14的亲缘关系较近.对核蛋白基因及其局部功能区序列比较发现,山东分离株与H120疫苗株核蛋白相比存在广泛的氨基酸变异,以点突变为主,突变位点无明显规律性.     

鸭新城疫病毒分离株抗原表位和遗传演化分析

从规模化养殖场鸭群气管和泄殖腔试子分离到新城疫病毒(NDV)27株,用2株针对NDV HN单抗进行抗原表位分析,并选择4个分离株进行F基因高变区(374bp)和HN基因全长序列分析。抗原表位分析结果显示,27个鸭分离株均能与其中一株单抗C3-B7反应,而与另外一株单抗1E5反应为阴性。F基因(374bp)序列分析结果显示,4个鸭分离株均属于NDV ClassⅠ分支,分离株之间核苷酸同源性为99.2%～100%;分离株与NDV ClassⅡ毒株遗传距离为0.9%～9.9%,与NDV ClassⅠ毒株遗传距离为38.5%～41.7%。根据核苷酸序列推导的氨基酸序列表明,4个鸭NDV分离株F蛋白裂解位点氨基酸模式为:112-EROERL-117。HN基因序列分析结果显示,4个鸭NDV分离株HN基因全长1851bp,编码585个氨基酸;同源性比较发现4个鸭NDV分离株之间核苷酸同源性为99.7%～99.8%,与NDV ClassⅡ毒株核苷酸同源性为68.4%～70.5%,与NDV ClassⅠ毒株核苷酸同源性为95.8%～98.0%。本研究结果显示,鸭分离毒均属于NDV ClassⅠ弱毒,在抗原表位和基因序列上与广泛应用的NDV弱毒疫苗株(LaSota)不同,这些毒株的来源有待进一步深入研究。     

鸡传染性支气管炎强毒分离株遗传进化分析和免疫保护试验

从山东省发病鸡群中分离鉴定了一株鸡传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）强毒株SDIB821/2012,对其进行S1基因序列测定分析和免疫保护试验。S1基因遗传进化分析结果显示,SDIB821/2012属于以QXIBV为代表的基因型,与同属一个基因型的IBV参考株氨基酸同源性为91.6%～98.5%,与疫苗株491同源性为77.6%,与H120和MA5同源性均为74.8%。免疫保护试验结果显示,根据试验鸡临床症状和发病死亡情况,弱毒活疫苗491对SDIB821/2012的保护率为90%,而H120和MA5对SDIB821/2012的保护率分别仅为40%和33%。攻毒后各免疫组喉头、泄殖腔棉拭样品以及气管、肺脏和肾脏组织均可检测到病毒,表明3种IB疫苗均不能对SDIB821/2012提供完全的免疫保护。