山羊传染性胸膜肺炎病原的检测

湖北某地羊场发生严重呼吸道疾病,经初步诊断为疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)。将患病山羊肺组织提取基因组DNA,以此为模板根据OIE推荐的PCR-REA方法和Mccp-specificPCR方法进行检测,结果这两种方法都得到了预期的片段。说明送检山羊肺组织中存在山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp),也证实了国内Mccp的流行。     

胸膜肺炎放线杆菌APXⅢA基因的克隆及原核表达

胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus Pleuropneumon- iae,APP)是引起猪传染性胸膜肺炎(porcine infec- tious pleuropneumonia)的病原菌。该菌为革兰阴性菌,根据其生长是否需要Ⅴ因子(NAD,尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸)可将其分为2个生物型,即生物Ⅰ型和生物Ⅱ型。生物Ⅰ型具有致病性。根据可溶性荚     

丝状霉形体山羊亚种巢式PCR检测方法的建立

根据已发表的丝状霉形体簇各成员核苷酸序列，设计合成了2对引物McF、McR和MmcF、MmcR，建立了可以鉴别丝状霉形体山羊亚种（Mycoplasma mycoides subsp．capri，Mmc）的巢式PCR方法。特异性和敏感性试验结果显示，该方法只能对Mmc扩增出195bp的片段，而对其他病原菌不能扩增出任何条带，它最低能够检测出10Pg的Mmc DNA，说明该方法具有良好的特异性和很高的敏感性。田间试验结果显示，对4株霉形体分离株及其病料均可扩增出Mmc特异性片段，表明，该巢式PCR方法可用于Mmc快速鉴定和流行病学调查。     

鸡舍有害气体简易检测方法

提出了用容积40L左右的干燥器收集鸡舍气体，经硼酸溶液吸收氨气，NaOH溶液吸收二氧化碳，最后通过滴定测定来监测鸡舍中氨气和二氧化碳的新方法。该方法成本低，简单，易操作，并可应用于其它环境的氨气和二氧化碳监测。     

安徽省部分地区Gl(a)sser氏病的流行病学调查

为了明确安徽省Gl(a)sser氏病的流行情况,通过间接血凝检测方法对安徽省部分猪场的Gl(a)sser氏病的流行情况进行了调查研究.结果表明,该地区总阳性率为7.69%,范围为2.38%～9.53%,其中母猪阳性率偏高,表明该地区猪场有副猪嗜血杆菌不同程度的感染.     

绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)丙酮酸脱氢酶E1-α亚单位基因(pdha)的克隆、表达及其免疫学活性测定

丙酮酸脱氢酶α-亚单位(PDHA)在病原体丙酮酸脱氢酶的催化过程中发挥着重要作用。为表达绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)PDHA蛋白并测定其免疫学活性,应用PCR方法扩增出绵羊肺炎支原体pdha基因并对其序列进行分析,将pdha基因中色氨酸密码子TGA优化为TGG后进行全基因合成,插入到pET32-a(+)载体上,构建了pET32-a(+)-pdha重组质粒,将重组质粒转化到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中诱导表达PDHA蛋白,并通过免疫印迹及小鼠(Mus musculus)免疫试验对其免疫学活性进行测定。结果pdha基因全长1125bp,编码375aa,(G+C)%为34.76%,第304~306位、379~381位、586~588位、592~594位、625~627位、811~813位、889~891位及964~966位TGA在支原体中编码色氨酸而不是作为终止密码子;基因序列比对及进化树分析显示,绵羊肺炎支原体pdha基因与10种支原体的pdha基因序列同源性为32.6%~85.3%,氨基酸序列同源性为39.3%~90.6%,基因序列和氨基酸序列均与猪肺炎支原体(M.hyopneumoniae)有同源性,分别为85.3%和90.6%;绵羊肺炎支原体pdha基因在33℃、IPTG0.25mmol/L诱导6h的表达条件下,表达量最高;重组的PDHA蛋白可与绵羊肺炎支原体高免血清具有免疫印迹条带,在免疫小鼠后血清抗体效价与对照组相比,均显著升高(P<0.05)。本实验首次成功克隆表达了绵羊肺炎支原体pdha基因,并证明其重组PDHA蛋白具有较好的免疫学活性。为绵羊支原体肺炎基因工程疫苗及诊断研究提供候选靶标。     

青海省部分地区猪传染性胸膜肺炎的流行病学调查研究

通过间接血凝检测方法对青海省部分猪场的猪传染性胸膜肺炎的流行情况进行了调查研究,研究结果表明本地区总阳性率为26.13%,其中母猪阳性率偏高。     

从山羊中检测山羊支原体山羊肺炎亚种

山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumonia,Mccp)最早由MacOwan 和Minette于1976年分离,是引起山羊传染性胸膜肺炎(Contagious caprine pleruopneumonia,CCPP)的病原体.~([1-2]).     

四川省部分地区副猪嗜血杆菌血清学调查

为了解四川省部分地区副猪嗜血杆菌病感染情况,采用副猪嗜血杆菌抗体检测间接血凝2006-2008年,四川省10个不同地区和不同来源的1062份血清样品进行了血清学调查,结果阳性率在2%～30%,平均阳性率为10%;不同日龄猪群阳性率不同,以30～70日龄断奶仔猪多发,达25%.表明:四川省部分地区均存在副猪嗜血杆菌病的不同程度感染,统计结果为四川省有效防制副猪嗜血杆菌病提供了参考依据.     

青海省绵羊肺炎支原体的血清学调查

［目的］调查绵羊肺炎支原体在青海省的流行状况。［方法］利用绵羊肺炎支原体抗体检测正向间接血凝试剂盒,对2006-2008年采自青海各地区的965份绵羊血清和208份山羊血清进行检测。［结果］绵羊血清阳性率为30.4%,山羊血清阳性率为19.7%;不同地区绵羊的阳性率范围为19.7%-40.2%,山羊阳性率范围为6.6%-22.2%;从季节上看,冬春季节发病率要高于夏秋季节。［结论］青海地区的绵羊肺炎支原体的感染率较西部其他地区偏高,应该加强对该病的防控。